氯虫苯甲酰胺悬浮剂的高效液相色谱分析

第48卷第4期 2009年4月 Vol. 48, No. 4 Apl. 2009 农 药 AGROCHEMICALS 氯虫苯甲酰胺悬浮剂的高效液相色谱分析 王广成，吴春先，高立明，陈丙坤 (四川省农药检定所， 成都 610041) 摘要：采用反相高效液相色谱法对氯虫苯甲酰胺悬浮剂进行定量分析。 使用Waters SunFireTM C18不锈钢 柱和二极管阵列检测器，在265 nm波长下对氯虫苯甲酰胺悬浮剂进行分离和定量分析。 结果明：该方法的线 性相关系数为0.999 3；偏差为0.18；变异系数为0.92%；平均回收率为99.43%。 关键词：氯虫苯甲酰胺；高效液相色谱；分析 中图分类号：TQ450.7 文献标志码：A 文章编号：1006-0413(2009)04-0267-03 Analyzed Chlorantraniliprole SC by HPLC WANG Guang-cheng, WU Chun-xian, GAO Li-ming, CHEN Bing-kun (Sichuan Province Institute for the Control of Agrochemicals, Chengdu 610041, China) Abstract: Analyzed chlorantraniliprole SC by RP-HPLC. Using Waters SunFireTM C18 reverse phase column and diode array detector to quantitatively analyze the active ingredient of chlorantraniliprole SC. The detection wavelength was 265 nm. The results showed that the linear correlation coefficient was 0.999 3, the standard deviation was 0.18, the variation coefficient was 0.92%, the average recovery was 99.43%. Key words: chlorantraniliprole; HPLC; analysis 氯虫苯甲酰胺(chlorantraniliprole)是一种具有新型结构 (双酰胺/吡唑类)的广谱杀虫剂，是从邻氨基苯甲二酰胺类 化合物中筛选出来的第1个杀虫剂[1]，在2007年布莱顿(BCPC) 植保大会上获最具创新的化学奖。 由Dupont公司发现并开 发，注册商标为Rynaxypyr。 氯虫苯甲酰胺的分子式为 C18H14BrCl2N5O2，化学名称为3-溴-N-[4-氯-2-甲基-6-[(甲氨 基)羧基]苯基]-1-(3-氯-2-吡啶基)-1H-吡唑-5-甲酰胺，分子 结构式见图1。 熔点为209 ℃。 20 ℃时，在水中的溶解度 为1.02 mg/L，在丙酮中溶解度为344 6 mg/L，在甲醇中溶解 度为171 4 mg/L。 氯虫苯甲酰胺化学结构使其具有其他任何 杀虫剂不具备的全新杀虫原理，能高效激活昆虫鱼尼丁(肌 肉)受体，过度释放细胞内钙库中钙离子，导致昆虫瘫痪死 亡，对鳞翅目害虫的幼虫活性高，杀虫谱广，持效性好[2]。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 1.1.1 仪器 Waters2695高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测仪 器(DAD)和自动进样器，Empower化学工作站；色谱柱： Waters SunFireTM C18(5 mm，4.6 mm×150 mm)不锈钢柱； 超 声波清洗器；Millipore超纯水制备系统；过滤器：过滤膜 孔径约0.45 mm。 1.1.2 试剂 甲醇：色谱纯；水：超纯水；氯虫苯甲酰胺标样：已 知质量分数≥98.0%；200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂：市 售，上海生农生化制品有限公司。 1.2 高效液相色谱操作条件 流动相：甲醇-水(体积比65∶35)；柱温：25 ℃；流 速：1.0 mL/min；检测波长：265 nm；进样量：5 mL；氯 虫苯甲酰胺保留时间约5.8 min。 典型的氯虫苯甲酰胺标 样和悬浮剂的高效液相色谱图见图2、3。 收稿日期：2008-11-05 作者简介：王广成(1974—)，男，重庆渝北人，本科，主要从事农药质量分析和农药残留检测。 Tel ：028-85505209， E-mail ：scwgc@163.com。 图1 氯虫苯甲酰胺化学结构式 目前国内未见氯虫苯甲酰胺定性、定量分析方法的公 开报道，与其有关的文献报道较少，作者通过采用反相高 效液相色谱，外标法测定200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂的有 效成分，方法简便快捷且精密度和准确度较高，适用于氯 虫苯甲酰胺悬浮剂的检测分析。 图2 氯虫苯甲酰胺标样液相色谱图 农药分析- 268 第48卷农 药 AGROCHEMICALS 图3 200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂液相色谱图 上述液相色谱操作条件系典型操作参数，可根据不同 仪器特点，对给定的操作参数做适当调整，以期获得最佳 效果。 1.3 测定步骤 1.3.1 标准溶液的配制 称取0.05 g氯虫苯甲酰胺标准品(精确至0.000 2 g)于25 mL 容量瓶中，用甲醇溶解，超声波助溶，冷却至室温，甲醇 定容，摇匀备用。 1.3.2 试样溶液的配制 称取含0.05 g氯虫苯甲酰胺的样品(精确至0.000 2 g)于 25 mL容量瓶中，用甲醇溶解，超声波助溶，冷却至室温， 甲醇定容，摇匀，用孔径约0.45 mm的滤膜过滤备用。 1.3.3 测定 在上述条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标 准溶液，当相邻2针的峰面积比变化小于1.5%时，按照标 准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进样，进 行分离和测定。 1.3.4 计算 根据标准品和样品溶液中的氯虫苯甲酰胺的峰面积， 按下面公式采用外标法计算氯虫苯甲酰胺的含量。 计算 公式如下： X(%) = A2·M1·P A1·M2 式中：A1为标准品溶液中氯虫苯甲酰胺峰面积的平均值 A2为试样溶液中氯虫苯甲酰胺峰面积的平均值 M1为氯虫苯甲酰胺标准品的质量(g) M2为试样的质量(g) P为氯虫苯甲酰胺标准品的质量分数(%) 2 结果与讨论 2.1 检测波长的选择 采用DAD检测器，对氯虫苯甲酰胺标准品和试样在 190~400 nm波长下的吸收进行比较(见图4)。 发现氯虫苯 甲酰胺紫外扫描图上显示最大吸收波长为198.3 nm，次 吸收段在260~270 nm之间。 但是在200 nm左右时，紫外 图4 氯虫苯甲酰胺紫外吸收曲线 2.2 色谱测定条件 实验选用Waters SunFireTM C18(5 mm，4.6 mm×150 mm)不 锈钢柱。 依据氯虫苯甲酰胺在水和甲醇中的溶解度，选 择甲醇作溶剂溶解样品。 流动相的选择则根据化合物的 特点，选用甲醇-水与乙腈-水2种不同的体系，按不同的比 例进行选择比较，经测试，选择甲醇-水(体积比65∶35)为 流动相，当柱流速为1.0 mL/min时，有效成分与杂质能有 效分离，峰型对称，基线平稳，并且分离时间适中，能满 足工作需要。 2.3 线性相关性测定 分别配制质量浓度为1.022、1.492、1.862、2.006、 2.108、2.424、3.164 g/L的氯虫苯甲酰胺标准溶液，按上 述方法分别测定各自峰面积，每个质量浓度测定2次， 取平均值。 以氯虫苯甲酰胺质量浓度为横坐标，以氯 虫苯甲酰胺峰面积为纵坐标，用Spss软件拟和工作曲 线。 求得线性回归方程为y=4E+06x+874 007，线性相关 系数r=0.999 3。 2.4 方法的精密度测定 从同一200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂中准确称取5个试 样，在上述色谱操作条件下进行测定，结果见表1。 从表1 可以看出：测定200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂时，标准偏差 为0.18，变异系数为0.92%。 变异系数小于CIPAC(国际 农药分析协作委员会)的要求，CIPAC要求当有效成分 含量为20%时，变异系数应在1.71%以内，当有效成分含 量为50%时，变异系数应在1.49%以内。 末端吸收较差(λmax=198.3 nm)，如果用紫外检测，波长小于 220 nm时，甲醇等试剂均有较大的紫外吸收，受试剂影响 很大，溶剂噪音干扰明显，稳定性差，使分析很难进行， 所以采用UV法鉴别时，一般不用220 nm以下波长的吸收 特性做鉴别。 在次吸收段中选择265 nm作为检测波长，溶 剂干扰较小，主峰和杂质分离效果较好，实验分析过程稳 定，因此确定265 nm为氯虫苯甲酰胺分析方法的检测波 长。 用此检测波长实验，由于吸收波长的响应关系，在 实验中样品质量浓度要求相对偏高一些。 第4期 269 2.5 方法的准确度测定 称取5份已知含量的200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂试样于 50 mL的容量瓶中，分别加入一定量的氯虫苯甲酰胺标准溶 液，在上述色谱操作条件下进行测定，氯虫苯甲酰胺悬浮 剂的回收率范围为98.56%~100.23%，平均回收率为99.43%。 3 结论 实验结果表明：本方法的线性关系良好、准确度和精 密度较高，采用本方法对200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂的有 表1 方法的精密度测定结果 编号 1 2 3 4 5 平均值 标准偏差 变异系数/% 200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂质量分数(%) 19.7920.2520.0619.8720.3020.054 0.18 0.92 效成分进行分析测定，具有检测准确、重复性好、分析速 度快、操作简便等特点，是一种可行的分析方法，适用于 产品质量检测分析。 参考文献： [1]柴宝山, 林丹, 刘远雄, 等. 新型邻甲酰氨基苯甲酰胺类杀虫 剂的研究进展[J]. 农药, 2007, 46(3): 148-153. [2]吴永果, 毛春晖, 兰支利. 3-溴-1-(3-氯-2-吡啶基)-4,5-二 氢-1H-吡唑-5-甲酸乙酯的合成研究[J]. 精细化工中间体, 2007, 37(5): 15-17. 责任编辑：李新 王广成，等： 氯虫苯甲酰胺悬浮剂的高效液相色谱分析 中化化工科学技术研究总院 化科总院科发[2009]9号 关于召开“第八届全国新农药创制学术交流会”的通知 各有关单位： 开展新农药创制工作是我国农药行业提升技术创新水平、参与全球竞争、实现可持续发展的必由之路。 “十一·五”期 间，在国家科技支撑项目的支持下，我国的农药创制工作已取得可喜的成果。 为加强农药创制人员之间的交流，开拓创新 思路和理念，互相学习，共同进步，促进我国新农药的研究开发工作，提高我国新农药创制的整体水平，中化化工科学技术研 究总院将组织召开“第八届全国新农药创制学术交流会”。 现将会议具体事宜通知如下： 一 会议内容 1、大会专题：大会邀请了4位国内著名专家做大会报告 《绿色化学农药先导结构及作用靶标的发现与研究》 华东理工大学校长钱旭红教授 《我国农业主要病虫草害发生、防治对农药创制的需求》 全国农业技术推广服务中心农药药械处处长邵振润研究员 《绿色化学农药的创制研究》 中国科学院上海有机化学研究所吕龙研究员 《我国蔬菜病害现状、防治与创制杀菌剂研究》 中国农业科学院蔬菜花卉研究所李宝聚研究员 2、新农药创制学术交流：学术交流分大会交流和分组交流两部分，通过交流将评选出优秀论文并予与奖励。 二 会议主办单位：中化化工科学技术研究总院 会议协办单位：上海农乐生物制品股份有限公司 上海交通大学生命科学技术学院 会议承办单位：北京广源资信精细化工科技发展中心 三 会议具体安排 1、会议时间：2009年5月5日—8日(5日全天报到) 2、会议地点：浙江新世纪大酒店(杭州市文三路18号)，宾馆电话：0571-88391111 3、收费标准：参会代表注册费为2200元/人(含会务费、论文集、专利研究等系列报告一套7本等)，学生代表注册费 为1700元/人。 4月20日前(以汇款日期为准)注册的代表注册费优惠200元。 会议统一安排食宿，费用自理，标准间价格300元/ 天(含早餐)。 会议代表家属餐费为120元/天。 4、《具有专利保护的农药品种统计报告》、《1 9 9 3—2 0 0 4年中国公开的农药活性新化合物专利申请研究报告》以及《世 界农药专利跟踪研究年度报告》等7个报告将在本会议上首次发行。 四 联系方式 联系人及电话： 黄文耀 010-64262348，13911519300 传真： 010-64262348 E-mail ：cnprc@263.net 五 其他 会议接受企业的赞助并为其提供宣传，具体事宜请与会务组黄文耀同志联系。 注册费用请电汇至： 开户银行：中国民生银行安定门支行；户名：北京广源资信精细化工科技发展中心；帐号：0108014170008743 中化化工科学技术研究总院 2009年2月10日