硫酸氢氯吡格雷中有关物质的合成

中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010。41(5) 硫酸氢氯吡格雷中有关物质的合成 蒋 晨 ，李子清。，陈小勇 ，郭子维 ，李佩杰 (1．重庆福安药业(集团)股份有限公司，重庆 401254；2．重庆礼邦药物开发有限公司，重庆401121) · 331 · 摘要：为了对硫酸氢氯吡格雷产品质量进行控制，分别合成了美国药典 31版所载硫酸氢氯吡格雷的 3种有关物质—— (+)一( 一a一(2一氯苯基 )．6，7一二氢噻吩并 [3，2一C]吡啶基 ．5(4 一乙酸盐酸盐 (A)、 (2一氯苯基 )．4，5一二氢噻吩并 [2，3．c] 吡啶基 一6(7 一乙酸甲酯盐酸盐 (B)、(一)一 )一 一(2一氯苯基 )一6，7一二氢噻吩并 [3，2．c]吡啶基 ．5(4脚 一乙酸甲酯硫酸氢 盐 (C)，并经IR、 HNMR、MS等确证结构。 关键词：硫酸氢氯吡格雷；有关物质；区域异构体；合成；结构征 中图分类号：R972 文献标志码：A 文章编号：1001—8255(2010)05 0331-05 Synthesis of Related Substances of Clopidogrel Hydrogen Sulfate JIANG Chen ，LI Ziqing ，CHEN Xiaoyong ，GUO Ziwei ，LI Peijie (』．Chongqing Fuan Pharmaceutical(Group)Co．，Ltd．，Chongqing 401254,"2．Chongqing Lybon Pharm—Tech Co．，Ltd．，Chongqing 401121) ABSTRACT：To perform the quality control of clopidogrel hydrogen sulfate，three related substance 一 (+)一( 一 一 (2-chloropheny1)一6,7一dihydrothieno[3,2一c]pyridin-5(4 -acetic acid hydrochloride(A)，methyl 一(2-chloropheny1)一 4，5一dihydrothieno[2，3一C]pyridin一6(7／4)一acetate hydrochloride(B)and(一)一(R)一methyl 一(2-chloropheny1)一6,7一 dihydrothieno[3,2-c]pyridin一5(4／4)一acetate hydrogen sulfate(C)recorded in USP3 1 were prepared，and their structures were confirmed by IR， H NMR and M S． Key Words：clopidogrel hydrogen sulfate；related substance；regioisomer；synthesis；structure identification 硫酸氢氯吡格雷 (clopidogrel hydrogen sulfate， 1)，化学名为 (+)一(S)．仪．(2一氯苯基 )一6,7．二氢噻 吩并 [3，2-c]吡啶基 一5(4 )一乙酸甲酯硫酸氢盐， 是法国Sanofi．Aventis公司研发的新型高效抗血小 板聚集药物，能选择性阻断 ADP与血小板受体的 结合 ⋯。本品耐受性好、不良反应少，临床应用广 泛，继 1998年首次在美国上市以来，先后在欧洲、 O~／OCH3 O OH 加拿大、澳大利亚、新加坡等国上市，并于 2001 年进入中国市场，临床用于治疗动脉粥样硬化、急 性冠状动脉综合征等。 美国药典 3 1版提出了1中的 3个有关物质 A、 B、C(图 1)，其中杂质 B已有合成报道 。 为了对 A、B、C进行定性分析和定量控制，本研 究对其进行合成，并对结构加以确证。 A B 图 1 1和有关物质 A、B、C的结构式 收稿 日期：2010-01—11 作者简介：蒋 晨(1972一)，男，工程师，从事新药的合成研发。 1 1： 013996073450 E-mail：lipeijiel977@163．com HC1 C 有关物质 A是 1水解物的盐酸盐，化学名为 (+)一( 一 一(2一氯苯基 )一6，7．二氢噻吩并 [3,2．C]吡 啶基 一5(4 一乙酸盐酸盐。本研究参考文献 ，在 酸性条件下水解 1后成盐酸盐制得 A，可以克服碱 性条件下水解易消旋的问题，而且反应速度快，副 产物少，收率为 88％ (图2)。 有关物质B为 1的区域异构体，是消旋体的 盐酸盐，化学名为 ．(2．氯苯基 )一4，5．二氢噻吩 并 [2，3一c]吡啶基 一6(7 ．乙酸甲酯盐酸盐。本研 究参考相关文献 4 J，以3．溴噻吩为原料，经格氏 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010，41(5) 反应后直接滴加环氧乙烷，再于酸性条件下水解 得到3一噻吩乙醇 (2)，2经对甲苯磺酰氯酯化生成 3．噻吩乙醇对甲苯磺酸酯 (3)，3在碱性条件下与 消旋的邻氯苯甘氨酸甲酯缩合生成 (士)一 ．(2．氯苯 基 )．2一[2一(噻吩．3．基 )乙胺基 ]乙酸甲酯盐酸盐 (4)，4于酸性条件下通过 Mannich反应，闭环生 成 B，总收率为 61％ (图3)。 C _ OOCH3 C — OOH 詈 椰 图2 有关物质A的合成路线 CO2CH3 肌 4 旦 旦 2竺 2)HCl(g) 图 3 有关物质 B的合成路线 有关物质 C为 1的对映异构体，化学名为 (一)．(R)- 一(2．氯苯基 )．6，7一二氢噻吩并 [3，2一c]吡 啶基 ．5(4H)一乙酸甲酯硫酸氢盐。文献 将消旋 化的氯吡格雷用樟脑磺酸拆分，然后在碱性条件下 游离酸根，再成硫酸氢盐。此法拆分时原料浪费大， 收率低。本研究参考文献 ，以消旋的邻氯苯甘氨 O B 酸甲酯为原料，先在乙醇中用 D一酒石酸拆分生成 ( )．邻氯苯甘氨酸甲酯酒石酸盐 (5)，5在碱性条 件下与 OL．(2．噻吩基 )乙基对甲苯磺酸酯缩合生成 (R)一a．(2一氯苯基 )一2．[2．(一2．噻吩基 )乙胺基 ]乙 酸甲酯盐酸盐 (6)，6经Mannich反应生成 C，总 收率为 54．3％ (图4)。 。．酒石酸 — - - - C — H2CH2OTs Et3N fTHF 2 H2SO ) 4／丙酮 ＼ 、 图4 有关物质 C的合成路线 C 器 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010，41(5) 实验部分 (+)．(S)．0c．(2．氯苯基)．6，7．二氢噻吩并 [3，2．c] 吡啶基-5(4 -乙酸盐酸盐 (A) 1(购 自上海华蓝化 学科技有限公司，纯度 99．0％，10 g，23．8 mmo1)溶于水 (5O m1)中，室 温滴加浓硫酸 (1 g，10 mmo1)，滴毕加热至 8O℃ 反 应 1．5 h。TLC[展 开剂： 乙酸 乙酯 一石油 醚 (2 ：1)]显示反应完全后冷却至室温。加入二 氯 甲烷 (30 m1)，滴加饱和碳酸氢钠水溶液 (约 30m1)调至碱性。分液，有机层用水 (30 mix2)洗 涤，无水硫酸镁干燥后过滤，滤液冷却至 0～ 5℃， 通入干燥氯化氢 (约 1 5 min)，继续搅拌 1 h后过 滤，得 白色固体 A(6．9 g，88％ )，mp 195～ 197℃， 纯度 98．9％ [HPLC法：色谱柱 十八烷基键合硅胶 柱，流动相 甲醇．水 一三乙胺 (680：320：2，用 20％磷酸调至pH 3．8)，流速 1．0 ml／min，检测波长 220 nm ]，ee值 97％ [HPLC法：色谱柱 ULTRON ES．OVM型手性柱 (手性识别蛋白 (卵类蛋白)键 合硅胶为填充剂 )，4．6 ITllnX150 nll／l，5 gm；流动 相 乙腈 ．0．01 mol／L磷酸二氢钾 (25：75)；检测 波长 220 nm；流速 0．7 ml／min；柱温 25℃ ]。[仪]D20 +63．6。(C 1，甲醇 )。ESI—MS(m／z)：330[M+Na] ； H NMR(CDC13)6：53．06(t，J=4．0 Hz，2H，CH2)， 3．31～ 3．40(1TI，2H，CH2)，4．41(s，2H，CH2)，5．24 (s，1H，CH)，6．67(d，J=4．0 Hz，1H，CH)，7．16(d， J=4．0 Hz，1H，CH)，7．28～ 7．33(m，2H，CH×2)， 7．44(d，J=4．0 Hz，1H，CH)，7．75(d， 8．0 Hz，1H， CH)，12．34(s，1H，OH)；IR(KBr)v(cm )：3429．2， 1735．8，1180．3，754．1。 3．噻吩乙醇 (2) 用 3一溴噻吩 (1O ml，0．10 mo1)、镁屑 (2．8 g， 0．12 mo1)、环氧乙烷 (5_3 g，0．12 mo1)和 THF(20 m1) 投料，参照文献 操作，收集 1．74 kPa／107～ 110℃的馏分，得无色液体2(11．9 g，89．5％)[文 献 Hj：收率 90．8 ，bp 1．73 kPaJl08～ 110℃]，纯 度 99．5％ (GC法：毛细管柱，固定相 5％苯基．95 甲基聚硅氧烷；柱温 240℃；进样口温度 300℃， FID检测器，温度 330℃，分流比 30：1，流速 · 333 · 0．5 ml／min)。ESI—MS(m／z)：151[M+Na] ； H NMR (CDCl3)6：2．91(t，J=5．2 Hz，2H，CH2)，3．09(br s，1H， OH)，3．84(t，J=5．2 Hz，2H，CH2)，6．99(d， 3．6 Hz， 1H，CH)，7．06(s，1H，CH)，7．30(d，J=4．0 Hz，1H， CH)。 3-噻吩乙醇对甲苯磺酸酯 (3) 2(12．8 g，0．1 mo1)溶于甲苯 (100 m1)中。冷 却至 0℃，加入对甲苯磺酰氯 (22．8 g，0．12 mo1)， 滴加三乙胺 (20．2 g，0．2 mo1)，滴毕搅拌 2 h。加 入浓盐酸 (10 m1)和水 (50 m1)，搅拌 l h。分液， 有机层用水 (30 mix3)洗涤，减压蒸去溶剂，剩 余物用 95％乙醇重结晶，得到白色固体 3(25．5 g， 90．4％)，mp 32～ 34℃，纯度 99．7％ (GC法： 条件同化合物 2)。ESI—MS(m／z)：305[M+Na] ； H NMR(CDC13)6：2．46(s，3H，CH3)，3．01(t， 7．0 Hz，2H，CH2)，4．22(t，J--6．5 Hz，2H，CH2)，6．89(dd， = 5．0 Hz， =1．0 Hz，1H，CH)，6．98(d，J=1．5 Hz，1H， CH)，7．24(dd， =4．5 Hz， =3．0 Hz，1H，CH)，7．32(d， J--8．0 Hz，2H，CHx2)，7．34(d， 8．5 Hz，2H，CHx2)。 (4-)．or-(2．氯苯基 )．2_[2．(3．噻吩基 )乙胺基 ] 乙酸甲酯盐酸盐 (4) 邻氯苯甘氨酸 甲酯 (10 g，50．1 mmo1)溶于 THF(80 m1)中。加入 3(18．4 g，65．2 mmo1)和三 乙胺 (6．5 g，65．1 mmo1)，室温搅拌 10 min，加热 至回流反应 10 h。反应液减压浓缩至干，剩余物中 加入甲苯 (80 m1)和水 (20 m1)，搅拌后分液，有 机相依次用饱和盐水 (15 mlx2)和水 (15 mlx2)洗 涤。冷却至 0～ 5℃，通入干燥氯化氢气体至pH 1～2。同温搅拌 3 h，过滤，滤饼用甲苯 (20 mix 2)洗涤，50℃减压干燥 3 h，得 固体 4(14．7g， 87％)，mp 1 83～ 1 85℃，纯度 98．7％ (HPLC 法：条 件 同有 关 物 质 A)。ESI．MS(m／z)：332 EM+Na] ； H NMR(CDCI3)6：2．51(s，1H，NH)， 3．04～ 3．16(m，4H，CH2×2)，3．74(s，3H，CH3)，5．59(s， 1H，CH)，6．99(d，J=5．0 Hz，1H，CH)，7．28(d， 1．5 Hz，1H，CH)，7．48～ 7．55(m，3H，CH×3)，7．63(d， J=7．5 Hz，1H，CH)，7．77(dd，J1=2．5 Hz， =1．5 Hz， 1H．CH)。 0c．(2．氯苯基 )．4，5．二氢噻吩并 [2，3一C]吡啶 基一6(7／-／)．乙酸甲酯盐酸盐 (B) 4(10 g，28．9 mmo1)、36％甲醛水溶液 (7 g， 86．6 mmo1)、浓 盐 酸 (0．57 g，58 mmo1)和 水 (50 m1)加至 250 ml反应瓶中。加热至 40℃反 应 1 0 h，TLC[展开剂：乙酸乙酯 一石油醚 (1： 4)]显示反应完毕后冷却至室温，加入乙酸乙酯 (30 m1)，搅拌 0．5 h。冷却至 l0～ 15℃，滴加饱 和碳酸氢钠水溶液 (约20 m1)调至 pH 7～ 8。分 层，水层用乙酸乙酯 (20 mix2)萃取，合并有机 相，用水 (20 ml~2)洗至中性，无水硫酸镁干燥后 过滤，滤液浓缩至干，得淡黄色油状物。加入甲苯 (50 m1)，室温搅拌 0．5 h，冰水浴冷却至 0～ 5℃， 搅拌下缓慢通入干燥氯化氢气体 (约20 rain)，析 出白色固体。保温搅拌 1 h，过滤，滤饼用 甲苯 (20 ml~2)洗涤，50℃减压干燥 3 h，得 白色固 体B(8．8 g，85％)，mp 1 84～ 186℃ (文献 ： 134～ 137℃ )，纯度 98．1％ (HPLC法：条件同有 关物质 A)。ESI—MS(m／z)：344[M+Na] ： H NMR (CDCI3)6：2．50～ 2．5I(ITI，2H，CH2)，2．82(m，2H， CH2)，3．21(S，2H，CH2)，3．72(S，3H，CH3)，5．38(S， 1H，CH)，6．90(d，J=5．0 Hz，1H，CH)，7．43(S，1H， CH)，7．49(d，J=4．0 Hz，2H，CH×2)，7．60(S，1H， CH)，7．75(dd，J1=2．5 Hz， =1．0 Hz，1H，CH)； IR(KBr)v(cm )：1751．2，1224．7，769．5。 )-邻氯苯甘氨酸甲酯 ．D．酒石酸盐 (5) 邻氯苯甘氨酸甲酯 (30 g，0．15 mo1)溶于乙醇 (90 m1)中，加热至 30℃，加入D一酒石酸 (24．8 g， 0．17 mo1)的乙醇 (250 m1)溶液，滴毕加热至回流 搅拌 5 h。冷却至 0℃，析出白色固体。过滤，滤 饼用 95％乙醇 (250 m1)重结晶，50℃减压干燥 3 h，得 5(20．6 g，82．3％)，mp 167～ 169℃。纯 度 98．7％ (HPLC法：条件同有关物质 A)。[ ] 一 94-3。(c 1，甲醇)。ESI—MS(m／z)：222[M+Na] 。 )一cc_(2-氯苯基)一2一[2一(-2-噻吩基 )乙胺基 ] 乙酸甲酯盐酸盐 (6) 5(30 g，86．1 mmo1)、 氯 仿 (60 m1)和 水 (30m1)加至250ml反应瓶中。室温滴加浓氨水 (约 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010，41(5) 35 m1)调至 pH>8。分出有机相，水层用氯仿 (20 mlx2)萃取。合并有机层，用水 (20 mlx2)洗 至中性。无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩至干， 得淡黄色液体 )一邻氯苯甘氨酸甲酯 (19．2 g)。 上述油状物溶于THF(200 m1)中，加入 2一噻 吩乙醇对甲苯磺酸酯 (购自山东银飞达化工有限公 司，纯度 99．0 ，31．6 g，111．8 mmo1)和三乙胺 (11_3 g，112 mmo1)，室温搅拌 10 min，加热至回流 反应 10 h。减压浓缩，剩余物中加入甲苯 (200 m1) 和水 (40 m1)，搅 拌，分除水层。有机相用水 (30 mlx2)洗涤，冷却至 0～ 5℃，通入干燥氯化 氢气体至pH 1～2。保温搅拌 4 h，过滤，滤饼用 甲苯 (40 mlx2)洗涤，于 50℃减压干燥 3 h，得 6(24．8 g，83％ )，mp 1 84～ 1 86℃。纯度 99 (HPLC法：条件同有关物质 A)。[ ] 109．6。 (C 1， 甲 醇 )。ESI．MS(m／z)：332[M+Na] ； H NMR (CDC13)6：3．11(S，1H，CH)，3．37(S，1H， CH)，3．50～ 3．60(Ill，2H，CH2)，3．78(S，3H，CH3)， 5．62(S，1H，CH)，6．90(dd，Jl：6．0 Hz，A=4．5 Hz，1H， CH)，7．13(d，J=5．2 Hz，IH，CH)，7．34～ 7．42(m， 2H，CH×2)，7．47(d，J--7．6 Hz，1H，CH)，8．03(d，j_- 7．6 Hz，1H，CH)。 (一)-(R)-0c一(2-氯苯 基 )-6，7-二氢噻 吩并 [3，2一c]吡啶基 -5(4 -乙酸甲酯硫酸氢盐 (C) 6(15 g，43-3 mmo1)、36％甲醛水溶液 (10．5 g， 1 30 mmo1)、 浓 盐 酸 (85 g，8．7 mmo1)和 水 (75 m1)于40℃反应 10 h。冷却至室温，加入二 氯甲烷 (50 m1)，搅拌 O．5 h后冰水浴冷却至 10～ 1 5℃。滴加饱和碳酸氢钠水溶液 (约 20 m1)调至 pH 7～ 8。分液，水层用二氯甲烷 (30mlx2)萃取。 合并有机相，用水洗至中性，无水硫酸镁干燥后过 滤，滤液浓缩至干。剩余淡黄色油状物中加入丙酮 (100 m1)，室温搅拌 0．5 h。冰水冷却至 一5～0℃， 搅拌下缓慢滴加浓硫酸 (4．2 g，42 mmo1)，析出白 色固体。滴毕保温搅拌 3 h，10 rain内加热至回流 1 h，再 缓慢冷却 至室温。过滤，滤饼 用丙酮 (30 mlx2)洗涤，于 50℃减压干燥 3 h，得 白色固 体C(1 5．1 g，83．1％ )，mp l 79～ l 82℃。纯度 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010，41(5) 99．4％ (HPLC法：条件同有关物质 A)。ee值 98％ (条件同有关物质 A)，[ ] 55．4。(c 2，甲醇 )。 ESI—MS(m／z)：344[M+Na] ； H NMR(CDCI )6： 3．18(br S，2H，CH2)，3．746～ 3．753(m，2H，CH2)， 3．79(S，3H，CH3)，4．32(S，2H，CH2)，5．73(S，1H， CH)，6．82(d，J--5．0 Hz，1H，CH)，7．28(d，J=5．0 Hz， 1H，CH)，7．44～ 7．5 1(m，2H，CH~2)，7．58(d， J=5．0 Hz，1H，CH)，7．73(d，J=l0．0 Hz，1H，CH)； IR(KBr)v(cm )：1753．2，1048．5，584．4。 编者注：编辑部曾要求作者按照文献 [2】，对有 关物质 B用乙酸乙酯重结晶后再测mp值。但作者 实际操作发现回流条件下乙酸乙酯几乎不能溶解有 关物质 B，无法重结晶。 参考文献： [1] Schr6r K The basic pharmacology of ticlopidine and · 335 · clopidogrel[J]．Platelets，1993，4(5)：252—261． [2] 邹 江 ，迟晓巍 ，王龙山 ，等 ．硫酸氢氯吡格雷位置异构体 的合成 [J]．中国医药工业杂志 ，2010，41(1)：6-8． [3] Manne SR，Sajja E，Anumala R，et a1．Process for recovery of the S-(+)一methyl(2-chloropheny1)-(6,7·dihydro一4日． thieno[3,2一C]pyrid一5一y1)acetate hydrogen sulfate(clopidogrel bisulfate)from its(R)and mixture of(R)and( ．isomers： US，2005059696[P]．2005—03—17． [4] 申东升 ．经格 氏反应合成噻吩乙醇 的研 究 [J]．精细石油 化工 ，2001，(3)：30—32． [5] Badorc A，Frehel D．Dextro—rotatory enantioner of methyl alpha一5(4，5，6，7一tetrahydro(3，2-c)thieno pyridy1)(2一 chloropheny1)一acetate and the pharmaceutical compositions containing it：US，4847265[P]．1989-07-l1． [6] Alla VR，Vyakaranam KR，Sirigiri AK， a1．Process for preparation ofclopidogrel bisulfate form一1：US 20070191609 [P]．2007—08—16． 江苏华昌4t；X-股份有限公司始建于1970年，是一家以基础化工为主，精细化工、生物4~．z-并 举的现代化企业，是国家大型企业一一江苏华昌 (集团)有限公司的核心企业。公司经过三十多 年的长足发展，规模 目益壮大。1993年公司跨入 中国化工百强企业行列，2008年9月登陆A股资本 市场，上市交易。 目前公司新 区占地2200亩，拥有员-Y-3000余人，年产值超304L元。企业的主要 产品为合成氨、尿素、纯碱、氯化铵、精甲醇、复合肥、精细化工产品、生物化工产品和热电产 品。本公司产品远销东南亚，深受市场欢迎。 本公司生产的精细化工品主要有：硼氢化钠 译文名称：SODIUM BOROHYDRIDE CAS NO．：1 6940-66—2 含量：≥98％ 辨i曩：白色结晶粉 用途：硼氢化钠是一种良好的还原剂，它的特点是性能稳定，还原时有选择性。可用作醛类 酮类和酰氯类的还原剂，塑料的发泡剂，制造双氢链霉素的氢化剂，制造硼氢化钾的中间体 合成硼烷的原料 ，以及用于造纸工业和含汞污水的处理剂。 产麓：1000吨／年 色装：20KG~板桶／50KG铁桶 本公司生产的硼氢化钠规格指标和性能达到国际同类产品先进水平，价格优惠，欢迎选购。 。 赫誊 誊 i一 磐 。 _ I i0 z ≥ 。0 专毒誊 | 誊 参一 一筹 茹 誊 江苏华 留化工 股份 葡隰 公i回 生产地址：江苏扬子江国际化学工业园南海路1号 销售地址：江苏省张家港市人民中路36号福港大厦12B JIANGSU HUACHANG CIIEMICAI CO”LTD 邮编：215634 电话：0512—58699808 0512-58686806 传真：0512—58699960 E-mail：suzy xue@hotmail corn jennychemlcaI@IIve crl 网址：http：／／www huachangchem on 一 一 一 凄■ 一__ 。