枳椇醋对小鼠急性酒精中毒的预防作用研究

枳椇醋对小鼠急性酒精中毒的预防作用研究 枳椇醋对小鼠急性酒精中毒预防作用的研究 杨艳，李志西*，王玮瑜 （西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100） 摘 要：为确定枳椇醋对小鼠急性酒精中毒的预防作用，以生理盐水和中药提取液作对照，测定了小鼠急性酒精中毒的醉酒率、醉酒潜伏期、血液中的乙醇浓度等指标。结果表明：枳椇醋对小鼠急性酒精中毒具有显著的预防作用。三种受试物预防作用的大小顺序为：枳椇醋>中药提取液>生理盐水。 关键词：枳椇醋；急性酒精中毒；醉酒率 Study on the Prevention Effect of Hovenia acerba vinegar on acute alcoholism in mice YANG Yan，LI Zhi-xi*，WANG Wei-yu （College of Food Science and Engineering，Northwest A&F University,Yangling 712100,China） Abstract: In order to ascertain the prevention effect of hovenia acerba vinegar on acute intoxication in mice, using normal saline and extraction of chinese traditional medicine as contrast, indexes of ebriety rate, ebriety latency period, ethanol concentration in blood were determined. The results showed that, hovenia acerba vinegar had a significant prevention effect on acute intoxication in mice. The prevention effect of the three materials was: hovenia acerba vinegar> extraction Solution of Chinese Traditional Medicine> normal saline. Key words: Hovenia acerba vinegar; acute alcoholism；ebriety rate 食醋在古代被称为苦酒、醯、酢等，据报道，中国食用醋的时间已长达三千年之久[1]。随着酿造工业的发展和人民生活水平的提高，食醋已不单单是一种调味品，其保健功能已受到人们的高度重视，各种各样的保健醋层出不穷。果醋就是一种新兴保健醋的代表 [2-5]。 枳椇为鼠李科拐枣属(Hovenia Thunb.)的植物,又名拐枣、万寿果、金钩子。其果肉[6]含有丰富的糖类、氨基酸、维生素等营养物质[7-9]。枳椇醋就是以新鲜枳椇果肉为原料酿造而成的一种新型果醋，它口感醇厚，还具有一种独特的香味。另外枳椇醋在预防小鼠急性酒精中毒方面有着其独特的效果。本试验选取了传统的解酒中药葛根、枳椇子提取液为对照[10]，以小鼠为试验载体，以受试小鼠急性酒精中毒的醉酒率、醉酒潜伏期以及血清中的乙醇浓度为主要测定指标，研究了枳椇醋在预防急性酒精中毒方面的作用。 1材料与方法 1.1材料 枳椇：采于陕西省临潼市，采回后将果肉与枳椇子分离。果肉采用液态深层发酵法酿成枳椇醋，枳椇子去皮粉碎备用。 葛根：购于当地药店，粉碎备用。 小白鼠：ICR级，20±2g，购于第四军医大学动物中心。 枳椇葛根水提液（以下简称水提液）：将粉碎的枳椇子和葛根各10g加到1000ml自来水中，摇匀，超声波提取20min，超声波功率为350w。将提取液于4800r/min条件下离心15min取上清液，再将该上清液在45℃下旋转蒸发浓缩至其体积的1/4，备用。 小鼠灌胃用酒：52%（V/V）的乙醇，用无水乙醇与水按体积比52：48调配而成。 1.2主要仪器 榨汁机：KS-5000，上海科式制冷设备有限公司；全自动生化分析仪：ILab600STD，日本岛津；旋转蒸发仪：BUCHI，上海申玻仪器公司；超声波仪：舒美KQ218，江苏省昆山市超声仪器有限公司；台式离心机：TD5A，湖南凯达科学仪器有限公司；粉碎机：FW177，天津市泰斯特仪器有限公司。 1.3方法 1.3.1 小鼠醉酒判断标准 灌酒后，将小鼠背部向下放入笼中，若小鼠可保持此姿势30s以上，则认为小鼠翻正反射消失，即为醉酒。 1.3.2 小鼠急性酒精中毒醉酒剂量的确定 40只小鼠随机分成5组，每组8只。试验前禁食12h，自由饮水。试验时各组分别灌胃0.2mL/20g、0.25 mL/20g、0.3mL/20g、0.35mL/20g、0.4 mL/20g的52%（V/V）乙醇。观察小鼠从灌酒到醉酒的时间。 1.3.3枳椇醋对小鼠急性酒精中毒醉酒率、醉酒潜伏期的影响 24只小鼠随机分成3组，每组8只。试验前禁食12h，自由饮水。试验时对照组、水提液组、枳椇醋组分别灌胃0.2mL/20g的生理盐水、水提液、枳椇醋。30min后，各组均灌胃试验1.3.2中确定的灌胃剂量的52%的乙醇。观察记录小鼠醉酒潜伏期、10h内的醉酒率。 1.3.4 小鼠血液中乙醇浓度的测定 75只小鼠随机分成15小组，每组5只。再将每5小组编成一大组，即3大组，分别编号为A、B、C。试验前禁食12h，自由饮水。试验过程中，A组即为生理盐水组先灌胃0.2mL/20g的生理盐水，B组为枳椇醋组先灌胃0.2mL/20g的枳椇醋，C组为水提液组先灌胃0.2mL/20g的水提液，30min后各组再分别灌胃试验1.3.2中确定的灌胃剂量的52%的乙醇。灌酒后0.5h，将每大组的第一小组5只小鼠摘眼球取血，所取血液放入肝素钠抗凝的1.5mL离心管中， 37℃水浴静置15min，3000r/min离心15min，得血清。然后在灌酒后1h、1.5h、2h、3h分别将各大组的第二小组、第三小组、第四小组、第五小组的小鼠按同样的方法处理得其血清。用全自动生化分析仪，按照血乙醇测定试剂盒（长春汇力生物技术有限公司提供）说明测定小鼠血清中的乙醇含量。 2结果与讨论 2.1小鼠急性酒精中毒醉酒剂量的确定 不同剂量的52%乙醇对小鼠急性酒精中毒醉酒率、醉酒时间的影响见表1。由表1可知，灌酒剂量为0.2mL/20g、0.25 mL/20g的两组小鼠均无醉酒现象，而其余三组均有明显的醉酒现象发生。灌酒剂量分别为0.35 mL/20g、0.4 mL/20g的两组，虽然醉酒时间比较短，但死亡率比较高，分别为25%和50%。因此，选定0.3 mL/20g为小鼠的最适急性酒精中毒醉酒剂量。 表1 小鼠醉酒剂量选择试验结果（ ±s，n=8） Table 1. Ethanol dose experiment in acute alcoholism mice（ ±s，n=8） 剂量/（mL·20g-1） 醉酒率/(%) 醉酒时间/(min) 死亡率/(%) 0.2 0 — 0 0.25 0 — 0 0.3 87.50 58.75±3.05 0 0.35 100 9.50±1.38 25 0.4 100 8.00±1.16 50 注：表1中“—”代表改组小鼠未醉酒。 2.2枳椇醋对小鼠急性酒精中毒醉酒率、醉酒潜伏期的影响 相同剂量的生理盐水、水提液、枳椇醋对小鼠急性酒精中毒醉酒率、醉酒潜伏期的影响见表2。由表2可以看出，生理盐水组和水提液组的醉酒率均比枳椇醋组高；在醉酒潜伏期方面，枳椇醋组也比生理盐水组和水提液组低（P﹤0.05）。这说明枳椇醋在解除小鼠急性酒精中毒方面较生理盐水和水提液效果明显。 表2 枳椇醋对小鼠急性酒精中毒醉酒率、醉酒潜伏期的影响 Table 2. Effect of Hovenia acerba vinger on ebriety latency and ebriety rate of acute alcoholism mice(x±s,n=8) 组别 醉酒率/% 醉酒潜伏期/min 生理盐水组 100 137.37±2.12 a 水提液组 100 107.75±2.05a 枳椇醋组 87.5 89.63±1.48b 注：表中字母a，b为5％显著水平的字母表示，没有显著差异的记以相同字母，否则记为不同字母。 2.3小鼠血液中乙醇浓度的测定结果 表 3 不同提取物对急性酒精中毒小鼠血液中乙醇浓度的影响（ ±s，n=5） Table 3. Effect of Different extraction on serum ethanol concentration in acute alcoholism mice（ ±s，n=5） 组别 不同时间小鼠血液中乙醇浓度/（g/L） 0.5h 1h 1.5h 2h 3h 生理盐水组 45.47±0.12b 80.40±0.10a 80.92±0.28a 75.28±0.15a 59.02±0.26a 枳椇醋组 38.98±0.21c 52.39±0.17c 52.86±0.19b 49.54±0.22b 27.71±0.15b 水提液组 55.70±0.24a 69.21±0.20b 77.79±0.13a 72.47±0.16a 59.98±0.20a 注：表中字母a，b为5％显著水平的字母表示，没有显著差异的记以相同字母，否则记为不同字母。 灌胃52%的乙醇后0.5h、1h、1.5h、2h、3h小鼠血液中的乙醇浓度结果见表3和图1。由表3和图1可知，与生理盐水比水提液、枳椇醋均有降低小鼠血液中乙醇含量的作用。各组小鼠均在灌酒后1.5h，血液中乙醇浓度达到最大。枳椇醋组小鼠血液中的乙醇浓度一直较生理盐水组和水提液组的小鼠血液中乙醇浓度低（P﹤0.05）。在3h时枳椇醋组小鼠血液中乙醇浓度降到了27.71 g/L，而生理盐水组和水提液组均在59 g/L以上。这说明枳椇醋降低急性酒精中毒后小鼠血液中乙醇浓度的作用显著。 3小结 （1）急性酒精中毒又称记性乙醇中毒，是由于一次性饮用过量的酒精或酒类饮料，所引起的中枢神经系统由兴奋转为抑制状态[11]。它可导致中枢神经系统、消化系统和其它系统的各类病状。 （2）通过试验得出枳椇醋在预防小鼠急性酒精中毒、降低小鼠血液中乙醇含量方面均有较好的效果。尤其在降低小鼠急性酒精中毒后血液中乙醇浓度方面有显著的效果。 参考文献： [1] 黄仲华.我国食醋工业的回顾与展望[J].中国酿造, 1992(3):1～4. [2] 董玉新，郭德智．果醋开发及果醋工艺研究[J]．新产品，2001,7(2):123-125． [3] 吴朝霞，金螺，张悦．国内外保健醋生产的发展状况及展望[J]．沈阳农业大学学报，2001，32(2)：155-158． [4] 魏宗萍，李志西.桑葚醋减肥作用的动物实验研究[J].中国酿造,2005,12：5-7. [5] 樊艳丽,刘耀玺,李志西.仁用杏醋的减肥降脂作用研究[J].西北农林科技大学学报(自然科学版)2008,36(8):209-212. [6] 符树根,江庆中. 枳椇果特性与饮料开发研究[J].中国林副特产2007(6）：21-23. [7] 江庆中，符树根.枳椇综合利用研究[J].江西林业科技2004,6：3-6. [8] 丁向阳.枳木具种质资源及利用[J].经济林研究2005,23(3):85-88. [9] 于斌如, 汤银红. 枳椇子的研究进展,[J].2004,15(9):60-610. [10] 唐·孟宪冼，张鼎.食疗本草.人民卫生出版社1984〔第1版),28. [11] 中华医学会第四届脑血管病会议.各类脑血管病诊断要点.中华神经科杂志[J].1996，29（6）：379-380.