抗真菌新药伏立康唑的合成工艺优化

1678. [ 12 ] 柘学军 , 何海霞 , 杨崇华 , 等. 盐酸氟桂利嗪胶囊人体相对生 物利用度研究 [J ] . 重庆医科大学学报 , 2001 , 26 (2) : 1422 150. (收稿日期 : 2010202205 ; 修回日期 : 2010202222) 抗真菌新药伏立康唑的合成工艺优化 佟丽华 , 王丽媛 , 李红钊 (佳木斯大学化学与药学院 , 黑龙江 佳木斯　154007) 摘要 : 目的 　优化伏立康唑的合成工艺。方法 　以 62乙基252氟242羟基嘧啶为原料 , 通过氯代、溴代、缩合、氢化 等反应及手性拆分方法制得了伏立康唑。结果 　伏立康唑的总收率为 2513 % , 远远高于文献报道的收率 (4 %) , 制得的伏立康唑经过重结晶得到色谱纯度 > 99 %的成品。结论 　本方法合成路线短 , 反应过程温和 , 产物收率较 高 , 产品纯度好 , 适于工业化生产。 关键词 : 伏立康唑 ; 抗真菌药 ; 合成工艺 中图分类号 : R91414 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 : 167222981 (2010) 0420280203 Synthesis of a novel antif ungal drug voriconazole TON G Li2hua , WAN G Li2yuan , L I Hong2zhao ( Col lege of Chemist ry and Pharmacy , J i am usi Uni versit y , J ia2 m usi Hei long j iang 154007) Abstract : Objective 　 To optimize the synthesis technology of voriconazole. Methods 　Using the 62 ethyl25 fluorine 242 hydroxyl pyrimidine as starting materials , af ter chlorization , bromination , condensation reaction , hydrogenation re2 action and then chiral separation , the product was obtained. Results 　The total yield was 2513 % , far more than 4 % , which was reported in the literature. After recrystallization , the purity of the finished product was higher than 99 %. Conclusion 　This route is short , with high yield and the reaction condition is mild. It is suitable for indust rial p roduc2 tion. Key words : voriconazole ; antifungal drug ; synthesis 　　伏立康唑 (voriconazole) 是 1 种新型的抗真菌药 , 为氟 康唑衍生物 , 在氟康唑的丙基结构上增加 1 个甲基后 , 增加 了其对目标酶的亲和力 ; 嘧啶环也增加了抗真菌的活性 ; 5 位上的氟能够增强体外活性 ; 2 R , 3 S2对映体是所有对映 体中最活跃的 [122 ] 。伏立康唑 IC50 仅为 01005 3μmol ·L - 1 , 说明其比同类的三唑类抗真菌药抗菌谱更广。临床上主要用 于治疗急性或慢性深部真菌感染。伏立康唑 [3 ]是由美国辉瑞 公司研制开发 , 并于 2002 年在美国首先上市 , 并相继在英、 德上市。由于其经济价值可观 , 国内外对其也有不少研究报 道 [426 ] 。但由于其合成过程操作复杂 , 有些反应过程较剧烈 , 收率不高等因素很难进行大规模生产。本方法对以上问题进 行了充分的分析研究 , 最终得到了 1 个优良的合成工艺。在 进行溴代反应时 , 采用乙酸乙酯代替二氯甲烷 , 可以有效提 高反应温度 , 使反应更容易进行 ; 采用不同的投料方式 , 避 免了反应物浓度过高而发生喷料现象 , 使整个反应温和进 行 , 而且大大缩短了反应时间。氢化反应过程采用乙醇代替 二氯甲烷 , 甲醇钠代替原来的氢氧化钠 , 这样不仅简化了操 作过程 , 更有效的降低了杂质含量。经过工艺优化后 , 整个 过程操作更加简单合理 , 产品总收率可达到 2513 % , 远远 高于文献报道的 4 %的收率 [7 ] 。 1 　仪器和试剂 恒温水浴锅 (巩义市予华仪器有限责任公司) ; 低温浴 槽 (上海医用仪表厂) ; YRT - 3 熔点测定仪 (天津大学精 密仪器厂) ; 岛津 LC - 10A 型液相色谱仪、岛津 GC - 14C 型气相色谱仪 (日本岛津) ; 硅胶薄层板 (德国 Merck 公 司) 。 二氯甲烷 ( DCM ) 、乙酸乙酯 ( EtAc ) 、四氢呋喃 ( T HF) 、乙醇 ( EtO H) 、丙酮 (Ac) 、甲醇 ( MeO H) 、异 丙醇 ( IPA) 、N2溴代丁二酰亚胺 ( NBS) 、偶氮二异丁腈 (A IBN) (天津科密欧试剂公司 , 分析纯或者化学纯) 。R2 (2) 2102樟脑磺酸 (江西飞祥化工有限公司) , 其他原料药为 自制。 　　作者简介 : 佟丽华 , 女 , 教授 , 硕士研究生导师 , 主要从事药物化学研究 , Tel :13417763442 , E2mail : wanglixue12 @1261com 082 Cent ral Sout h Pharmacy. April 2010 , Vol18 No1 4 　中南药学 2010 年 4 月第 8 卷第 4 期 2 　方法 211 　合成路线 图 1 　合成路线 Fig 1 　Synt hetic route 212 　实验操作 21211 　42氯262乙基252氟嘧啶的合成 　向 250 mL 三颈瓶中 加入 62乙基252氟242羟基嘧啶 20 g , 二氯甲烷 60 mL 及三乙胺 1412 g , 再在 3 h 内向该混合物中慢慢加入三氯氧磷 2316 g , 保持此过程中温度 < 40 ℃。混合物在加热条件下回流 5 h。 冷却至 25 ℃, 小心的用 88 mL 3 mol ·L - 1盐酸溶液终止反 应 , 此操作过程中保持温度 < 20 ℃。静置 , 溶液分层 , 水 层用二氯甲烷 50 mL 萃取 , 二氯甲烷萃取液用水洗涤。无 水硫酸钠干燥 , 减压浓缩有机层 , 得油状产品 2114 g。 21212 　62 (12溴乙基) 242氯252氟嘧啶的合成 　在 500 mL 三颈瓶中 , 将 42氯262乙基252氟嘧啶 22 g , 偶氮二异丁腈 1 g 及乙酸乙酯 120 mL 搅拌加热 , 将 N2溴代丁二酰亚胺 27 g 分 3 次加入其中 , 回流 5 h。将混合物冷却至 25 ℃, 加水 130 mL 。静置 , 溶液分层 , 水层用二氯甲烷 80 mL 萃取 2 遍。合并萃取液 , 用 2 %焦亚硫酸钠溶液洗涤 , 无水硫酸钠 干燥 , 减压浓缩二氯甲烷溶液 , 得油状产品 3117 g。 21213 　32 (42氯252氟嘧啶262基) 222 ( 2 , 42二氟苯基) 212 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 丁222醇盐酸盐的合成 　在 250 mL 三颈瓶中 , 充氮气条件下 , 将锌粉 1913 g 及四氢呋喃 53 mL 组成的混合物加热回流 3 h。将混合物冷却至 25 ℃, 继续搅拌 16 h。将碘 7142 g 溶于 21 mL 四氢呋喃溶液中 , 在 80 min 内将其加入混合物中 , 加入过程中使之升温至 45 ℃。然后再将混合物冷却至 0～ - 5 ℃, 向其中加入 122 , 42二氟苯基222 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 乙酮 6153 g 及 62 (12溴乙基) 242氯252氟嘧啶 7101 g , 加入过程中保持反应温 度 < 5 ℃。将混合物加热至 25 ℃, 加入冰醋酸和水。倾析 分离出固体金属残渣 , 剩余溶液减压蒸馏。加入乙酸乙酯 76 g , 继续蒸馏除去 165 mL 溶剂。冷却混合物 , 用乙酸乙酯 84 mL 萃取 2 遍 , 合并的萃取液用 30 mL 饱和食盐水洗涤。 将上述乙酸乙酯层浓缩至体积为 56 mL 。取盐酸 112 g 加入到 6 mL 异丙醇中 , 于 25 ℃下将其加入到乙酸乙酯层 , 析出晶体。滤集产品 , 用乙酸乙酯洗涤 , 干燥 , 得产品 : 32 (42氯252氟嘧啶262基) 222 (2 , 42二氟苯基) 212 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 丁222醇盐酸盐 14 g , 纯度为 98 % , 熔点为 180 ℃。 21214 　 (2R , 3S/ 2S , 3R) 222 (2 , 42二氟苯基) 232 (52氟 嘧啶242基) 21 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 22丁醇的合成 　在 500 mL 三颈瓶中加入 32 (42氯252氟嘧啶262基) 222 (2 , 42二 氟苯基) 212 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 丁222醇盐酸盐 2615 g , 乙醇 270 mL , 甲醇钠 314 g , 搅拌均匀 , 加水 18315 mL 进 行洗涤 [829 ] 。减压浓缩得一油状物。将其溶于 134 mL 乙醇 中 , 加入乙酸钠 8 g 和 5 %钯2炭 3134 g , 通入氢气 , 在 25 ℃搅拌 , 直至反应完成。滤除催化剂 , 滤液浓缩至 51 mL 。加入二氯甲烷和水各 152 mL , 充分搅拌 , 溶液分层 , 水层以二氯甲烷 80 mL 萃取 3 遍 , 合并有机层 , 减压浓缩。 加入异丙醇 70 mL , 再浓缩至 62 mL 。混合物在 20 ℃下粒 化 3 h , 过滤得产品 (2R , 3S/ 2S , 3R) 222 (2 , 42二氟苯 基) 232 (52氟嘧啶242基) 21 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 22丁 醇 22 g , 纯度为 96 % , 熔点为 128 ℃。 21215 　 ( 2R , 3S) 222 (2 , 42二氟苯基) 232 (52氟嘧啶242 基) 212 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 22丁醇的拆分 　在 500 mL 三颈瓶中 , 将“21214”中得到的化合物 12 g 溶解到 120 mL 丙酮溶液中 , 加入含 R2 (2) 2102樟脑磺酸 8 g 的 100 mL 甲醇溶液 , 加热回流 , 直至得到一均相溶液。将溶液冷却至 20 ℃, 过夜粒化 , 析出固体 , 过滤 , 滤饼用 9135 g 丙酮洗 涤 , 干燥 , 得 (2R , 3S) 222 (2 , 42二氟苯基) 232 (52氟嘧 啶242基) 212 (1 H21 , 2 , 42三唑212基) 22丁醇 R2 (2) 2102樟 脑磺酸盐 [10 ] 。 上述樟脑磺酸盐 17 g 用二氯甲烷 6115 mL 及水 6115 mL 溶解 [11 ] , 滴加 40 %氢氧化钠溶液 215 mL 调节 p H 至 11 , 溶液分层 , 水层以二氯甲烷萃取 , 合并有机层 , 以水洗涤 , 过滤 , 减压蒸除溶剂 , 加入异丙醇 30 mL , 继续蒸馏至体积 为 22 mL 。0 ℃下 , 放置 , 析出晶体 , 过滤 , 滤饼以 4 mL 异丙醇洗涤 2 遍 , 得白色固体 418 g , 熔点 127 ℃。 3 　结果 本实验以 62乙基252氟242羟基嘧啶为原料 , 通过氯代、 溴代、缩合、氢化及手性拆分 , 制得伏立康唑。总收率 2513 % , 纯度 > 99 % , 比旋度为 - 58°～ - 63°。由于路线 短 , 反应温和 , 收率高 , 产品纯度好 , 非常适于工业化生 产。元素分析 : C16 H14 F3 N5 O。测定值 ( w , %) (括号内为 计算值 ) : C 55101 ( 55105 ) , H 4104 ( 4102 ) , F 16132 (16131 ) , N 20105 ( 20108 ) , O 4158 ( 4154 ) 。HNMR (DMSO2d6) : 9107 ( s , 1 H ) ; 8185 ( s , 1 H ) ; 8123 ( s , 1 H) ; 7165 ( s , 1 H ) ; 7132 ( d , 1 H ) ; 7115 ( d , 1 H ) ; 6102 (s , 1 H) ; 4181 ( d , 1 H) ; 4134 (d , 1 H) ; 3192 ( q , 1 H) ; 1110 (d , 3 H) 。 4 　讨论 溴代反应 , 用乙酸乙酯代替二氯甲烷 , 由于乙酸乙酯沸 点较二氯甲烷的沸点高 , 所以使得整个体系的反应温度得到 提高 , 从而更有利于反应的进行。由于溴代过程反应剧烈 , 所以将溴代剂分 3 次加入其中 , 使反应能够温和进行而不至 182 中南药学 2010 年 4 月第 8 卷第 4 期　Cent ral Sout h Pharmacy. April 2010 , Vol1 8 No14 于喷料。氢化反应过程采用乙醇代替二氯甲烷 , 使整个反应 过程只使用一种溶剂 , 简化了操作过程 ; 甲醇钠代替氢氧化 钠 , 不仅因为甲醇钠的碱性强于氢氧化钠 , 而且甲醇钠较氢 氧化钠更易溶于乙醇 , 从而更有效的降低了杂质含量。经过 工艺优化后 , 实验操作更加简单合理 , 收率更高。 最终产品在中山大学测试中心进行了检测 , 已确认其为 目标产物。 参考文献 [ 1 ] Ray SJ , Richardon k , Triazole antifungal agent s [ P ] . EP 0440372 , 1991208207 (CA1991 , 115 : 2562213) . [ 2 ] Bergmann , Ernst D. Organic flrorine compounds XI. Et hyl fluoroacetoacetates and fluoropyrimidines [ J ] . J Chem Soc , 1959 () : 327823285. [ 3 ] Mike Butters , Tulie Ebbs , Stuarf P , et al . Process develop2 ment of voriconazole : a novel broad2spect rum t rizole antifungal agent [J ] . Org Pro Res Devel , 2001 , 5 (1) : 28236. [ 4 ] 张文更. 制备三唑类抗真菌药物的方法 [ P ] . CN 1488630 ,2004204214.[5 ] 王英. 伏立康唑合成及工艺过程中有机残留溶剂检测方法的研究 [ D] . 2005205212.[ 6 ] 王英 , 顾军. 伏立康唑抗致病真菌的研究进展 [ M ] . 国外医学2皮肤性病学分册 , 2002 , 28 (4) : 2052207.[ 7 ] 王思袭. SIPI24678 和伏立康唑的合成 [ D] . 2006206.[ 8 ] 张文祥. 制备伏立康唑的方法 [ P ] . CN 1473825 , 2004202211.[ 9 ] 黄维宣 , 崔东冬 , 郭金华. 一种制备伏立康唑的新方法 [ P ] .CN 1814597 , 2006208209.[ 10 ] 周华明 , 周英. 伏立康唑及其药用盐、中间体的一种新定向合成制备方法 [ P] . CN 1919846 , 2007202228.[ 11 ] 王玉成 , 辜顺林. 伏立康唑衍生物及其制备方法 [ P ] .100999518 , 2007207218.(收稿日期 : 2009212207 ; 修回日期 : 2009212228) HPLC2MS/ MS 法测定人血浆中安非他酮及其 代谢产物 42O H2安非他酮的浓度 张清1 , 陈豪2 , 王晋朝2 , 陈尧2 , 谭志荣2 3 (1. 长沙市中心医院药剂科 , 长沙　410004 ; 2. 中南大学临床药理研究 所 , 长沙　410078) 摘要 : 目的 　建立 HPLC2MS/ MS 法同时测定人血浆中的安非他酮及其代谢产物 42O H2安非他酮的浓度。方法 　血 浆样品经乙腈沉淀蛋白后 , 采用 Hypurity C18柱 (150 mm ×211 mm , 5μm) 以乙腈2011 %甲酸210 mmol ·L - 1甲酸 铵缓冲液 (65 ∶10 ∶25) 为流动相 , 流速为 012 mL ·min - 1 , 通过电喷雾离子化离子阱质谱 , 以二级质谱选择离 子反应监测 (SRM) 方式进行检测。结果 　安非他酮线性范围为 11172～1 200 ng ·mL - 1 , 42O H2安非他酮线性 范围为 0142～430 ng ·mL - 1 , 安非他酮和 42O H2安非他酮最低检测浓度分别低于 110 ng ·mL - 1和 0121 ng · mL - 1 。结论 　本法特异性强、灵敏度高 , 操作简便快速 , 测定结果可靠 , 可以准确地测定人体血浆安非他酮和 42 O H2安非他酮的浓度。 关键词 : 高效液相色谱串联质谱 ; 安非他酮 ; 42O H2安非他酮 ; 电喷雾 ; 药物代谢动力学 中图分类号 : R96911 , R92712 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 : 167222981 (2010) 0420282204 Determination of amfebutamone and its metabolite 42OH amfebutamone in human plasma by HPLC2MS/ MS ZHAN G Qing1 , CH EN Hao2 , WAN G Jin2chao2 , CH EN Yao2 , TAN Zhi2rong2 3 (1. Department of Pharmacy , Changsha Cent ral Hos pital , Changsha 410004 ; 2 . I nsti tute of Clinical Pharmacology , Cent ral S outh Uninversit y , Changsha 410078) Abstract : Objective 　 To establish an HPLC2MS/ MS method for the simultaneous determination of amfebutamone and 42O H2amfebutamone in human plasma. Methods 　After p recipitation with acetonit rile , plasma sample was separated on a Hypurity C18 column ( 150 mm ×211 mm , 5μm ) , with acetonit rile2011 % formate acid 210 mmol ·L - 1 ammoni2 　　作者简介 : 张清 , 女 , 主管药师 , 主要从事临床药学研究 , Tel : (0731) 85668011 , 13787792680 , E2mail : zhut1123 @1631com 　　3 通讯作者 : 谭志荣 , 男 , 博士 , 主要从事药物分析与临床药物动力学研究 , Tel : (0731) 84805380 , E2mail : tanzr @1631com 282 Cent ral Sout h Pharmacy. April 2010 , Vol18 No1 4 　中南药学 2010 年 4 月第 8 卷第 4 期