献血45d后献血者部分生化和免疫指标变化的研究--徐风瑞发布

�论 � 著� 献血 45d后献血者部分生化和免疫指标变化的研究 汪德清 1� 田亚平 1, 2 � 高艳红 2� 宋乙运 3� 董振南 2 � 庄远 1� 刘景汉 1� 张晓文 3 � 李慧峰 3 ( 1� 解放军总医院 � 输血科,北京 100853; 2� 解放军总医院 � 生化科; 3� 66397部队卫生队 ) � � 摘要: 目的 � 分析无偿献血者献血后部分生化免疫参数的变化及其对机体功能恢复能力的影响。方法 � 选 择生活、工作环境相同, 饮食种类和运动量基本一致的献血者 250名 ,年龄 18 26岁,按血液采集步骤采集 外周静脉血, 分别测定其总蛋白、白蛋白、总淋巴细胞 ( CD3)、T辅助细胞 ( CD4)和 T抑制细胞 ( CD8)浓度 (数 ), 45d后再次采集血液测定相同参数并进行比较。结果 � 与献血前比较, 所测定的献血后外周血中的生化指标变 化无统计学意义 (P > 0. 05); 血液中总蛋白和白蛋白浓度均在正常范围内, 与献血前比较其浓度明显增加 (P < 0. 05); 四色流式细胞仪检测显示,献血后 CD3、CD4和 CD8均显著增高 (P < 0. 01), CD4 /CD8比值变化无统计 学意义 (P > 0. 05);此外,还显示献 400m l者的总蛋白、白蛋白和总淋巴细胞数有高于献 200m l者的趋势。结论 � 献血能启动献血者机体应激反应系统,蛋白合成增加, T细胞亚群比例升高, 使机体进入新的平衡状态。 � � 关键词: 献血者;生化指标; 免疫指标; 免疫功能;流式细胞术; 无偿献血 � � 中图分类号: R392 R446. 11� � 文献码 : A � � 文章编号: 1004- 549X ( 2008) 02- 0107- 03 Changes of some b iochem ical and immunem arkers of b lood donors 45 days after b lood donationWANGD eqing1, TIAN Yap ing1, 2, GAO Yanhong2, et al. 1. D epar tm ent of Blood T ransfusion, Chinese PLA G eneral H osp ital, Beijing 100853, Ch ina; 2. D epar tm ent of C linical B iochem istry, Chinese PLA GeneralH osp ital � � Abstract: Objective To study the changes o f som e b iochem ica l and immunem arkers o f blood dono rs a fter b lood do� nation, and to study the in fluence of blood dona tion on the body se lf- recove ry function o f b lood donors. MethodsA tota l o f 250 blood donors, aged from 18 to 26 years, w ith sim ilar res idency, wo rk env ironm ent, diet, and exerc ise intensity, w ere se lec ted. Venous b lood w as co llected through standard process. P lasm a total prote in, album in, GPT, GOT, TB, DB, UN, Cr, CK, LDH, CH and TG levels we re dete rm ined. A ll the above m a rkers w ere tested aga in 45 days a fter b lood dona tion. Resu lts Compared to the pre- donation leve ls, the tota l pro tein, ALB, CD3, CD4 and CD8 levels in� c reased sign ificantly 45 days after donation (P < 0. 001), w hile CD4 /CD8 rate show ed no significant change. Donors o f 400m l b lood had h igherTP, ALB, CD4, and CD3 leve ls than those of 200m l donors. Conc lu sion Blood donation cou ld enforce protein synthesis, inc rease the T ce ll subpopulation, and im prove the body functional status. � � K eyW ords: B lood donation; Immune function; F low cytome try � � 普及无偿献血,保证血液安全是长期的任务与 国策。自 1998年 !中华人民共和国献血法 ∀颁布 以来,我国无偿献血事业取得了明显成绩,据统计, 截至 2006年年底,全国无偿献血占临床用血比例 已 > 95%, 有 1 /3的地市级城市临床用血全部来 自愿无偿献血 [ 1] ; 然而 #血慌 ∃事件仍时有发生, 其 中献血对机体健康状况影响的担忧可能是最主要 的原因之一。过去,人们关注的是多次献血后血液 质量的变化,像国外学者发现多次献血浆的献血者 血红蛋白、血清蛋白和免疫球蛋白处于低水平状 态, CD8和 NK细胞活性也有所降低 [ 2] ; 更早的研 究还明献血可降低 NK细胞的活性, 有人观察到 献血 2U后的 d2和 d5,献血者的 NK活性与献血前 比较分别降低 88% 和 74% [ 3, 4]。国内学者的研究 则提示,长期献血后, 献血者细胞免疫功能, 如淋巴 细胞转化率、白细胞介素 - 2以及 NK细胞活性无 明显变化, 对血液质量无影响 [ 5 ]。然而尽管人们已 经认识到无偿献血对健康无损害,但机体在献血后 如何恢复原来的健康状态,以及机体达到再次内在 平衡的科学研究数据却鲜见报道; 在现实中, 献血 者更关注献血后对自身健康有无不良影响, 因此, 研究无偿献血后机体健康参数的变化规律, 对招募 献血者以及无偿献血者本身均具有重要意义。我 们比较分析了无偿献血者献血前后部分相关生化 参数及 T淋巴细胞亚群的变化, 报道如下。 1� 材料与方法 1. 1观察对象与分组 � 2007年 5 7月选取在同一 环境下生活、工作, 且饮食种类和运动量相同的某 部队官兵人群, 根据 !献血法 ∀要求对其作教育动 员、体检,体检合格者采集外周静脉血作初筛,初筛 合格者 (均为男性 )根据本人自愿一次性采集外周 �107�中国输血杂志 2008年 2月第 21卷第 2期 Ch in J B lood Tran sfu sion, Febu rary, 2008, Vo.l 21, N o. 2 静脉血 200或 400m l。根据献血量分组:献 200 m l 组 180人, 年龄 ( 19. 65 % 1. 95)岁;献 400m l组 70 人, 年龄 ( 20. 39 % 2. 0)岁。所有献血者献血时留 取样本 ( 4m l)测定部分生化指标和免疫功能指标, 并在 45d后再次采集外周静脉血测定相应指标。 1. 2 生化项目测定 � 取献血者静脉血 2m l/人 (份 ), 3 000 r/m in 10m in,分离血浆,立即测定总蛋 白 ( TP)、白蛋白 ( ALB )、谷丙转氨酶 ( GPT )、谷草 转氨酶 ( GOT)、总胆红素 ( TB)、直接胆红素 ( DB )、 肌酐 ( C r)、尿素氮 (UN )、肌酸激酶 ( CK )、乳酸脱氢 酶 ( LDH )、总胆固醇 ( CH )、甘油三脂 ( TG )。试剂 全部为美国罗氏公司产品; 仪器为日立的 7600 - DDP型全自动生化分析仪。 1. 3 免疫指标测定 � 取献血者静脉血 2m l/人 (份 ), 枸橼酸钠抗凝, 采用 FACSCa libur流式细胞 仪及试剂盒 (美国 BD公司 ) ,在 6h内检测 T细胞 亚群 [ 1]。 1. 4统计学处理 � 全部数据以 ( �x % s) 表示,献血前 后变化比较采用自身对照配对 t检验,两样本均数 间比较采用 t检验, P < 0. 05具有统计学意义。 2� 结果 2. 1献血对献血者肝功能及其它生化指标的影响 � 无论是献 400m l还是献 200m l者, 其外周血中与 肝功能 (表 1)、肾功能及血脂代谢等生化参数 (表 2)献血前与献血 45d后比较,差异均无统计学意义 (P > 0. 05)。 表 1� 献血对肝功能相关参数的影响 ( �x % s) 组别 n GPT (U /L ) GOT (U /L) TB ( �mo l/L ) DB( �m ol /L) 献血前 200m l 180 14. 43 % 5. 05 19. 39 % 6. 50 13. 21 % 6. 90 4. 08 % 2. 22 400m l 70 13. 71 % 6. 18 18. 11 % 5. 30 14. 48 % 6. 57 4. 33 % 1. 73 献血 45d后 200m l 180 13. 93 %4. 90 20. 25 %4. 80 13. 62 %6. 10 4. 41 %1. 60 400m l 70 14. 02 % 6. 20 16. 52 % 4. 50 13. 36 % 7. 87 4. 48 % 1. 88 表 2� 献血对肾功能、血脂代谢等相关生化参数的影响 ( �x % s) 组别 n Cr( �mol /L) UN(mmo l/L ) CH (mmol /L) TG(mmo l/L ) CK (U /L ) LDH (U /L) 献血前 200m l 180 59. 93 % 8. 59 5. 17 % 1. 12 2. 79 % 0. 51 1. 04 % 0. 55 220. 74 % 153. 24 249. 53 % 108. 01 400m l 70 59. 15 % 7. 88 4. 93 % 1. 18 2. 70 % 0. 47 1. 03 % 0. 61 205. 43 % 112. 57 225. 87 % 99. 10 献血 45d后 200m l 180 58. 01 % 11. 35 5. 05 % 1. 15 2. 83 % 0. 57 1. 02 % 0. 83 272. 67 % 281. 33 246. 87 % 57. 89400m l 70 58. 75 % 8. 66 4. 97 % 1. 30 2. 81 % 0. 59 1. 13 % 0. 83 237. 63 % 158. 74 214. 22 % 42. 61 2. 2献血对献血者蛋白代谢的影响 � 见表 3。献 血 45d后献血者外周静脉血中的 ALB和 TP较献 血前增加明显,相对其它蛋白而言 ALB增加幅度 更大; 进一步观察可见献 400m l者的 ALB和 TP升 高程度略优于献 200m l者。 表 3 � 献血前后外周静脉血中蛋白浓度的变化 � � ( �x % s) 组别 n TP( g/L) ALB ( g /L) TP /ALB 献血前 200m l180 66. 63 % 6. 72 42. 29 % 3. 88 1. 58 % 0. 06 400m l 70 65. 53 % 6. 11 41. 76 % 4. 07 1. 57 % 0. 05 献血 45d后 200m l180 76. 60 % 6. 42 * 49. 62 % 3. 15* 1. 54 % 0. 09 400m l 70 77. 67 % 3. 61* 50. 34 % 1. 81* 1. 54 % 0. 05 * 与献血前比较, t= - 10. 24、- 13. 92、- 12. 91、- 14. 54, P < 0. 01 2. 3献血对献血者免疫学指标的影响 � 除 CD4 / CD8比值外,其它指标增加较显著 (表 4)。 表 4 � 献血对 T细胞亚群的影响 ( �x % s) 组别 n CD3 (% ) CD4 (% ) CD8(% ) CD4 /CD8 献血前 200m l 180 65. 26 % 7. 35 35. 14 % 5. 6 26. 40 % 5. 4 1. 41 % 0. 47 400m l 70 64. 91 % 7. 19 34. 07 % 6. 39 26. 56 % 6. 11 1. 36 % 0. 44 献血 45d后 200m l 180 70. 63 %8. 09* 37. 17 %6. 75* 28. 77 %7. 69* 1. 39 %0. 5 400m l 70 71. 50 % 8. 49* 36. 27 % 6. 64* 29. 00 % 6. 19* 1. 32 % 0. 40 * 与献血前比较, t值依次为 - 4. 33、- 2. 95、- 2. 42、- 8. 42、 - 2. 78、2. 10, P < 0. 01 3� 讨论 � � 人类经过数万年的进化历程,建立了非常精细 完善的反馈、应急、代偿通路,这些通路使人们在遇 到外界刺激或伤害时能快速自我修复,当外界条件 打破机体内环境的某种平衡时机体就会尽快建立 起新的平衡。本组资料显示,献血一定时间后献血 者机体内蛋白合成增加,体现为血液中 TP和 ALB 大幅提升 (P < 0. 01) (表 3) ; 虽然 CD4 /CD8比值 没有统计学意义的变化,但外周血中 T淋巴细胞亚 群 CD3、CD4、CD8比例均比献血前有显著提高 (P < 0. 01) (表 4)。这种过程我们可以用 #平衡 失平衡 再平衡∃描述。 机体在正常情况下,由于神经和体液因素的调 节,血量能保持相对稳定, 各项生理生化合免疫指 标均正常, 此时为 #平衡 ∃状态;一次性献血 200 400m l无疑对机体是一种刺激,机体的第 1反应就 是应激反应,如出现心率加快、出汗、血管收缩等, 血容量、血红蛋白、白细胞、淋巴细胞、血小板等均 降低, 其程度与献血量呈正比,此时为 #失平衡 ∃状 态;神经体液调节体系发挥作用,水分和营养物质 补给, 机体渐渐恢复, 血容量、细胞成分的质和量渐 �108� 中国输血杂志 2008年 2月第 21卷第 2期 Ch in J B lood T ransfus ion, Feburary, 2008, Vo.l 21, No. 2 渐恢复,机体进入一种 #再平衡 ∃状态。已有研究 提示献血是对机体的一种刺激, 机体进入 #再平 衡 ∃状态根据不同物质所需时间不同, 通常血容量 在饮用足够的水的情况下经 1 2h即可恢复,白细 胞和血小板本身在体内生存期较短, 更新换代快, 采血后在几天内即可恢复到原有水平,献 200m l血 时红细胞及血红蛋白需要 7 10d恢复至采血前水 平,男性较女性恢复为快 [ 5, 6 ] ; NK细胞在 12d即可 恢复至采前水平 [ 3]。 CD3是机体免疫系统内功能最重要的一群细 胞,主要分 2个亚群, 其数量在一定意义上反映了 机体的免疫状态 [ 7] ; 正常情况下亚群之间相互协 调、平衡,使机体处于免疫稳定状态, 以抵抗外界病 原体入侵。 CD4与 CD8细胞作用相反, 通常情况 下两者相互影响、制约处于平衡状态, 两者比例失 调则导致免疫的功能紊乱 [ 8]。在外周血中, CD4具 有辅助 T淋巴细胞转变为效应细胞, 使细胞免疫功 能突变及诱导 B淋巴细胞数目增加和活性增强, 产生自身抗体的功能, CD4细胞数量减少诱导 B 淋巴细胞数量增加的能力下降, 则 B细胞数量减 少,所以当 CD4功能低下时, 机体易被感染 [ 9, 10] ; 本研究结果表明, 献血前后 CD4的变化非常明显 (表 4)。CD8既有抑制 T淋巴细胞活性的作用,还 可抑制 B淋巴细胞产生抗体和产生毒性作用; 现普 遍认为 CD8是免疫调控的关键, 在维持机体免疫 稳定方面起重要作用, CD8细胞异常是许多自身免 疫性疾病发病的关键因素之一, 当 CD8功能低下 时,则机体可能发生过强的免疫应答反应, 而导致 某些免疫性疾病,如自身免疫性疾病等 [ 10] ;而献血 者献血 45d后 CD8较献血前有显著提升 ( P < 0. 01) (表 4)。CD4 /CD8比值反映的是人体免疫系 统内环境:当比值明显减低,提示机体的免疫功能 减退,较易发生感染并导致病情加重和发展。献血 45d后献血者 T淋巴细胞亚群整体升高, CD4 /CD8 的比值较献血前略有降低, 却又无统计学意义 (P > 0. 05) ,这至少说明献血对机体免疫功能无显著 影响。另外,由于观察对象是献血者, 每个人的机 体状况差异,包括感冒、用药等因素均有可能影响 免疫功能, 所以这种改变是否可为献血后机体 #再 平衡∃的一种特殊现象还有待进一步研究证明。 总之, 我们认为献血与机体健康恢复模式是一 种 #平衡 失平衡 再平衡 ∃过程, 对此深入 研究将有助我们更好地认识挽救生命和保障健康 的关系,从而进一步推动无偿献血事业健康、科学 地发展。 参 考 文 献 [ 1] � 王君平, 施娟. 无偿献血已占临床用血 95% [ N ] . 人民日 报, 2007- 06- 15 ( 11 ) [ 2] � Lew is SL, Ku tvirt SG, Bonner PN, et a.l Plasma p roteins and lym phocyte phenotypes in long- term p lasm a donors[ J] . 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