奶牛早期妊娠诊断研究进展

第 3期 奶牛旱期妊娠 诊断饼 究进屋 刘瑞生 (甘肃省畜牧兽医研究所 ，平凉 744000) 奶牛配种(或受精)后不久 ，进行早期妊娠诊 断，以便加强怀孕母牛饲养管理，保证顺利分娩或 对未孕母牛及时配种，缩短产仔间隔。提高繁殖效 率。生产实践中广泛应用的直肠检查等方法。尽管 简单易行 ，不需特殊设备，但费时长，且判断结果 不够准确，影响奶牛生产，因此奶牛早期妊娠诊断 方法研究引起了普遍重视。近 3O年来奶牛早期妊 娠诊断方法研究发展很快，新的诊断方法不断问 世，其总的趋势是向着快速、简便、经济方向发展。 1 超声波诊断法 超声波诊断法是把超声波的物理特点和动物 组织结构的声学特点密切结合的一种物理学诊断 法。它是以高频声波对奶牛的子宫进行探查，然后 将其回波放大后以不同的形式转化成不同的信号 显示出来。应用的超声波诊断仪主要有 A超、B超 和多普勒超声(D超)三种，以多普勒超声应用常 见。80年代末国产兽用的超声多普勒仪和仿制的 A型测孕报警仪问世后开始应用于奶牛妊娠诊断 研究，郑星道等(1988)采用 SCD一Ⅱ型兽医用超声 多普勒检测仪对 483头乳牛进行了早期怀孕诊 断。最早探测宫血音、胎心音、胎血音的时间分别 为 16d、50d、59d，宫血音在配种后 16—30d、31—5od 的符合率分别 为 92．93％(1841198)、97．91％(141／ 144)．配种后 51—79d及未怀孕的符合率分别为 100％(116／116)、100％(36／36)：胎血音在配种后 59— 65d、70—85d的符 合 率 分 别 为 48．15％(13127)、 90．35％(25127)。试验证明，检测宫血音的时间比胎 心音、胎血音提前 30---40d左右，并与直肠检查法相 比较，其符合率高，因此乳中的早期怀孕诊断可用 宫血音作 为判定怀孕 的主要依据 。陈兆英等 (1990)应用超声多普勒仪从直肠探查宫血音，诊 断奶牛中后期妊娠的结果与直肠检查的全部符 合．证明这种方法不仅可以用于妊娠早期的奶牛， 回 也可在奶牛怀孕的中后期供诊断之用。马群山等 (1999)用 DRS超声波仪对配种后 21_45d的62头 母牛进行妊娠诊断，与直肠检查法比较，妊娠符合 率为 98．o4％，空怀符合率为72．73％(8／11)。张寿等 (1999)应用 SCD—II型兽用超声多普勒仪检查宫 血音，对 51头受配乳牛进行了早期怀孕诊断。并 与直肠检查结果进行验证，结果 20—3od、31—61d、 61—75d的符合率分别达 86．7％、10o％和 10o％。对 12头未孕牛检测的符合率为 100％。B超由于仪器 价格较高，体积较大，在猪、羊妊娠诊断中有一些 报道，在奶牛妊娠诊断中仅见邓干臻等(2004)使用 实时 B超法对不同妊龄的 137头黑白花奶牛进行 了妊娠检查。早期妊娠检查声像图主要现为妊 囊和／或胚斑，探查到其中之一者即可确诊为妊娠， 配种后 26—30d妊娠检查确诊率高达 88．9％。高于 50日龄左右的直肠检查 ：配种后 31—35d时的确诊 率为 97．2％。配种后 35d以上者。确诊率均达到 100％。B超诊断法快捷、简便、准确率高，对早期妊 娠以实时图像显示，具有客观性，是一种良好的早 期妊娠诊断法。靳智勇(2008)应用兽用超声多普 勒仪对 8O头奶牛进行了早期妊娠诊断，并与直肠 检查结果进行分析比较，其结果：配种后 25—39d、 40—60d和 61—80d采用超声多普勒仪诊断的符合 率分别为 84．O％、97．1％和 100％；对 8头未怀孕的 奶牛检测符合率为 100％，总符合率为 93．8％。结果 表明，应用超声多普勒仪检测宫血音进行奶牛早期 妊娠诊断效果明显。与直肠检查相比．超声波诊断 法操作简便，容易掌握，省时省力，仪器价格不高， 可以完全取代奶牛场中沿用已久的直肠检查法。 2 血小板计数法 母畜怀孕后的受精卵，特别是桑椹胚将产生 一 类乙酰化的甘油磷脂，即血小板活化因子(英文 全称 ，PAF)。PAF将引起不依赖于 ADP释放和产 维普资讯 http://www.cqvip.com ：III曩l l第3期 生四烯酸代谢的血小板凝集，特别是胚胎性 PAF 能够介导妊娠母体对胚胎的识别，而引起母体妊 娠的最初反应——血小板减少。O’Neill(1985)发 现在小鼠早孕期外周血小板计数明显减少 ，是母 体对妊娠识别的最初全身性反应。陈学峰等(1998) 对 20头未孕母牛血小板正常值的测定结果为 496．5x109／L~66．5~109／L．对 30头受配母牛进行血 小板值变化和最佳血检时间的试验 。结果表明 ，22 头妊娠母牛于配种后第7d血小板值明显减少，而 8头未妊娠母牛则无明显变化。根据妊娠母牛配种 前后血小板值差>192．3x109／L为妊娠，对 30 头受配母牛进行超早期妊娠诊断试验．经直检妊 娠母牛符合率为 86．36％。空怀母牛符合率为 87．5％。马群山等(2OOO)根据配种前血小板的平均 值 536~103／mm 与配种后第 7d血小板降到最低的 平均值 41lxl03／mm 之差等于或大于 70~103／mm 作为判定妊娠的标准 。对 198头母牛进行早期血小 板计数妊娠诊断 。与直肠检查法 比较 ，其妊娠和空 怀的符合率分别为80．67％(96／119)和 89．87％(71／ 79)。李助南等(2005)应用血小板计数法对奶牛超 早期妊娠进行诊断，结果表明：2O头未孕母牛的血 小板测定值为 (494．9+6．9)xlO 个／L)，与之相比，22 头妊娠母牛的血小板测定值极显著减少 (P0．05)。采用血小板计数法进行奶 牛早期妊娠诊断具有时间早、方法简单 ，易学易用 ， 准确率高等优点，值得推广应用。 3 硫酸铜法 Koch(1983)报道 ，母牛受孕后不久 ．乳和血清 中会出现早孕因子(EPF)，它是一种妊娠依赖性多 分子蛋白质复合物，它的出现和持续存在能够特异 性地代表受精和孕体发育，所以它是早期妊娠诊断 的一项重要指标。硫酸根可使早孕因子发生凝集， 用未定性分析乳中早孕因子含量 ，从而达到早期妊 娠诊断的目的。取常乳和末把乳各 lmL于玻璃平 皿中，滴入 1—3滴 3％硫酸铜溶液并迅速混合均 匀，呈现云雾状沉淀者为阳性，反之为阴性。配种 后 16—35d内为最佳检乳时期，早、中、晚3个时间 采集的奶样，以中午乳汁检查与直检对照的符合率 最高。将常乳和末把乳同时检测其符合率较高(朱 顺国，1991)。郑昌乐等(1990)用硫酸铜法对 160头 奶牛进行试验，乳检与直检相对照，阳性总符合率 为 87．8％．阴性总符合率为 79．3％。王应安等 (1996)采用硫酸铜法对人工授精后 16—40d的74 头荷斯坦奶牛的 124份乳样进行早期妊娠检测，结 果与人工授精后 40—60d经直肠触诊结果核对，阳 性符合率为 88．37％．阴性符合率为 87．09％。何勇 军等(2001)对 21头奶牛试验。3％硫酸铜法对于怀 孕牛和未怀孕牛的检出率分别为 70％和 63．6％，认 为作为一种辅助诊断方法是基本可行的。试验选用 的奶牛头数较少，致使试验结果较前人做的略低。 李青旺等(2004)采用 3％和 5％硫酸铜液 57头黑 白花母牛进行早期妊娠诊断，通过直肠检查确诊， 结果 3％硫酸铜液乳检的总阳性率为 87．14％，5％ 硫酸铜液乳检的总阳性率为 84．8％。硫酸铜法对奶 牛早期妊娠诊断的符合率较高 ，方法简便、快速，易 操作，药品来源广泛，价廉，适合牛舍现场操作，在 奶牛场可作为一种早期妊娠诊断的常规方法应用。 4 血清酸滴定法 妊娠母牛在胚胎快速生长的过程中．机体产生 一 种特有的免疫球蛋白，它在酸性环境 中具有与其 它蛋白质形成低溶性复合物(絮状物)特性 ，据此可 以对奶牛进行早期妊娠诊断。方法是采取配种后 16—45d的母牛血清 (由静脉采血 )0．5ml于小烧杯 中．加入 0．2M盐酸 7．5ml，用磁力搅拌器混合 1— 2rain，再用 13％硝酸滴定至 pH0．68．滴定时间不少 于 5rain。然 后 将 此溶 液 立 即倒 入试 管 内静 置 20min，在透射光下观察反应 。呈乳白色絮状物或乳 黄色絮状物者为阳性 (妊娠)，呈乳白色或元色透明 者为阴性 (未妊娠)(王念功等，1989)。安翠华等 (1994)对配种后 16-45d的母牛用血清酸滴定法进 行早期妊娠诊断，准确率达 95．98％。何宝祥等 (1997)对人工授精后 16—45d的 68头奶牛的 89份 血清经血清酸滴定法检测，结果与直肠触诊结果核 对 ，对妊娠牛诊断的准确率为 88．88％(32／36)，非 妊娠牛为 90．57％(48／53)。马群山等(1999)对配种 后 16—45d的 381头黑白花奶牛进行早期妊娠诊断 试验．经配种 3个月后直检，妊娠和空怀的符合率 分别为 97．48％(310／318)和 84．13％(53／63)，总符 合率为 95．28％(363／381)。郑毛亮等(2007)应用血 回 维普资讯 http://www.cqvip.com 第3期 清酸滴定法对黑白花奶牛、西门塔尔和土种牛进 行早期妊娠诊断研究，其中对黑白花奶牛妊娠符 合率为 90．91％(210／231)，未孕符合率为 93．42％ (71／76)，总符合率为 91．53％(281／307)，具有诊断 时间早，方法简单，结果准确，设备廉价 ，易操作判 定，适合基层单位生产实践中应用。 5 放射免疫测定法 放射免疫测定法(RIA)是一种将同位素的放 射测量与免疫反应原理相结合的微量分析方法。 1971年 Laing等首次将 RIA用于牛乳中孕酮(P4) 的测定，并证明乳中 P4浓度所反映的发情周期阶 段与直接卵巢的评估结果相一致。Haffman等 (1976)研究表明，乳中P4浓度与血中 P4浓度平 行。祁生旺等(1994)~定结果表明，1O头怀孕奶牛 乳汁孕酮含量(平均 5．62ng／m1)与 10头发情期奶 牛乳汁孕酮含量(平均为 0．604ng／m1)二者差异显 著，因此根据乳中或血浆中P4浓度的测定结果， 可以进行早期妊娠诊断。血浆中P4的测定结果通 常在授精后 17—24d采血 lml／(头·次1，离心后加人 防腐剂，冷冻保存 24h后进行测定，奶牛血浆中 P4≥Ing，ml判为妊娠。乳样中 P4测定通常在授精 后 21-46d采取下午乳汁作检样。加入防腐剂后于 4cC保存备用。测定时可用全乳或脱脂乳。由于乳汁 中P4含量比血液中高。采样又比较方便 ，所以实 际工作中常采用测定乳汁中 P4含量 ，以判定是否 妊娠。RIA法诊断奶牛早期妊娠研究报道较多。蒋 寿等(1987)测定了 193头奶牛输精后2l、24、28及 58d的奶桶混合乳 P4含量．以6ng／ml作为诊断妊 娠的标准，结果输精后 21、24及 28d采样监测 3 次。诊断为妊娠的准确率为 90％(53／59)，未孕准确 率为 95％(57／60)。史远刚等(1996)将奶牛配种后 22—24d，乳汁 P4含量高于7．19ng／ml判为妊娠，低 于 4．72ng／ml判为未孕。介于两者之间判为可疑 ，据 此标准妊娠确诊率为 92．3％。未孕的确诊率为 100％。郑明国等(1998)采用 RIA法对 124头奶牛 配种后 22—24d采集奶样测定P4，60d左右做直肠 检查比较符合情况，妊娠符合率为 86％(43／50)，未 妊娠符合率为 87．7％(57／64)。RIA法诊断奶牛早 期妊娠精确度和灵敏度高，早孕诊断迅速，但因设 备昂贵，技术要求高，操作费时且存在放射性危害 等，从而限制了该技术的普及。段恩奎等(1987)先 回 后采用将定量的乳汁加到普通滤纸上。自然干燥后 测量 P4浓度和用蘸有末乳的自然干燥滤纸编号 后装入信封 ，寄往实验室测定 P4浓度，以通讯或 电话向生产单位报告结果获得成功。经对 334头次 奶牛现场早孕诊断 ，妊娠准确率 78．03％(1o3， 132)，未孕准确率 84．15％(170／202)，配种后 30d 左右生产单位即可得到诊断结果，具有实用、简便 和易于推广的特点。蔡志强等(2001)利用孕酮单 克隆抗体，建立 P4包被固相放免疫分析法(Se—RI． A)，对 20头配种奶牛进行早期妊娠诊断。妊娠诊 断准确率达 89．47％，未孕诊断准确率达 100％。Se— RIA法测量快速、简便，重复性稳定性好，测量结果 准确，放射性废物容易处理，成本低，具有广阔的应 用前景。国际原子能机构(IAFA)正在向发展中国 家推广Se—RIA法早期妊娠诊断技术。 6 酶免疫测定法 酶免疫测定法(EIA)是由 Dray等(1975)建立 的一种妊娠诊断方法。研究和应用最多的是乳汁 P4的测定。用酶标记孕酮，根据肉眼观察酶作用于 底物产生颜色反应的深浅进行定性试验．也可通过 分光光度计或酶标读数器读取底物液的光密度值 。 然后计算 P4浓度进行定量诊断。曾宪垠等(1996) 应用 双抗 EIA测定了 14头奶牛发情周期 中奶牛 孕酮浓度变化，配种后 1—5d奶中孕酮含量较低， 配种后 6—10d，奶 中孕酮含量逐渐上升 ．配种后 11d，奶孕酮含量迅速上升，并维持到 19d．配种后 20d，未孕奶牛孕酮开始下降。并在 21d陡降到最低 水平，配种后 21—24d，孕牛奶孕酮含量极显著高于 非孕牛 ，表明双抗 EIA可用于奶牛早孕诊断。EIA 有多种方法 ，且在不断改进 中，主要 以酶联免疫吸 附测定法(ELISA)常见。石放雄等(1987)用建立的 固相微滴板酶免疫分析法测定 101头奶牛．配种后 第 20—22d，乳汁孕酮含量皆大于 3n 者为妊娠， 连续 2次小于 3ng／ml者为空怀。间或有 1次小于 3n rnl者为可疑，诊断为妊娠和空怀的准确率分别 为 92％和 97％，可疑率为4％。龚振明等(1996)建 立了用于乳牛早期妊娠诊断的二级竞争酶联反应 孕酮临界点判别分析法，选择 0．5n ml和 1．On IIll 作为妊娠诊断的临界点。对 520头次配种后 21d的 乳牛进行测试，阴性正确率为 9O％(206／229)．阳性 正确率为 79％(230／291)。郭大智(1996)建立了现 维普资讯 http://www.cqvip.com 叁垒垒垒苎兰塑 场乳汁孕酮诊断乳牛早孕的简易方法，根据样品 管与标准管颜色差异判断怀孕与未孕 ，检查 110 头(次)乳牛，未孕牛诊断准确率为95％(38／40)，孕 牛为 83％(58／70)。杨国林等 (1998)建立了目视 ELISA测定孕酮的方法，对人工授精后 19—23d的 奶牛 ，挤末乳 3ml测定 ，共检测乳样 126份 ，已孕 判定准确率为 79．22％(61／77)，未孕判定准确率为 95．45％(42／44)。操作简便 ，适合生产单位临床应 用。郭大智(2001)用建立并经改进的检测乳 汁孕 酮诊断奶牛早孕和发情 的酶免疫分析法 ，测定 1 12 份奶样 。经直肠检查和产犊情况核对 ．未孕的诊断 准确率为 100％(48／48)，已孕的准确率为 95．3％ (61／64)。有准、早、易、安全等优点。为了使 EIA法 在生产中得到广泛应用。减少诊断时配制试剂的麻 烦，缩短诊断时间．上世纪80年代国外开始研制孕 酮酶标试剂盒取得成功。国内杨利国等(1988)、石 放雄等(1990)、上海农学院等单位也分别研制出 了孕酮酶免疫测试盒并进行奶牛早孕妊娠诊断 ． 取得良好效果。郭大智(2002)研制出了现场快速 诊断奶 牛早孕与发情的酶免疫分析测试试剂盒 ， 对孕牛和未孕牛诊断的准确率都在 95％以上。 7 胶体金双抗夹心法 北京万华生物工程有限公司在对孕酮免疫原 合成和单克隆抗体制备研究过程中，获得了针对孕 酮小分子半抗原决定簇的单克隆抗体．实现了对奶 牛乳汁中孕酮激素含量的高灵敏度检测。在此基 础上，采用胶体金双抗夹心法 ，将两个特异性单克 隆抗体结合到孕酮分子上的两个不同位点．再借 助胶体金显色效果，依据颜色的深浅来判断全乳 中孕酮的含量。万积成等(2oo7)应用层析式双抗体 夹心法原理研制的奶牛早孕诊断试纸 ．在北京 10 家奶牛场进行检测试验 ，对 1559头奶牛配种后 22—26d乳汁中孕酮含量进行临床符合验证．结果 孕牛阳性临床符合率为 96．8％(1274／1316)，复测 后阳性总符合率达 98．5％(1296／1316)；阴性临床 符合率为 97．1％(236~43)，复测后阴性总符合率 为97．9％(238／243)。该试纸条灵敏度高，最低检出 量达5—8ng／ml，操作简便，5分钟即可判定结果；试 纸常温保存 ，运输方便，价格低廉，能够快速、准确 地进行奶牛早期妊娠诊断。 8 乳胶凝集抑制试验 乳胶凝集抑制试验 (IAIT)是一种免疫测定 法。动物精卵结合成合子后，发育成为胚胎和胎 盘，胚泡的绒毛膜滋养层细胞和胎盘子叶都能分 泌类绒毛膜促性腺激素 (类 hCG)随乳汁或尿排 出。利用LAIT检测尿液或乳汁中 hCG存在与否， 作为早孕诊断的一种依据进行早期妊娠诊断。方 法是：在清洁玻片上滴加 1滴待检尿液．接着加 l 滴妊娠诊断抗血清，用牙签拌匀或振荡 2分钟，然 后 置显微镜下(1oox)检查 ，出现均匀一致的凝集 为阴性 ，保持乳胶状的则为阳性。凌志忠等(1992) 先后对两批黑 白花奶牛尿液检测表 明。妊娠准确 率分别为 87％(46／53)和 84％(48／57)，空怀牛检测 准确率分别为 89．5％(43／48)和 87．5％(42／48)。刘 深廷等(1994)对 184头配种后 21—26d的奶牛分 别用 RIA、EUSA和 LAIT发进行 了早孕诊断对 比 试 验 ，诊 断 总 准 确率 分 别 为 84．31％(43／51)、 85．45％(47／55)和 92．31％(72／78)。LAIT法 比 RIA 法早孕诊断的灵敏性高 ，操作简单 ．容易掌握 ，工 作效率高，且可现场进行，是基层单位值得大力推 广 的奶牛早孕诊断方法 。但栾 晓峰等 (1998)用 hCG试纸对奶牛检测妊娠组(怀孕 4—8个月 )和早 孕组母牛都呈阴性 ．表明 hCG试纸不能检出妊娠 初 、中、末期奶牛尿中的 hCG样物质 ．因而对牛怀 孕期间是否产生类 hCG物质持怀疑态度 。 9 早孕因子诊断法 家畜妊娠时，垂体释放催乳素而作用于黄体。 产生一种特殊的糖蛋 白即早孕因子 (英文全称 ． EPF)。Moran等(1994)首先从配后 4—6h小 鼠的血 液中发现 EPF，此后相继在绵羊 、猪、牛、孕妇血清 中发现了 EPF。EPF是一种新的妊娠特殊蛋白，是 妊娠早期血清 中最早 出现的一种免疫抑制因子 ． 它通过抑制母体的细胞免疫而使胎儿得以在母体 内存活，免受免疫排斥，因此 EPF被认为是与早期 妊娠相关 的物质 。EPF可用玫瑰花环抑制试验测 定。牛在空怀时玫瑰花环抑制滴度(RIT)的范围为 6—10，妊娠时范围为2—18；绵羊的上述指标依次为 8—10和 12—26；猪依次为7．12~0．84和 17．5~1．4。依 据其 RIT的高低就能在配种后数小时至数天内对 牛、羊、猪作出超早期妊娠诊断或受精检查。由于 EPF在授精后数小时内出现．而且在胎儿死亡或排 出后很短时期内消失，所以测定EPF除作为早期 回 维普资讯 http://www.cqvip.com I|lI|Il第3期 妊娠诊断外，还可作为妊娠后期胎儿存活的指示 物。李雅茹等(1988)应用玫瑰花环抑制试验对 66 头奶牛试验表明。妊娠和未妊娠总检出率为 87．9％ (58166)。通过玫瑰花环抑制试验测定 EPF分析法 灵敏且不要很多仪器，但费时较长，不适合大批样 本检测。因此尚不能作为常规的妊娠检查方法在实 践中广泛应用。Walter(1994)研究出奶牛 EPF的 ELISA测定法 ．对授精后 24h的奶牛进行妊娠诊 断。准确率为 87．5％，但对未孕牛的误差较大。向际 尧等(1995)从孕牛血中提取了分子量为 44Kda的 EPF。并具有较高活性。开展 EPF的研究对家畜繁 殖具有较大理论意义和实践价值。可以通过制备单 克隆抗体药盒将玫瑰花环抑制试验发展成放射免 疫分析法或放射受体分析法测定 EPF，研究出一种 简便、准确、灵敏、快速的免疫试验方法，加快在家 畜繁殖领域进行是否已受孕的超早期诊断(王建辰 等，1998)。 10 碱性磷酸酶活力测定法 碱性磷酸酶(AKP)是一组酶类，广泛分布于动 物及人体组织中，尤其在小肠粘膜、胎盘、肾、骨、肝 等组织器官中含量丰富。许多资料报道，受精卵分 裂到桑椹胚的过程中。大而分裂慢的细胞中就含有 碱性磷酸酶 ，胎盘亦可产生具有特异性 的酶 ，为耐 热性碱性磷酸酶，并随妊娠进展而增多。在孕妇及 妊娠家畜，血液中碱性磷酸酶活力都比较高。近年 来医学上已采用测定血清中碱性磷酸酶活力，作为 骨病和妊娠检测的指标。伍先淑等(1993)对对照组 34头奶牛于发情配种前采血 1次 ，采用甘油磷酸 法．以 721型光电分光光度计测定血清中AKP，试 验组 36头奶牛配种后连续3个月每月定时采血测 定 AKP。结果试验组与对照组血清中AKP活力相 比。从妊娠第 1个月开始，血清中AKP活力平均值 增高。但差异不显著，到妊娠第 2个月，血清中 AKP活力显著增高。且逐月递增。妊娠 2、3个月奶 牛与对照组的血清AKP活力平均值之间差异极显 著。因此，检测奶牛血清 AKP活力的变化，有可能 作为早期妊娠诊断的一种方法。这种方法操作简 便，设备也不复杂，数小时之内可得出结果，在基层 场站均能推广应用。 1 1 宫颈一 阴道粘液电导率测定 、 Aizinbudas和 Dovutis(1962)首次报道用电极 囵 插入阴道腔测定母牛阴道电阻值以来．许多学者探 讨了宫颈及阴道粘液(或粘膜)电阻或电导率在发 情鉴定和早妊诊断上的可行性。殷国荣等(1992)测 定了94头母牛宫颈一阴道粘液的电导率 f英文全 称，CVMEC)。结果表明，母牛在发情周期和妊娠早 期 CVMEC呈规律性变化。发情周期正常的母牛， CVMEC在问情期处于较低水平(5．64mS／era)，前情 期开始上升 (8．93mS／cm)．发情期达峰值(13．40mS／ cm)，后情期开始下降(9．84mS／cm)，最后降至间情期 水平。输精后，未妊与妊娠母牛 CVMEC的变化规律 不同。在发情周期的各时期，未妊母牛高于妊娠母 牛；未妊母牛在输精后 21天左右返情，CVMEC再 度出现峰值；妊娠早期母牛则保持与间情期相近的 较低水平(5．08mS／cm)。认为母牛 CVMEC的规律性 变化的生理学基础是体内激素水平和宫颈一阴道粘 液的周期性变化．据此进行发情鉴定和早期妊娠诊 断是可行的。与目前使用的方法相比。CvMEC法更 具有实用价值。并研制成功MFR一1型和 CVMEC— A型母牛发情鉴定及早期妊娠诊断仪，该仪器由主 机和探测电极组成，使用时将主机跨于胸前 。电极 插入母牛阴道穹隆部的粘液中，读取电导率值，即 可判定结果。经对人工授精后 18—24d的 159头奶 牛测定表明，妊娠牛和未妊娠牛的平均 CVMEC分 别为 4．65~1．62和 10．90~2．26ms／cm。差异极显著。 CVMEC在 8．0ms／cm以下 和 10．0ms／em以上时 。判 定妊娠和未妊娠符合率为 92．4％和97．3％。输精后 18—24d总计诊断妊娠准确率为 87．83％(101／115)， 未妊娠准确率为 93．94％(31／33)。可在现场测定 ， 2—3分钟得出结果 ，不错过情期 ：非专业人员也可 掌握，具有使用价值。 综上所述．就目前现有的奶牛早孕妊娠诊断方 法来分析，有些方法由于受各种因素的限制(如仪 器、药品等)还不能有效地在生产实践中推广应用， 而有些方法则还处于研究阶段，有待进一步验证其 可靠性和准确率。早期妊娠诊断技术正向着快速、 准确和生产现场易于操作的方向发展。随着诊断方 法的日益改进和提高以及新方法的建立，必将产生 出理想、高效的早期妊娠诊断方法。推动养牛业的 迅速发展。 参考文献(略) 维普资讯 http://www.cqvip.com