番茄红素对前列腺癌细胞PC-3增殖的影响

778 陕西医学杂志 2009年 7月第 38卷第 7期 番茄红素对前列腺癌细胞 PC一3增殖的影响 延安大学医学院 (延安 716000) 米志宽 摘 要 目的：观察番茄红素对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC一3的的存活 率、细胞周期及凋亡的影响。方法：采用 MTT法观察番茄红素对癌细胞增殖的影响；流式细胞仪 观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化。结果：番茄红素抑制PC一3细胞的 增殖 ，1、2、4、8／~mol／L最大抑制率分别为 26．4 、40．7％、50．9 9，6、60．7 ，且诱 导其凋亡，最大 凋亡率达 39．5 ，并改变细胞周期分布。上述作用呈剂量效应关系。结论：番茄红素可诱导PC一 3细胞凋亡、改变细胞周期分布 ，从 而达到抑制肿瘤细胞增殖。 主题词 前列腺肿瘤／免疫学 @PC一3细胞 类胡萝 卜素类／药物作用 细胞凋亡 Effect of lycopene on proliferation of prostate cancer PC一3 cell College of Medcine。Yan’an University(Yan’an 716000) Mi Zhikuang ABSTRACT Objective：to explore the effects of lycopene on proliferation and apoptosis of huaman prostate cancer cell line PC一3．Methods：the proliferation of PC一3 cells were analyzed by MTT；the cell cycle and apoptosis of synchronized cells were observed through flow cytometry．Results：the lycopene could inhibited the growth of PC一3 cell，Inhibition rate of 1、2、4、88mol／1 was 26．4 、40．7 、50．9 、60．7％ ，and it could change the cell cycle distribution and induce the apoptosis．Apoptosis was 39．5 ．Lycopene increased the proportion of G0／C1 phase，and descended the proportion of S and G2／M phase．Conclusion：the inhibition of cell、 cycle progression signaling and induction apoptosis participate in the anti—-proliferative activity of lycopene in PC—- 3 cells． KEY W oRDS Prostatic neoplasms／immunology @PC一3 cell Carotenoids／drug effects Apoptosis 大量流行病学资料显示 ，长期摄入富蔬菜、水果膳 食与多种癌症危险性的降低有关，尤其是食物中含有 的与慢性病危险因素下降相关的植物化学物[1]，故通 过膳食中营养成分预防和降低癌症的发生受到越来越 多的关注 ，如番茄红素。番茄红素是类胡萝 卜素的一 种，是膳食中的天然成分，研究明其具有抗肿瘤活 性 ，能抑制多种肿瘤细胞生长[2 ]。本实验选用雄激素 非依赖性前列腺癌细胞株 PC一3为研究对象，观察番茄 红素对其生长增殖的影响，并初步探讨其作用机制。 材料与方法 1 材料的选择 番茄红素和噻唑蓝(MTT) (sigma)，四氢呋喃(THF)，RPMI一1640培养基、新生 小牛血清和胰酶(成都哈利公司)。细胞：PC一3细胞购 于四川大学华西移植与免疫实验室。 2 方 法 2．1 细胞培养及处理：PC一3细胞用 1640培养基 培养 ，含 10 小牛血 清 ，青 霉素 (100 U／m1)，链 霉素 (O．1 mg／m1)。放置 37℃、5％CO 培养箱 中培养 。番茄 红素纯品溶解于四氢呋喃(THF)中，配成 2mmol／L储 备液储存于一70℃备用，I临用前用培养基稀释至所需 浓度。所有操作均在暗光下进行 。 2．2 MTT法 ：取对数生长期的 PC一3细胞 ，以 5 ×10 ／ml的密度接种于 96孔板中，每孔 200~1。次 日细 胞贴壁后，更换培养基，添加番茄红素，其终浓度为 0、 1、2、4、8t~mol／1，每个浓度设 4个复孔，每天更换培养 基以维持番茄红素的浓度。于培养 24、48、72、96h加入 MTT2Otd／~L(5mg／m1)，继续孵育 4h，吸弃培养液，加 入二甲基亚砜(DMSO)15O l／孑L，充分混匀，在酶标仪 490nm处测其吸光度(A)值，计算平均 A值和抑制率 (Inhibition rate，IR)。试验重复 3次。 抑制率===[1一(实验组 A值／对照组 A值)]× 100 。 2．3 流式细胞仪检测：将 PC一3细胞接种于75ml 培养瓶中，接种浓度为 5×10 ／ml，用含 5 小牛血清 培养基培养 48h，换为含 0．5 小牛血清培养基培养 48h，使细胞同步化，更换培养基(含 5 0A小牛血清)，所 含番茄红素的终浓度分别为 0、2、4、8／~mol／1，继续培养 24h，收集细胞，调细胞浓度为 1×10 ／ml。用 7O％酒精 固定，RNase作用，1500PI碘化丙锭作用 15min以上， 200目尼龙网过滤，于流式细胞仪上作 DNA细胞周期 陕西医学杂志 2009年 7月第 38卷第 7期 779 及凋亡。 3 统计学方法 SPSS统计软件包，用 Dunnett 法比较各剂量组与对照组的差异。 结 果 制作用 用不同浓度番茄红素处理细胞 24h后，细胞 增殖被抑制，除 24h低剂量组与对照组相比无差异性 外，其他各时点各剂量组与对照组均有差异性(P