_祛斑霜_治疗黄褐斑作用机制的临床及实验研究

第 22 卷第 2 期 2000 年 6 月　 　 　大 连 医 科 大 学 学 报 Journal of Dalian Medical University 　 Vol. 22 , No. 2 　Jun. 2000 文章编号 : 1000 - 5676 (2000) 02 - 0112 - 02 “祛斑霜”治疗黄褐斑作用的临床及实验研究 胡　军1 Ξ , 孔　力1 , 鲁春光1 , 郝立宏1 , 朱耀寰2 , 刘　耘2 , 张立秋2 (11 大连医科大学组胚学教研室 , 辽宁 大连 116027 ; 21 大连医科大学第二临床学院中医科 , 辽宁 大连 116027) 摘要 : 为探讨“祛斑霜”治疗黄褐斑的作用机制 , 对黄褐斑患者外用“祛斑霜”前后血清中 SOD 活性的变化以及皮肤外涂“祛斑霜”的小鼠局部皮肤组织液中 SOD 活性的变化进行了检测分析。 结果明 , 用药后黄褐斑患者血清及实验小鼠用药处皮肤组织液 SOD 活性均明显增高 , 表明提 高机体 SOD 活性 , 清除多余超氧自由基 , 减少黑色素形成 , 是“祛斑霜”治疗黄褐斑的作用机 制之一。 关键词 : 祛斑霜 ; 黄褐斑 ; 超氧自由基 (O -2 ) ; 超氧化物歧化酶 (SOD) 中图分类号 : R75814 + 2 　　　文献标识码 : A 　　黄褐斑是常见的面部色素代谢障碍性皮肤病 , 对人的健康影响不大 ,但由于影响人的容貌 ,所以患 者求治心切。但是 ,黄褐斑的发病原因和产生机制 比较复杂 ,至今尚不完全清楚 ,临床上对该病的治疗 目前也无特效药物。我们总结多年临床经验 ,选用 具有养颜祛斑增白作用的人参皂甙、白茯苓等中药 研制成“祛斑霜”,用于治疗黄褐斑。黄褐斑患者治 疗一周后 ,面斑明显减轻 ,由深黑褐色减弱成浅褐 色 ,面积逐渐减小 ;继续治疗两周后 ,面斑散在 ,色 淡 ,皮肤细腻 ,有光泽 ,可见疗效显著。为探讨“祛斑 霜”治疗黄褐斑的作用机制 ,我们对黄褐斑患者治疗 前后血清 SOD 活性及实验小鼠皮肤组织液 SOD 活 性的变化进行了研究 ,结果报告如下。 1 　实验对象及条件 111 　临床资料 黄褐斑患者 9 例 , 均为女性 , 年龄 31～44 岁 , 平均年龄 39 岁 , 发病时间最短 2 周 , 最长 10 年。 黄褐斑皮损面积占面部三分之一以上 , 其中因妊娠 引起的继发性黄褐斑 5 例 , 特发性黄褐斑 4 例 ; 排 除引起色素沉着病的器质性疾病。对照组 10 例均 为健康女性志愿者 , 年龄与黄褐斑组无明显差异。 112 　实验动物 昆明种健康小鼠 20 只 , 体重 20 g ±2 g , 随机 分成实验组及对照组 , 每组 10 只。由大连医科大 学实验动物中心提供。 2 　实验方法 211 　人血清的制备 分别于治疗前及患处局部涂抹用药 , 治疗一个 月后取患者的静脉血 , 常规分离血清 , 备用。 212 　小鼠皮肤 SOD 组织匀浆的制备 将实验组小鼠左侧背部皮肤毛剃光 , 皮肤局部 外涂“祛斑霜”, 每日一次 ; 对照组局部外涂生理 盐水。连续给药 30 d。 将小鼠用乙醚麻醉后 ,速取其涂药部位皮肤 ,用 冰冷的生理盐水冲洗 ,除去血液 ,用试纸拭干 ,然后 剪碎 ,加入预冷的匀浆介质 ,在冰水浴中研磨 ,移入 离心管 ,离心 (1700 g ,15 min) ,取其上清即为小鼠皮 肤的组织匀浆 ,备用于 SOD 酶活性的测定。 213 　SOD 酶活性测定 SOD 测定方法采用黄嘌呤氧化酶法 , 选用南京 建成生物工程研究所生产的 SOD 生化测定试剂盒。 测定时 , 样品和试剂均要垂直加入试管 , 充分混匀Ξ 通讯作者 : 辽宁省大连市中山路 465 号大连医科大学组胚学教研室 , 电话 : 0411 - 4720228 © 1994-2009 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 10 min , 置 37 ℃恒温水浴 40 min。然后倒入 1 cm 光径比色杯中 , 蒸馏水调零 , 波长 550 nm 处比色。 3 　结果 311 　“祛斑霜”治疗前后黄褐斑患者血清 SOD 酶 活性检测结果 (表 1) 。 表 1 　治疗前后患者血清 SOD 酶活性 组 　别 例数 €x ±s (U/ L) 对照组 10 13515 ±20109 治疗前 9 10815 ±3012 3 治疗后 9 13518 ±21127 3 33 与对照组比较 P < 0105 　3 3 与治疗前比较 P < 0105 从表 1 可见 , 黄褐斑患者治疗前血清 SOD 活 性显著低于对照组 ( P < 0105) ; 治疗后 SOD 活性 明显增加 , 与黄褐斑组治疗前有显著性差异 ( P < 0105) 。 312 　小鼠外涂“祛斑霜”后皮肤组织液 SOD 活性 检测结果 (表 2) 。 表 2 　小鼠皮肤组织液 SOD 酶活性 组 　别 例数 €x ±s (NU/ mg 蛋白) 对照组 10 56107 ±4113 3 3 3 实验组 10 108148 ±34155 3 3 33 3 3 与对照组比较 P < 0101 从表 2 可见 , 小鼠外用“祛斑霜”组涂药处皮 肤 SOD 活性明显升高 , 与对照组有显著性差异 ( P < 0101) 。 4 　讨论 黄褐斑的发病原因 ,已经实验证明的一点是由 于黑色素增多形成的。黑色素是由它的前身苯酚类 通过一系列氧化反应过程形成的 ,超氧自由基 (O2) 可促进该反应。自由基是指化合物分子中的共价健 在体内代谢过程中发生均裂后形成的外层轨道具有 不成对电子的原子或原子团 ,具有极为活泼的化学 性质[1 ] 。超氧自由基不仅本身性质活泼 ,而且是自 由基连锁反应的启动剂 ,进而形成细胞毒性更大的 羟自由基[2 ] 。正常健康者体内超氧自由基的形成和 清除处于一种动态平衡状态 ,自由基不断产生 ,也不 断被清除。能使自由基丧失其不配对电子 ,并失去 其自由基特性的一类物质为自由基清除剂。超氧化 物歧化酶 (SOD)是体内唯一以超氧自由基为底物的 金属酶 ,是超氧自由基的有效清除剂。生理情况下 , SOD 能有效清除并阻止超氧自由基引发的自由基连 锁反应 ,维持自由基产生和清除间的动态平衡。而 本实验结果显示 : ①黄褐斑患者血清中 SOD 活性显 著低于对照组 ( P < 0105) ,提示患者体内 SOD 活性 由于某种原因 ,如内分泌、药物或某些疾病的作用而 降低 ,使 SOD 不足以清除生理水平的超氧自由基 , 导致超氧自由基净水平的增加 ,而超氧自由基作为 启动因素 ,使氧化反应加剧 ,导致黑色素形成过多 , 而形成黄褐斑。②用“祛斑霜”治疗黄褐斑 ,能使患 者血清中 SOD 活性明显增高 ,与治疗前有显著性差 异。③外涂“祛斑霜”能使实验动物皮肤组织液中 SOD 活性明显升高。提示“祛斑霜”外用后 ,能渗入 皮肤组织细胞 ,并由毛细血管吸收 ,进入全身血液循 环 ,提高局部皮肤和全身的 SOD 活性 ,从而调节细 胞内超氧自由基的产生 ,消除多余自由基 ,使黑色素 的形成受到抑制而对黄褐斑产生疗效。这可能是 “祛斑霜”治疗黄褐斑的作用机制之一。当然 ,“祛斑 霜”治疗黄褐斑可能还有其它作用机制 ,有待于进一 步探索。 参考文献 : [1 ] 汤爱民. 氧自由基、超氧化物歧化酶与皮肤病 [J ] . 临床皮肤 科杂志 , 1988 , 6 : 314 - 315. [2 ] 王明臣. 血清超氧化物歧化酶、同功酶活力与衰老关系的初探 [J ] . 中华老年医学杂志 , 1992 , 11 (5) : 287 - 288. The clinical and experiment study of the mechanism of the‘Removing - macule Cream’in treating patients with chloasma HU Jun , KONGLi , LU Chun - guang Department of Histology and Embryology , Dalian Medical University , Dalian 116027 , China Abstract : To inquire into the mechanism of the‘Removing - macule Cream’in treating patients with chloasma , we measured and analyzed the change of SOD in homognizer of the mice skin and in serum of the patients before and after treatment . The result showed that the level of SOD activity increased remarkably. The study showed that elevating SOD activity , clearing away the unnecessary O2 to reduce the melanin formation is one of the mechanism of the‘Removing - macule Cream’in treating patients with chloasma. Key words : Removing - macule Ceram , Superoxide dismutase (SOD) , Superoxygen free radical (O -2 ) , chloasma (收稿日期 : 1999 - 11 - 24 　修回日期 : 2000 - 03 - 20) 311第 2 期 胡 　军等∶“祛斑霜”治疗黄褐斑作用机制的临床及实验研究 © 1994-2009 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net