最新人工授精技术

最 新 人 工 授 精 技 术 概 述 目录 TOC \o "1-3" \h \z \u 目录 1 最新人工授精技术概述 2 一、 猪的人工授精历史及现状 2 二、 猪的人工授精的优越性 2 三、 人工授精的基本过程 2 四、猪人工授精的用品与设备 2 采精室 3 公猪的饲养管理 4 1. 公猪圈舍设计 4 2. 公猪圈位置 4 3. 公猪的饲喂 4 4. 管理 4 公猪的调教 5 采精操作规程 5 采精注意事项 6 猪的人工授精实验室管理 7 猪的人工授精实验室精液处理规范 7 1.直观指标测定 7 2.活力测定 8 3.密度测定 8 4.畸形率测定 8 5.精液的稀释 8 6.精液的分装 8 7.精液的保存 8 8.精液的运输 9 母猪发情鉴定技术操作规程 9 1. 发情生理特征 9 2. 发情周期分期 9 3. 各阶段特征 9 4. 发情鉴定方法 9 5. 发情鉴定记录 9 输精操作规程 9 附录1：猪人工授精采精室及实验室立体图说明： 10 附录2假母台的设计要求： 10 附录3 猪精液稀释粉简介 11 最新人工授精技术概述 1、​ 猪的人工授精历史及现状 早在二十世纪三十年代猪的人工授精就已经在前苏联广泛开展，我国从二十世纪50年代到80年代未，在南方一些省份也得到了相当广泛的开展。但进入90年代后，由于瘦肉型猪的广泛饲养，使过去简易的人工授精不能适应现代养猪业配种的技术要求，由于不熟悉瘦肉型猪的繁殖规律；精液处理和输精技术不过关，使受胎率和窝产仔数受到一定的影响。不少养猪场至今仍然怀疑对猪进行人工授精的可行性。90年代末，由于引种和预防传染病（尤其是预防口蹄疫）的需要，使猪的人工授精重新在南方一些省份开展起来。在养猪发达国家的育种和商品场开展人工授精则更加广泛，如美国，猪的人工授精的普及率已经超过70％。现代大规模的养猪生产，人工授精能够给养猪带来的利益已经超过总利润的15％以上，而人工授精带来的潜在的利润，如能更有效地预防疾病，猪群品质的大幅度提高会在今后较长一段时间才能反应出来。 2、​ 猪的人工授精的优越性 越来越多的养猪场看到了人工授精带来的利益，那就是：防止通过交配传播的疾病（如母猪的各种病毒性流产性疾病）；解决了公母体重悬殊造成的配种困难；使最优秀的公猪有更多的后代；让猪场间的种猪（精液）交流更方便。由于每一份用于输精的精液都是经过检验合格的，因此，采用现代人工授精技术的猪场母猪的受胎率和窝产仔数均比本交高。但由于养猪场对现代猪人工授精的效果有一定的差异。但可以肯定，猪的人工授精在设备完善的情况下，取得良好的配种成绩并不难，从技术上也并不复杂。 3、​ 人工授精的基本过程 精液稀释配制→采精→精液品质检查→精液稀释与分装→精液保存→发情鉴定→输精 四、猪人工授精的用品与设备 名称 规格 数量 用途 采精用品 采精室 个3.5X 3米 1 采精场所 假母栏 个100X26X56－ 70厘米 1 用于采精时公猪爬跨 防护栏 根高 75厘米 7 确保公猪攻击时人员能安全撤离 壁厨 离地 120厘米 1 位于采精室与实验室之间，传递用品 红外线灯 175W 1 用于对采精杯及烧杯升温 防滑垫 块60X 60厘米 1 放置于假母猪后，防止公猪摔倒 实验室采精用品 采精杯 个250毫升左右保温杯 2 采精用 采精袋 张20X 25厘米 一次性用品，在采精杯中盛放精液 一次性过滤网 张20X 20厘米 100 放于采精杯上过滤精液中胶状物 一次性手套 盒150枚乳胶或PE 2 采精 消毒纸巾 盒 130抽 2 擦拭公猪包皮 橡皮筋 盒100个 1 用于将滤网固定于采精杯上 恒温干燥箱 台 1 用于消毒用品和预热采精杯 玻璃棒 根 2 准备采精杯时使用 实验室精液品质检查用品 显微镜 台1000倍 1 用于检查精子活力（和检查密度） 显微镜恒温板 块35－40oC 1 用于检查精子活力 载玻片 盒 1 用于检查精子活力 盖玻片 盒 1 用于检查精子活力 微量移液器 支5 / 25毫升 1 精液取样（可用1毫升注射器代替） 微量移液器 支10 / 250毫升 1 精液取样或稀释 吸咀 个250毫升 100 精液取样或稀释 血球计数板 个 1 测定精子密度 计数器 个 1 测定精子密度 擦镜纸 本 1 擦拭显微镜镜头 纸巾 盒 1 擦拭用品 实验室精液稀释与分装用品 精液稀释粉 袋 配制500或1000毫升 10 用于配制精液稀释液 量筒 个500±5毫升 2 用于量取纯水 三角瓶 个1000毫升 2 配制稀释液 大烧杯 个1000毫升 2 精液稀释 纯水或蒸馏水 桶 19升 或 25升 1 配制稀释液及冲洗用品 电子天平 台 1200克 （感量 01克 ） 1 配制稀释液、测定射精量、精液稀释 电子称 分度值 1克 ， 2000克 配制稀释液、测定射精量、精液稀释及分装 恒温水浴锅 台、双孔、指针式或数显 1 等温精液与稀释液 分装架 个 1 分装精液（带刻度） 分装管 根（一次性或多次性） 2 分装精液用 一次性注射器 个5毫升 分装精液用 热封口机 台 精液袋封口用 精液袋（输精袋） 个 分装及保存精液 恒温冰箱 台 50升 保存精液 75％乙醇 桶 2.5升 消毒分装管 输精用品 输精管 支 一次性 1200 输精用 输精管 支 多次性 5 输精用 洗瓶 个 2 清洗多次性输精器 红霉素软膏 管 1 润滑输精管 输精记录簿 本 1 记录输精及产仔情况 标签纸、标记笔 标记精液种类、时间 恒温干燥消毒柜 共用 纸巾 盒 1盒 擦拭外阴 高锰酸钾 瓶 500克 1 消毒外阴 输精用工作服 套 自制 1 便于工作和装入各种用品 疫苗箱 个 1 用于临时保存或运输精液 采精室设计 目标：创造一个适宜于分猪射精的场所，并尽可能地减少外界因素对精液造成的不良影响 1.采精场地 采精场地必须在室内，确保不受气温、日光、，风、灰尘、寸雪影响。采精场地应能防止公猪逃跑。采精室总面积约10平方米，采精区面积为2.5X2.5米2。采精室应保持整洁，采精区内不能放置除假母猪、放防滑垫以外的其它物品。 2.采精室地面 应为混凝土地面，地面应既有利于冲刷，又能防滑。、 3.墙壁与屋顶 墙壁与屋顶应洁净，不落灰、不掉墙皮。 4.假母猪 一般为木制台面，用角钢或钢管作支架，台面宽26厘米，长100厘米，高度一般为55厘米，如果可能 最好高度可以调整（55－65厘米）。假母猪台面呈圆弧形（相当于圆的1/4），在假母猪后部公猪阴茎伸出的地方。假母猪后端至后支架应有35厘米的距离，以方便公猪阴茎伸出和采精操作。如果方便，可将假母猪的后10厘米左右做成略向后下方倾斜，以使公猪爬跨更舒适。假母猪应牢固地固定在地面上。 5.防滑垫 假母猪后方地面应放一块60X60厘米的防滑垫，以使公猪采精时站立更舒适，防止滑倒。也可将假母猪后做一个方形深5厘米左右的浅槽，并填入细沙或锯末。 6.防护栏 应用10－15厘米直径、高出地面75厘米的钢管作防护栏。防护距采精室前墙70－100厘米，钢管之间的净间距为28厘米。这样可形成一个公猪不能进入，但人可以自由进出的安全区。一旦公猪进攻人，采精员能及时躲避到安全区。在防护栏的一侧可安装一个宽65厘米的栅栏门，以便将公猪关在防护栏内。 7.水龙头 、水管、清扫工具 水龙头及水槽应安装在安全区内，安全区内还应放一些用于清扫地面、刷拭公猪体表的工具及冲刷地面的水管。 8.壁厨 与精液处理实验室相通，离地高约120厘米，宽50厘米，高65厘米，厨深30厘米左右。壁厨的两侧均应安装柜门或推拉玻璃门，壁厨上吊一175W的红外线灯，距厨底约50厘米。壁厨的作用是方便采精室和实验室之间进行物品的传递。并对安装好的集精杯进行升温。 公猪的饲养管理 目标：维持公猪合适的膘情、保持体表卫生，肢蹄强壮，性欲旺盛，精液品质好，生精量大。 采用人工授精的公猪不同于本交，本交重视公猪的配种能力（配种频率），而采精的公猪则应重视每周公猪总生产的精子数。 1.​ 公猪圈舍设计 公猪可饲养在10平方米的栏（圈）内，如果有条件可饲养在有漏缝地板的圈内。公猪圈高130厘米。目前国外不少猪场开始将公猪饲养在有漏缝地板的定位栏中。推荐的定位栏规格为：长220厘米，宽75厘米，高110厘米。定位栏用钢管焊成，必须保证有足够的强度。公猪栏门应有足够的安全性，确保公猪不会将栏门弄开。这是避免公猪逃跑和之间发生争斗的最可靠方法。 2.​ 公猪圈位置 公猪圈应距空怀待配母猪舍有一定的距离，不能将公猪养在靠近有发情母猪的地方，以免发情母猪的气味对公猪产生影响，造成公猪自淫（在公猪栏内射精）的恶癖。另外，即使一起长大的公猪也要单栏饲养，不要合群。 3.​ 公猪的饲喂 喂料次数 每天饲喂两次，夏季为早上6点和晚上6点，冬季为早上7点和晚上6点 喂料量 每日喂量2.5公斤左右，即每次加料1.25公斤左右。根据膘情可作0.5公斤上下的。干粉料饲喂，不得在饲料中加水后饲喂。有条件的地方每天可加喂鸡蛋1－2枚，喂青绿饲料2－3公斤，精饲料的喂量可适当减少。这样有利于保持公猪的性欲和提高精液品质。 饲料 应以精料为主，饲料粗蛋白为16％（冬春秋），17％（夏），含有2％的动物性饲料如鱼粉，钙0.8％，总磷0.6％。 膘情控制 种公猪应保持中等膘情，饲养员应经常检查公猪的膘情，根据膘情调整喂料量。 4.​ 管理 调教 后备公猪在7－8月龄，体重100－110公斤时进行调教。 驱虫 每年两次用阿维菌素驱虫，每次驱虫分两步进行，第一次用药后7天再用一次药。同时每月用1％的兽用敌百虫进行一次猪体表及环境驱虫。 防疫 每年分别进行两次猪瘟、猪肺疫、猪丹毒、繁殖呼吸综合征、伪狂犬病等疫苗的防疫，10月底和3月份各进行一次口蹄疫防疫。4月份进行一次乙脑防疫（1－2岁）。公猪圈应设严格的防疫屏障及进行经常性的消毒工作。 修蹄 经常检查公猪的状况，必要时进行修蹄。 刷拭 尽可能每天用竹刷刷拭公猪体表，以清除体表寄生虫和保持体表洁净。 保持公猪的凉爽 高温是对公猪保持生精能力和性欲最不利因素，所以夏季应尽可能使公猪处于凉爽状态，经常喷水和通风降温。大型猪场可将公猪饲养在有空调或湿帘降温的猪舍内，以维持良好的生精能力和性欲。本资料来源于www.powerpigs.net 猪场动力网。 公猪的调教 目标：使小公猪或原来本交的公猪爬跨假母猪进行采精 用品清单：假母猪、防滑垫、采精怀、一次性手套、旧麻袋、发情母猪尿或分泌物。 小公猪在5个月龄或更小时，就开始爬跨同窝的小母猪或小公猪，同时也会爬跨高度适当的其它物体，而且这种特性没有明显的个体差异。因此，90％或更多的小公猪赶入采精室时，很快就会去爬跨假母猪。但有些小公猪可能因为胆小，第一次进入采精室时，对新环境不熟悉而不去爬跨假母猪，有些原来进行本交的种公猪可能第一次进入采精室时也不爬跨假母猪，这样就需要采精人员耐心地对公猪进行调教。 1.开始调教的年龄 小公猪从7－8月龄，体重达到100－110公斤时开始进行采精调教； 2.调教持续时间 每次调教时间不超过20分钟；如果公猪不爬跨假母猪，就应将公猪赶回圈内，第二天再进行调教。 3.基本调教方法 公猪的调教方法很多，一般情况下，即使不对假母猪作任何处理，小公猪也会爬跨。但采用以下的方法可能会使小公猪的调教成效更快。 （1） 用发情旺盛的母猪的尿液或分泌物涂在假母猪后部，公猪进入采精室后，让其先熟悉环境。公猪很快会去嗅闻、啃咬假母猪或在假母猪上蹭痒，然后就会爬跨假母猪。 （2） 如果公比较胆小，可将发情旺盛的母猪分泌物或尿液涂在旧麻袋上，使公猪嗅闻，并逐步引导其靠近和爬跨假母猪。同时可轻轻敲击假母猪以引起公猪的注意。 （3） 经过已调教成功的公猪爬跨的假母猪，待调教的小公猪嗅到其它公猪的气味时，也容易使其爬跨假母猪。 （4） 另外，用发情母猪的尿或分泌物，涂在假母猪上，同时播放事先录制的发情母猪的求偶叫声录音，也有利于激起公猪的性兴奋，从而使公猪爬跨假母猪。 4.不易调教的公猪的调教 如果以上方法都不能使公猪爬跨假母猪，先将一头二至三胎的发情旺盛的母猪赶至采精室，并在其背部驮上一条旧麻袋（麻袋不能有异味），然后将待调教的种公猪赶到采精室，当公猪爬跨发情母猪时，在公猪阴茎伸出之前，两人分别抓住其左右耳拉下，当公猪第二次爬跨发情母猪时，用同样的方法将其拉下。这时公猪的性欲已经达到高潮时，表现为呼吸急促，急躁，精神亢奋。工作人员立即从母猪身上提起麻袋，并遮挡公猪的视线，不使公看到发情母猪，迅速将发情母猪赶走。然后将麻袋驮在假母猪上，诱导公猪爬跨假母猪，一般都能调教成功；有时，有过一至二次本交经验的小公猪，由于有较强的交配欲，更易调教其爬跨假母猪；也可将待调教的公猪关在采精室安全区外，并使其观看调教好的公猪的采精，然后诱导其爬跨假母猪。最难调教的公猪可使其爬跨发情母猪进行采精一次。 5.调教时的采精 当公猪爬跨上假母猪后，采精人员应立即从公猪左后部接近，并按摩其包皮，排出包皮液，当公猪阴茎伸出时，应立即用右手握成空拳，使阴茎进入空拳中，立即将阴茎的龟头锁定不让其转动，并将其牵出，开始采精。具体采精操作参看第五节采精操作规程。 6. 注意事项 将待调教的公猪赶至采精室后，采精员必须始终在场。因为一旦公猪爬上假母猪时，采精人员不在现场，不能立即进行采精，这对公猪的调教非常不利。调教公猪要有耐心，不准打骂公猪；记住，如果在调教中使公猪感到不适，这头公猪调教成功的希望就会很小。一旦采精获得成功，分别在第2、3天各采精1次，以利公猪巩固记忆。 采精操作规程 目标：尽可能采集到全部的浓份精液，并保证精液洁净、无胶状物、不受任何污染及物理因素影响 用品：假母猪、采精室（栏）、防护栏、水管、赶猪板、保温箱、采精怀、食品袋、过滤网、一次性手套、纸巾、橡皮筋、恒温箱、玻璃棒等 1. 稀释液、精液品质检查用品准备 采精前应配制好精液稀释液：将稀释粉放入三角瓶中，量取稀释粉说明书上要求的蒸馏水，彻底溶解后，将稀释液放在33－35oC水浴锅中预温。同时打开显微镜的恒温台，使控制器设置温度调至37oC，并在载物台上放置两张洁净的载玻片和盖玻片，然后准备采精用品；没有恒温台的实验室，可将两块厚玻璃和两张洁净的载玻片和盖玻片放于恒温消毒柜中，将消毒柜控制器调整至38oC； 2. 采精怀安装及其它采精用品准备 在配制稀释液前，将洗净干燥的保温怀打开盖子，放在37oC的干燥箱中，也可放在红外线灯下45cm处约5分钟。取出，将两层集精袋装入保温怀内，并用洁净玻璃棒使其贴靠在保单杯壁上，袋口翻向保温杯外，上盖一层专用一次性过滤网，用橡皮筋固定，并使过滤网中部下陷3－4cm，以避免公猪射精过快或精液过滤慢时，精液外溢。最后用一张纸巾盖在网上，再轻轻将保温杯盖盖上。取两张纸巾装入工作服口袋中；采精员一手（右手）带双层无毒的聚乙烯塑料手套，或外层为聚乙烯手套，内层为无毒的乳胶手套（比塑料手套防滑），将集精杯放在壁厨内； 3. 检查采精室 检查各种设备是否牢固可靠，用品齐全； 4. 公钎的准备 采精员将待采精的分猪赶至采精栏，如果时间允许，可用01％的高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮（可用喷水瓶喷消毒液），再用温水（夏天用自来水）清洗干净并擦干，避免水及药物残留对精子造成伤害；必要时，可将公猪的阴毛剪短至2－3cm。 5. 按摩公猪的包皮腔，排出尿液 当公猪爬上假母猪时，采精员蹲在（或坐在）公猪左侧，用右手尽可能地按摩公猪的包皮，使其排出包皮液（尿液），并诱导公猪爬跨假母猪； 6. 锁定公猪阴茎的龟头 当公猪逐渐伸出阴茎（个别公猪而要按摩包皮，使其阴茎伸出），脱去外层手套，使公猪阴茎龟头伸入空拳（拳心向前上，小指侧向前下）；用中指、无名指和小指紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转，公猪即可安静下来并开始射精；如果公猪的阴茎不够坚挺，可让其龟头在空拳中转动片刻，待其彻底勃起时，再锁定其龟头。小心地取下保温杯盖和盖在滤网上的纸巾。 7. 精液的分段收集 将集精杯口向下，等待浓份精射出。最初射出的少量精液不含精子，而且含菌量大，所以不能接取，等公猪射出部分清亮的液体后，可用纸巾将清液吸附和将胶状物擦除。开始接取精液，应尽量使射精孔刚好露出，使精液直接射到滤网上。一些公猪射精时，先射出清亮的液体，之后是浓份精，然后逐渐变淡，直到变为完全清亮的液体，射出胶状物后，射精结束。而一些公猪则分2－3个阶段将浓份精液射出，直到公猪射精完毕。射精过程历时5－7分钟；如果可能，应根据各个公猪的射精规律，应尽可能只收集含精多的精液，清亮的精液尽可能不收集。 8. 采精结束 公猪射精结束时，会射出一些胶状物，同时环顾左右，采精人员要注意观察公猪的头部动作。如果公猪阴茎软缩或有下假母猪动作，就应停止采精，使其阴茎缩回。注意：不要过早中止采精，要让公猪射精过程完整，否则会造成公猪不适。 9. 将精液送至实验室 小心去掉过滤网及其网上的胶状物，注意不要使网面上胶状物掉进精液中。将集精袋口束在一起，放在保温杯口边缘处，盖上盖子。放入壁厨中，将公猪赶回猪舍。 采精注意事项 采精工作人员应耐心细致，确保工作人员和公猪的安全，防止公猪长期不采精或过度采精，造成公猪恶癖。并应总结小公猪调教的经验，保证每头公猪都能顺利调教成功。 人畜安全 （1）采精员应注意安全，平时要善待公猪，不要强行驱赶，恐吓；（2）初次训练采精的公猪，应在公猪爬上假母猪后，再从后方靠近，按照正确的采精方法采精，一旦采精成功，一般都能避免公猪的攻击行为；（3）平时仍注意观察公猪的行为，并保持合适的位置关系，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻逃至安全区；（4）确保假母猪的牢固，假母猪的安装位置应能使公猪围着假母猪转。并保证假母猪上没有会对公猪产生伤害的地方如锋利的边角。 1. 使公猪感到舒适 （1）在锁定龟头时，最好食指和拇指不要用力，因为这样所有手指把握，可能会握住阴茎的体部，使公猪感到不适；（2）手握龟头的力量应适当，不可过紧也不可放松，以有利于公猪射精和不使公猪龟头转动为度，不同的公猪对握力要求都不相同；（3）即使收集最后射出的精液也应让公猪的射精过程完整，不能过早中止采精；（4）夏天采精应在气温凉爽时进行，如果气温很高，应先给公猪冲凉，半小时后再采精。 2. 精液卫生 （1）经常保持采精栏和假母猪的清洁干燥；（2）保持公猪体表卫生，采精前应将公猪的下腹部及两肋部污物清除，同时注意治疗公猪皮肤病如疥癣，以减少采精时异物进入精液中；（3）采精前尽可能将包皮腔中的尿液排净，如果采精过程中包皮腔中有残留尿液顺阴茎流下时，可先将公猪的龟头部分抬高，等公猪射精中止时或只有清亮液体时，可放下集精杯，用一张纸巾将尿液吸附，然后继续采精。如果包皮液（尿液）进入精液中，可使精子死亡，精液报废。（4）不要收集最初射出的精液和最后部分精液。 3. 采精时间 应在采食后2－3小时采精，饥饿状态时和刚喂饱时不能采精。应固定每次采精时间。 4. 采精频率 成年公猪每周2－3次，青年公猪（1岁左右）每周1－2次。最好固定每头公猪的采精频率。 猪的人工授精实验室管理规范 目标：培养操作人员严格、规范工作的素质，确保从实验室送出的每一份精液输精的可靠性和生物安全性。 人工授精实验室工作和人工授精操作一样，工作人员必须经过培训，并具有严格按照操作规程操作的素质，确保精子不受到危害，并能良好地进行保存。 人工授精实验室是进行精液检查、处理、贮存的场所，为了生产出优质的符合输精要求的精液，一定要把好质量关，保证从实验室送出的每一袋精液的活力不低于0.6，72小时内保存活力不受影响。 1. 实验室要求整洁、干净、卫生，每周一次彻底清洁一次； 2. 非实验室工作人员在正常情况下不准进入实验室，采精员也不准进入实验室，如采精员同时兼任实验室工作，则每次进入实验室时要更换衣、鞋； 3. 实验室工作人员进入实验室要更换衣、鞋，洗手； 4. 各种电器设备应按其要求选择适当插座，除冰箱、精液保存恒温箱、恒温培养箱等外，一般电器要求人走电断，干燥箱无人值守时，设定温度不应高于100o又，连续通电时间在3小时以内；冰箱、恒温水浴、干燥箱等电器应安装接地线； 5. 物品、器皿的清洗、消毒方法 所有器皿应用对皮肤危害性小的、易洗涤的清洁剂清洗，并用自来水冲净，再用蒸馏水冲洗三至四遍，玻璃用品干燥温度为100－150oC；精液分装管使用后立即用蒸馏水冲洗，然后用75％的乙醇冲洗一遍，沥净水分，再放入消毒柜中100oC消毒1小时。多次性输精器使用后，立即用清水冲洗，不得使用任何洗涤剂，冲洗后，再用蒸馏水冲洗，最后用75％的乙醇冲洗，然后放入消毒柜中100oC消毒1小时。这些用品也可用电脑程控式多重消毒柜低温85oC消毒。 6. 稀释液的配制、精液检查、稀释、分装等按照人工授精操作规程进行； 7. 实验室仪器设备应保持清洁卫生 实验室内使用的仪器设备，如显微镜、干燥箱、水浴锅、17oC冰箱、37oC恒温板、电子天平（称）等，必须保持保持清洁卫生，显微镜头（目镜、物镜），应每2周用二甲苯浸泡一次，保持清洁； 8. 作为采精室与实验室之间的传递口的窗只有在传递物品时才能开启使用； 9. 实验室地板、实验台保持干净清洁，每天清洁一至二次； 10.下班离开实验室前一定要检查电源、水龙头、窗是否关闭好，做到万无一失方可离开实验室，确保安全。 猪的人工授精实验室精液处理规范 目标：保证精液在不受不良物理、化学、生物因素影响的情况下，进行精液的处理和保存。 用品清单：采精用品、精液品质检查用品、精液稀释液配制与精液稀释分装用品、保存用品、输精用品、消毒用品（详细说明见用品清单） 采精室送来的精液应在最短的时间内进行稀释和保存，但在稀释前应对精液进行一些检查，以确定精液是否有使用价值； 1.直观指标测定 容量 新鲜精液容量应在100－250ml；过多，可能是混有尿液或副性腺有炎症，过少，说明采精方法不当或公猪生精能力降低。 色泽 精液色泽应为乳白色或灰白色，红色说明有血液。绿色说明有脓液，清黄色说明有尿液；精液色泽越白越浓（可能偏黄）说明精子浓度越高。 气味 精液应没有明显异味，有腥味说明有脓液，有臊味说明混有尿液； 2.活力测定 将精液轻轻摇动或用洁净的玻璃棒搅动，用微量移液器或玻璃棒取精液20uI，放于预温后载玻片中央，盖上盖坡片，在载物台上预温片刻，用推进器将载玻片推至物镜下，在100和400倍下进行观察。如果精子无凝集、出现大群运动波，无明显死亡精子。应为“很好”（5分）；如果精液出现大群波动，但有少量死亡精子应为“好”（4分）；如果有成群运动，但有精子凝集现象，应为“一般”（3分）；有大片凝集或死亡，但有部分精子在正常运动应为“差”（2分）。一般新鲜精液和保存精液应在3分以上方可用于输精。没有载物台恒温设备的实验室，可将预温至37oC的厚玻璃板和载玻片叠在一起，取20uI精液放于载玻片上，盖上盖玻片，迅速放在100倍镜头下检查活力。 在进行精子活力或密度测定时，应注意（1）显微镜的光源光圈应尽量小些，光线过强，就无法看清精子；（2）每次调节显微镜焦距时，都应先将载物台先调到与物镜最近的距离，但不能使载玻片与物镜接触，然后缓慢放低载物台，同时从目镜观察，直到观察到精子为止；观察活力时应轻轻调节微调，以观察各个层次的精子活动情况。 3.密度测定 一般猪场不进行密度测定，可能通过精液的外观检查如色泽判断精子密度，呈乳白色说明精子密度大，白度越高说明浓度越高，相反则说明精子密度低。如果有能力，可用计数板数测定密度，如果有专用的比色仪进行密度测定更方便。也可将精液样品送至科研单位，让技术人员进行密度测定，并将此数值作为稀释倍数的参考。正常的全份精液的密度在1.5－3亿 / 毫升。浓份精液密度在3－6亿/毫升。 4.畸形率测定 初配公猪在使用前及正常使用的种公猪应每季度进行一次畸形率测定，精子可用伊红、龙胆紫或纯兰、红墨水等染色剂染色，并在显微镜400倍下观察，畸形率不应高于25％。如果带中段原生质的精子增多，说明采精频率过高，如果断尾精子增多说明公猪受过高温影响或发烧过；其它畸形精多，可能公猪有先天性损征应予以淘汰。也可将精液样品送至科研单位进行评定。 5.精液的稀释 经过品质检查合格的精液应立即进行稀释，稀释时应将精液与稀释液放在同一个水浴锅中片刻等温后，将稀释液缓慢倒入精液中，并轻轻搅动或摇动。最好稀释时，精液仍放在原来的集精袋中。一般可根据需要和计算（估算）的稀释倍数和精液量加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1：2，最大稀释倍数不超过1：9。如果 是收集的是全份精液（不包括最初射出的精液），稀释倍数为1：2.5，稀释后每个剂量应为70毫升，每个剂量含20毫升鲜精，这样可保证每个剂量中30－60亿个精子。同样，如果是浓份精液（约为全份精液的一半），可按1：6稀释，每个剂量70毫升，含鲜精10毫升。 6.精液的分装 将稀释后的精液放在台架上，分装管的玻璃管一端插入精液中，打开开关，用一支5ml一次性注射器套上移液管的吸咀与另一端连接，拉动注射器活塞，使精液充满分装管，关闭分装管开关，取下注射器吸咀，将分装管端插入精液袋的灌装口 ，并将精液袋挂在固定的板面上，使其自然悬垂。打开开关，使精液进入精液袋内，侍精液灌装到刻度时，或用电子秤称量到一定重量（如70克或80克）时关闭开关，将管插入另一悬挂的精液袋内，然后打开开关。取下灌装好的精液袋，放在热封口机上封口。封口后的精液可暂放在一个泡沫塑料盒中，等全部灌装完后，将精液袋在泡沫塑料盒中停留片刻，再放入17oC恒温冰箱中保存。 7.精液的保存 应确保冰箱功能正常和通电正常，每12或24小时将精液袋取出，上下翻转数次，使沉淀的精子与稀释液混合一下，有利于延长时间。如果停电时间不超过4小时，应在停电期间尽量减少开冰箱的次数。如果停电时间过长，冬季可在冰箱中放置30oC左右的水袋，夏季可在冰箱下层放置一些冰袋，并将其用毛巾包，以维持合适的温度。 8.精液的运输 袋装精液可放在泡沫塑料箱中运输，输精时，也应将精液放在泡沫塑料箱中运至待配母猪舍内。 母猪发情鉴定技术操作规程 目标：及时发现发情母猪，准确判断母猪的发情阶段及输精的最佳时机 母猪的发情鉴定主要工作是确定母猪发情阶段，判断母猪适宜的输精时间 ，猪人工授精的效果好坏，判断配种时机是人工授精成功的一个关键。本资料来源于www.powerpigs.net 猪场动力网。 1.​ 发情生理特征 母猪发情周期平均21天（19－23天），大多数经产母猪在仔猪断奶后一周内（3－7天）发情排卵，配种受胎；母猪发情持续期一般为2－4天，经产母猪发情持续期较短，而后备母猪发情持续时间较长。 2.​ 发情周期分期 母猪发情周期可公为发情前期、发情期、发情后期和间情期，母猪只有在发情时才允许公猪爬跨或称之为静立反应，此行为表现可作为母猪适时输精的指标； 3.​ 各阶段特征 ○1发情前期：母猪举动不安，外阴肿胀，并由淡红色变为红色，这种变化在后备母猪较为明显；阴道有粘液分泌，其粘度渐渐增加。在此期间母猪不允许骑背，平均约为2.7天，不宜输精配种。○2发情期：平均约为2.5天，特征为母猪阴部肿胀及红色开始减退（暗红、泛紫），分泌物也变得浓厚，粘度增加。此时母猪允许压背不动，压背时，母猪双耳竖起向后，后肢紧绷、尾部竖起，背弓起，颤抖。○3发情后期：1－2天，发情母猪的阴部完全恢复正常，不允许公猪爬跨；○4间情期：13－14天，完全恢复到正常状态； 4.​ 发情鉴定方法 每日做两次试情（每天上午7：00－9：00和16：00－17：30进行发情检查），将试情公猪赶至待配母猪舍，让其与母猪头对头接触。判断母猪是否发情：在安静的环境下，有公猪在旁时工作人员按压母猪背部（或骑背），以观察其是否有静立反应。试情公猪一般选用善于交谈、唾液分泌旺盛、行动缓慢的老公猪；没有公猪的猪场应以观察母猪的外阴肿胀、消退（皱而下垂）和粘液情况，以及压背的反应判断发情状况； 5.​ 发情鉴定记录 包括发情母猪耳号、胎次、发情时间、外阴部变化、压背反应等，尤其是后备母猪的记录。 输精操作规程 目标：在不受污染的情况下，将输精器插入母猪阴道内，准确、适时、顺利地将精液输入到母猪的生殖道内，完成配种 用品清单：一次性输精器、精液、润滑剂、一次性手套、纸巾、0.1％高锰酸钾 1.配种方法和输精次数 公以下几种（1）第1次自然交配、第2、3次人工授精；（2）2次人工授精；（3）3次人工授精； 2.输精时间 （1）断奶后3－6天发情的经产母猪，发情出现静立反射后6－12小时进行第1次输精配种；（2）断奶后7天以上发情经产母猪，发情出现静立反应，就进行配种（输精）；无试情公猪的情况下，发现有静立反应应立即第一次输精； 3.精液检查 袋装精液可先将其放在恒温载物台上，用一张载玻片（边缘磨光）压在粘液袋上，使这部分精液加热片刻，在100倍下观察活力，输精前精液的活力不应低于0.6。没有恒温载物台的实验室，可将精液袋封口线内刺破，用微量移液器吸取精液在显微镜下检查，如果精液合格，再用封口机将精液袋封好。 4.输精前再次进行发情鉴定 将试情公猪赶至待配母猪栏之前，使母猪在输精时与公猪口鼻接触；应对发情母猪的敏感部位进行刺激，一方面检查母猪的发情情况，另一方面可刺激母猪的宫缩，使输精更顺利。刺激部位为背部、肩部、后侧腹部、后乳房部、阴门。同时检查阴门及阴道粘膜的肿胀消退状况，粘液是否变得粘稠，红肿是否消退为暗红（略带紫红）； 5.外阴消毒 输精前清洁双手或带上一次性手套；用消毒纸巾充分将外阴及阴门裂的污物擦净，擦干； 6.在输精管前端涂上润滑剂 从密封袋中取出没有受任何污染的一次性输精管（手不应接触输精管的前2/3部分），在其前端上涂上精液作润滑剂（如红老母霉素软膏）； 7.将输精管插入母猪的生殖道内 站 在母猪的左侧，面向后，双手分开母猪外阴部，左手将外阴向后下方拉，使外阴口保持张开状态，将输精管45度角向上插入母猪生殖道内，当感到有阻力时，缓慢用力将输精管向前送入4cm左右，直到感觉输精管前端被锁定（轻轻回拉拉不动）； 8.输精 从精液贮存箱中取出品质合格的精液产，确认公猪品种、耳号；缓慢颠倒摇匀精液，掰开精液袋封口将塑料管暴露出来，接到输精管上，将精液袋后端提起，开始进行输精（也可将精液袋先套在输精管上后再将输精管插入母猪生殖道内）；在输精过程中，应不断抚摸母猪的乳房或外阴、压背、抚摸母猪的腹侧以刺激母猪，使其子宫收缩产生负压，将精液吸纳。输精时除非输精开始时精液不下，勿将精液挤入母猪的生殖道内，以防精液倒流；如果在专用的输精栏内进行输精，可隔栏放一头公猪，这样输精会更容易些；如果输精场地宽敞，输精员可站在母猪的左侧，面向后，左臂挎在母猪的后躯，将重力压在母猪的后背部，并用手抚摸母猪侧腹及乳房，右手将精液袋提起，这样输精更接近本交，精液进入母猪生殖道的速度更快些。 9.防止精液倒流 用控制精液袋高低的方法来调节精液流出的速度，输精时间一般在3－7分钟，输完后，可把输精管后端一小段折起，用精液袋上的圆孔固定，使输精器滞留在生殖道内3－5分钟，让输精管慢慢滑落；或较快地将输精管向下抽出，以促进子宫颈口收缩，防止精液倒流； 10.从17oC冰箱中取出的精液，无需升温至37oC，摇匀后可直接输精，但检查精子活力需将载玻片升温至37oC； 11.每头母猪每次输精都应使用一根新的输精管； 12.输精时间的问处理（1）如果在插入输精管时，母猪排尿，就应将这支输精管丢弃；（2）如果在输精时，精液倒流，应将精液袋放低，使生殖道内的精液流回精液袋中，再略微提高精液袋，使精液缓慢流入生殖道，同时注意压迫母猪的背部或对母猪的铡腹部及乳房进行按摩，以促进子宫收缩；（3）如果以上方法仍然不能解决问题，继续倒流或不下，可前后移动输精管，或抽出输精管，重新插入锁定后，继续输精； 13.输精次数及间隔时间 每头母猪在一个发情期内要求至少输精两次，最好三次，两次输精时间间隔8－12小时。 14. 认真登记母猪生产卡、配种记录。 附录1：猪人工授精采精室及实验室立体图说明： 人工授精实验面积：3X3.5（左右宽X深）平方米左右，采精室2.5×3.5平方米。 一、各部分说明： 1.水池。 2.工作台面，高75cm，宽50cm，左铡为湿区，用于清洗用品、配制稀释液、稀释精液等工作。 3.工作人员座位。 4.干区，用于对精液质量进行。 5.分装区，用于精液分装、标记、排序与保存、分发。 6.壁厨，用于实验室与采精室之间的用品及精液传递，底部距地面高120cm，高60cm，宽40cm,深30cm,内部吊以100W-175W的红外线灯，壁厨两边均有门可开启。 7.栅栏门，宽60cm，与防护栏等高。作为将公猪赶入采精区的通道。 8.假母台：宽265cm，长100cm，高60cm，后躯至后腿距离35cm，顶部为圆弧形。 9.防护栏，距地面高75cm直径10－15cm,净间距28cm。用于防止公猪逃走和保证工作人员进出方便。 10.防滑垫或沙坑，长100cm，宽65cm，深3cm。 附录2假母台的设计要求： 1.​ 假母台长1000mm，宽260mm，高可在560－700mm.调节。 2.​ 台面为木质或铁板制成，木质台面要求下部。后躯距后腿300－350mm左右。前躯下可安装或焊接一个供公猪前肢支撑的踏脚。如果能够做到，可将假母猪的后躯（约150mm长）向后现倾斜，以便公猪爬时更舒适。本资料来源于www.powerpigs.net 猪场动力网。 3.​ 整个假母猪应该保证各部分连接牢固，并且不得有容易造成公猪损伤的毛刺、棱角。假母猪应能保证承受500公斤以上的压力。 4.​ 假母猪可以是四条腿，也可以是两条腿或一条腿。但应牢固地固定于地面上，并且周围有足够的空间，使公猪能围着假母猪转。 附录3 猪精液稀释粉简介 [成分]由葡萄糖、EDTA-Na、KCI、NaHCO3、柠檬酸钠、抗生素等成分组成。 [作用]用于配制适宜猪精子存活、保持受精力的稀释液。稀释液与精液等渗，能维持精子存活适宜的PH值，抑制精液内微生物的繁殖，中和精子代谢产生的副产物，提供精子所需要的能量物质。用本品配制的稀释液稀释精液，精液可保存3～5天。 [用法]将一小袋稀释粉放入洁净灭菌的三角瓶中，加入500ml纯水或蒸馏水，加盖搅拌，彻底溶解后，将三角瓶放入33～35oC的水浴锅中静置预温10分钟。采集到的猪精液应尽快稀释，稀释时，稀释液温度应与精液温度接近，温度差不超过1oC（必要时可将盛精液的容器与三角瓶放在同一个水浴中等温3分钟）。根据精液的量和精子密度，向精液中加入适量的稀释液。稀释比例为1：2～9倍。 [保持期]避光、干燥、密封、2～17oC保存，家用冰箱冷藏箱内保存更好，保持期3个月。 说明：本资料来源于网络，由www.powerpigs.net 猪场动力网。整理排版。