CK-19检测在乳腺癌前哨淋巴结微转移诊断中的价值

! 山东省卫生厅科研基金资助项目"#$$%&’%(&’#) 作者单位*山东省千佛山医院+山东济南 #,$$%- &./%0检测在乳腺癌前哨淋巴结微转移 诊断中的价值! 付荣湛 阮长乐 于学智 曹莉莉 孙 青 顾 禾 张丽丽 1摘要2 目的 探讨角蛋白/%0".345678/%0+&./%0)检测在乳腺癌前哨淋巴结"9:;)微转移诊断中的价值< 方法 采用亚甲蓝生物染色的方法对 --例=>?期乳腺癌患者的 9:;进行活检+均行冰冻病理切片>石蜡切片 "9@染色)检查A采用逆转录聚合酶链反应"BC/D&B)技术进行 &./%0检测<结果 9:;冰冻病理切片>石蜡切 片示癌转移率分别为 %,E0%F"GH--)>%IE%IF"IH--)A&./%0检测的阳性表达率为 J-E$0F"%,H--)<其中+冰冻 和石蜡切片阳性的 9:;中 &./%0均阳性表达<&./%0在 9:;中的阳性表达率明显高于其冰冻及石蜡病理切片 阳性率"KL$E$,)<结论 &./%0检测能提高乳腺癌 9:;微转移的检出率+降低其假阴性率< 1关键词2 乳腺癌 前哨淋巴结 微转移 角蛋白/%0 1MNOPQRSP2 TNUVSPWXV CY3Z5[\5636]3Z5[\3Y^ _345678/%0‘B;’ 3a5‘78567Y878‘7b4Y‘365c65c3cY^ c386783[[d‘e]8Yf3c"9:;)Y^g435c6b54b78Y‘5EhVPijkO l8m$g435c6b58b34e567386c+‘36]d[383g[\3n5c\c3f 6Y[Yb5636]39:;cE9:; n5cc\bb3cc^\[[d7f3867^73f78--Y^ 6]3m$b5c3cEo3c7f36]34Y\6783e56]Y[Yp7b5[ 3a5‘78567Y8+3ae43cc7Y8Y^ &./%0‘B;’n5cf363b63f\c78p43Z34c36458cb47e5c3/eY[d‘345c3b]578435b67Y8"BC/ D&B)783Z34d9:; 78--b5c3cn]Yc39:; n5cc\bb3cc^\[[d7f3867^73fEqVOrsPO l8IY^ 6]3--b5c3c+9:; ‘365c65c3cn5cf363b63fgdgY6]4Y\6783e56]Y[Yp7b5[t@c657878p58f&./%0BC/D&BEC]33ae43cc7Y8Y^&./%0 n5ceYc767Z378GY^ 6]343‘57878pJm9:;EujvSsrOWjvO C]3&./%0BC/D&B‘36]Yf7c‘Y43c38c767Z36]58 4Y\6783e56]Y[Yp7b5[‘36]Yf Y^4f363b67Y8Y^‘7b4Y‘365c65c3c789:;EC]7c83n‘36]Yf7cg3663478f7^^3438675678p g435c6b58b34e567386c5647c_ Y^4‘7b4Y‘365c65c3c6]586]Yc3n76]83p567Z39:;63c63fgd4Y\6783e56]Y[Yp7b5[ ‘36]YfE 1wVxyjQkO2 z5‘‘54d83Ye[5c‘ 9386783[[d‘e]8Yf3 z7b4Y‘365c65c3c .345678/%0‘B;’ 1中图分类号2 BGJGE0 1文献标识码2 ’ 前哨淋巴结"9386783[[d‘e]8Yf3+9:;)是指最 先接受来自肿瘤淋巴引流的第一淋巴结<%00-年 {7\[758Y等引用 9:;的概念+首创了乳腺癌术中淋 巴 结 定 位 ":d‘e]567b‘5ee78p)和 9:; 活 检 "9:;()+使许多无腋淋巴结转移的=>?期乳腺癌 患者避免了不必要的腋淋巴清除术+鉴于 9:;(存 在假阴性+%000年 -月至 #$$%年 m月+我们采用逆 转录聚合酶链反应"BC/D&B)技术对 --例乳腺癌患 者的 9:;进行了角蛋白/%0"&./%0)检测+旨在探讨 其诊断乳腺癌 9:;微转移的价值< | 资料与方法 %E% 一般资料 本组 --例乳腺癌患者均为女性+ 年龄 J-}G#岁<临床分期为 C%}C#;$};%z$+其中 肿瘤原发灶位于乳腺外上象限 #$例+外下象限 %# 例+乳晕区 G例+内上象限 ,例<肿瘤直径 $E,} -E$b‘<病理示浸润性导管癌 ##例+浸润小叶癌 %% 例+髓样癌 m例+腺癌 J例+腺样囊性癌 %例+富于脂 质癌 %例< %E# 方法 手术切除乳腺癌原发灶+部分置于~ IJ!低温冰箱保存+待行BC/D&B检测&./%0<余作 快速冰冻病理+证实为乳腺癌<9:;取材*于肿瘤周 围皮下及乳晕周围皮下分别注射亚甲蓝各 %$‘[<%$ 分钟后于腋窝胸壁侧切一横行刀口+腋下沿蓝染的 淋巴管找到蓝染的 %}#枚淋巴结"即 9:;)<将每枚 9:;分为两部分+%H#送快速冰冻病理检查+另 %H# 放~IJ!低温冰箱保存+待检测 &./%0<--例无论 9:;诊断结果如何+均行腋窝淋巴结清除术+术后每 枚腋淋巴结"包括 9:;)均作石蜡切片行病理检查< %EJ &./%0检测 对 --个原发灶及 ,J个 9:;"0 例为 #个 9:;)行 B;’提取*在 -!条件下+将标本 置于冰浴中的乳钵中+用剪刀剪碎+加入 %E$‘[ 0 #$$,年第 -,卷第 I期山东医药 万方数据 !"#$%&研磨致均质’匀浆离心(沉淀()*+,保存备 用’引物序列参照叶芳耘合成-./’012.3456758 9:2;<<=<<;==>><>=>><<<>;2?:(@6=#7567589:2;=>==>>=2 <=>>>=><;<>;2?:(长度 AB+CDEF2;>=#64567589:2>;>=<2 =<==<<><;=>;<<=2?:(@6=#7567589:2=>;=>;>>;==<<>;;=2 <;<2?:(长度 .9ACD’G!2H0G反应体系购自!;1;G; 公司(G!反应条件参考试剂盒说明书制定’扩增产 物检测8应用 .I9J @<;"%75胶进行电泳分析(将扩 增产物与 KLM+++分子量 N@G1OG同时上机(P+ 伏电泳 .9QM+分钟(在 RS;<5"!N MM++上观察结 果’在凝胶电泳中出现 .9ACD的电泳条带时(为 F2 ;>=#6基因SGT@表达阳性E出现 .9ACD和 AB+CD的 电泳条带时(为 F2;>=#6基因和 012.3SGT@表达阳 性E未出现 .9ACD的电泳条带时的标本为假阴性(应 重作 G!2H0G或更换标本’ .IA 4LT转移诊断标准 4LT有无转移以腋窝淋 巴结石蜡切片诊断为标准(石蜡切片发现任何一枚 腋淋巴结阳性转移癌均视为 4LT阳性转移(与此相 符合的 4LT的 012.3检测U冰冻切片或石蜡切片结 果为真阳性(否则为假阴性E石蜡切片包括 4LT在 内的所有腋淋巴结均表现为阴性癌转移(则视为 4LT癌转移阴性(与此相符合的 4LT的 012.3检 测U冰冻切片的阴性表达为真阴性(否则为假阳性’ V 结果 本组 AA例中原发灶 012.3阳性表达 AM例(阴 性表达M例’冰冻病理检查4LT癌转移阳性*例(无 假阳性E阴性 ?*例(其中假阴性 M例’石蜡切片 4LT 癌转移阳性 P例E阴性 ?B例(其中假阴性 .例’012 .3在 4LT中阳性表达 .9例(其中假阳性 B例E阴性 表达 M3例(无假阴性表达’4LT石蜡切片阳性者 012.3均阳性表达’012.3在 4LT中的阳性表达率 W.9XAAY明显高于其冰冻W*XAAY和石蜡切片阳性率 WPXAAY(Z均[+I+9’ \ 讨论 乳腺癌 4LT检测方法包括生物染料着色技术 和放射性同位素标记示踪技术’其中前者较为经济( 但不能体表定位(比较费时(手术医师需要经过系统 培训和经验积累方能达到较高的4LT检出率’4;"]# 等-M/报道 9P例采用生物染料技术者 4LT的检出率 是 PAJ’ 近年来(4LT活检冰冻病理切片技术判断乳腺 癌病理分期(并决定是否行腋淋巴清扫术广泛应用 于临床’但是 4LT术中冰冻切片和石蜡切片苏木精 ^伊红W_OY染色存在一定的假阴性率’许多研究表 明(3JQ?+J乳腺癌腋淋巴结存在常规病理检查无 法检测到的微转移灶-?Q9/’ 细胞角蛋白是上皮细胞骨架的组成成分’012.3 是最常见的角蛋白之一(只存在于癌组织及癌起源 的上皮组织(在肿瘤细胞中含量丰富’其主要分布在 单层上皮(并在乳腺癌中有较高表达-B/’012.3在间 叶组织如正常的淋巴结U骨髓及外周血中不表达-*/’ 因此(如果在 4LT中检测到 012.3表达则表明有乳 腺癌的微转移’分子生物的发展(尤其是G!2H0G技 术为乳腺癌 4LT微转移的检测提供了敏感和特异 的方法’本研究结果显示(乳腺癌 4LT中微转移现 象较常见(仅凭其术中冰冻病理切片阴性就放弃腋 淋巴清扫术(易致肿瘤切除不彻底’ 本组 .例 4LT冰冻切片和石蜡切片 4O染色均 阴性(但是石蜡切片中 4LT以外的 .枚淋巴结阳性 转移(通常称为‘跳跃转移a(该病例 4LT012.3阳 性表达’因此笔者认为可能还存在‘路过转移a(也就 是说癌细胞通过 4LT转移到下一站淋巴结(而没有 在 4LT中增殖’这种现象用普通的病理方法通常无 法检测(012.3的 G!2H0G检测有可能解决这一问 ’ 对所有淋巴结均进行分子生物学检测(虽然可 提高乳腺癌分期的准确性(但是给临床操作带来极 大的不便’因乳腺癌淋巴转移首先到达 4LT(对普通 病理腋淋巴结转移阴性的乳腺癌(012.3检测不仅 可更准确的证实乳腺癌有无腋淋巴结转移(同时将 烦琐的实验集中在 .Q?枚淋巴结(临床可操作性 好’ b 参考文献 .I叶芳耘(张乐之(郑成竹(等I淋巴结 12.3SGT@检测在诊断乳腺 癌微转移灶中的应用I上海医学检验杂志(M+++(.9W.Y8M+QM.I MI4;"]#@(4D#5<&5"O(0%&;6]"5;c(5=;&I!d5C565e#=%ef7#6<=g% =5>d6#hf57e%"756=#65&&iSDd6%]5S;DD#6<#6C"5;7=>;6>5"I@S 4f"<(M++M(BPW.Y8MAQMPI ?IT%d#N(1;=5jT(N#i;$;k#RIK#;<6%7#7%e;l#&&;"i&iSDd6%]5 S5=;7=;757#6D;=#56=7g#=dC"5;7=>;6>5"Im"5;7=0;6>5"G57!"5;=( .33B(A+8MP?QM3?I AIn"5;<5"@c(n5#7#6<5"1GIR6=";%D5";=#j55j;&f;=#%6%e756=#65& &iSDd6%]57e%"C"5;7=>;">#6%S;8>f""56=S5=d%]%&%<#57I@]j @6;=H;=d%&(M++M(3WAY8M??QM?AI 9I0"5;<5"@c(n5#7#6<5"1G(4d#j5"4@(5=;&IR6=";%D5";=#j5 5j;&f;=#%6%e756=#65&&iSDd6%]57e%"S5=;7=;=#>C"5;7=>;">#6%S; Ci#SD"#6=>i=%&%#C&5;6] d#=#%6%e=d5C"%;]7D5>="fS5D#=d7&#;&S;"k5" k5";=#6.3#6"%f=#65>;6>5"]#;<6%7#7I_#7=%D;=d%&%/*+9"?$-:,+(@AAB( BCD@BEFG@BF@" HCIIEJI@J@C收稿K 作者单位D聊城市第二人民医院(山东临清 CECFII L经验交流L 改良皮下注射法注射低分子肝素钙效果观察 孙 莹 低分子肝素钙是治疗冠脉综合征的常用药物M其腹部皮 下注射药效持续时间长N副作用小O但注射局部易出现皮下出 血N瘀血(甚至皮下血肿(可引起局部疼痛MCIIP年 @GB月( 我们对注射方法进行了改进(并用于 FI例冠心病患者(获得 满意效果M现

报告

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如下M 临床资料D观察对象为 @@F例冠心病患者(其中男 FF例( 女 EI例O年龄 P@G!FHE@Q@PK岁M不稳定型心绞痛 BB例(急 性心肌梗死 CB例H其中 @B例行经皮冠状动脉腔内成形加支 架术KM血小板凝血指标结果均在正常范围M将 @@F例患者随 机分为观察组及对照组M观察组 FI例(男 PR例(女 CF例O年 龄 P@G!IHE@Q@@K岁O其中不稳定型心绞痛 RF例(急性心肌 梗死 @R例M对照组 EF例(男 PC例(女 CR例O年龄 PPG!FHE@ Q@CK岁O其中不稳定型心绞痛 RC例(急性心肌梗死 @R例M两 组年龄N性别及基础疾病分布无统计学差异HSTI"IEKM均 皮下注射低分子肝素钙(每 @C小时 @次(两组均注射 RII次M 注射方法D对照组采用传统注射法(即注射点为脐周上N 下两侧(两注射点相距 C:/U次(注射时左手绷紧注射部位皮 肤(右手持注射器(食指固定针栓(针头斜面向上(使之与皮肤 呈 PIGRIV角刺入针头H一次性 @/0注射器K的 CUP(回抽无回 血注入药液M拔针后中等用力(用棉签压迫注射点 CGP分钟M 观察组采用改良注射法(注射部位为腹壁脐周左右两侧(注射 时以左手拇指和食指捏起皮肤(形成隆起皱褶(右手持注射器 紧贴皮肤(垂直进针刺入针头 @UCH一次性 @/0注射器(并根 据腹壁厚度决定注射深度K(每次注射点相距 C:/O拔针后注 射局部不用棉签压迫M 效果评价方法D患者于每次注射后填写疼痛程度

问卷

关于教学调查问卷关于员工内部调查问卷员工内部调查问卷基药满意度调查问卷论文问卷调查格式

表( 参照国际常用疼痛评分法H马克盖尔法K将疼痛程度分为轻N 中N重度(无痛N有轻微疼痛为轻度O疼痛较剧烈为中度O剧烈 疼痛为重度M注射后 @小时用直尺测量注射部位肿胀N瘀血范 围O瘀斑直径W@:/为轻度N@GC:/为中度NTC:/为重度M 采用 #4=43分析进行统计学处理M 结果D两组注射后疼痛程度比较见表 @(瘀血情况见表 CM 表 @ 两组疼痛程度比较 组别 - 轻度 - X 中度 - X 重度 - X 合计 - X 对照组 观察组 RII RII P@ !"!E @A R"!EY CP E"!E @C P"IIY @B R"EI C I"EIY !C @B"II PP B"CEY 注D与对照组比较(YSWI"I@ 表 C 两组瘀血程度比较 组别 - 轻度 - X 中度 - X 重度 - X 合计 - X 对照组 观察组 RII RII PE B"!P @! R"CEY CE F"CE @P P"CEY C@ E"CE @ I"RIY B@ CI"CE P@ !"!EY 注D与对照组比较(YSWI"I@ 讨论D低分子肝素钙是一种抗凝N抗栓药物(其皮下注射 引起的局部出血及疼痛与药物浓度N注射方法N拔针后局部是 否按压有关M且腹部皮下为疏松结构组织(皮下脂肪厚(出血 自限性差(常规皮下注射法斜刺进针(损伤组织较多(针头刺 入血管机率高(脐周上N下两侧注射(难以提起腹部皮肤形成 皱褶(深浅难以掌握(易损伤腹膜H刺入过深或患者过瘦KM拔 针后压迫穿刺点用力不均(极易造成毛细血管破裂(不能有效 地压迫止血O改良法直刺进针时组织损伤少(故疼痛轻N无出 血或出血少(无瘀斑M脐周左右两侧注射(可提起腹壁皮肤(使 之形成一皱褶(针头垂直刺入提起皮肤皱褶内(不易损伤腹 膜M我们体会(注射时应避免腕部用力进针过深O避免用力挤 压(注射后忌热敷(应密切观察局部出血情况N全身系统出血 倾向及其他不良反应M HCIIRJ@CJIA收稿K @@ CIIE年第 RE卷第 B期山东医药 万方数据 CK-19检测在乳腺癌前哨淋巴结微转移诊断中的价值 作者： 付荣湛， 阮长乐， 于学智， 曹莉莉， 孙青， 顾禾， 张丽丽 作者单位： 山东省千佛山医院,山东,济南,250014 刊名： 山东医药 英文刊名： SHANDONG MEDICAL JOURNAL 年，卷(期)： 2005，45(8) 被引用次数： 3次 参考文献(7条) 1.叶芳耘.张乐之.郑成竹 淋巴结K-19mRNA检测在诊断乳腺癌微转移灶中的应用[期刊

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]-上海医学检验杂志 2000(01) 2.Sardi A.Spiegler E.Colandrea J The benefit of using two techniques for sentinel lymph node mapping in breast cancer 2002 3.Noguchi M.Katev N.Miyazaki I Diagnosis of axillary lymph node metastases in patients with breast cancer 1996 4.Greager AJ.Geisinger KR Intraoperative evaluation of sentinel lymph nodes for breast carcinoma:current methodologies 2002 5.Creager AJ.Geisinger KR.Shiver SA Intraoperative evaluation of sentinel lymph nodes for metastatic breast carcinoma by imprint cytology 2002(11) 6.Kwspen FHI.Smedts FMM.Broos A Reproducible and highly sensitive detection of the broad spectrum epithslial marker keratin 19 in routine cancer diagnosis 1997 7.Raj GV.Moreno JG.Gomella LG Utilization of polymerase chain reaction technology in the detection of solid tumors 1998 相似文献(10条) 1.期刊论文 白月奎.张保宁.杨红鹰.刘秀云.孙耘田 乳腺癌前哨淋巴结临床病理的研究 -实用癌症杂志2001,16(2) 目的探讨乳腺癌前哨淋巴结能否准确反映腋窝淋巴结转移情况.方法对36例早期乳腺癌,常规HE染色检测腋窝淋巴结,对HE染色阴性的前哨淋巴结及所 属非前哨淋巴结,连续切片、免疫组化染色,检测其肿瘤的转移情况.结果常规病理检测,36例中,10例腋窝有转移,其中2例仅前哨淋巴结有肿瘤转移.连续 切片、免疫组化检测26例阴性的前哨淋巴结共61枚,非前哨淋巴结406枚,2例(2枚)仅前哨淋巴结发现有肿瘤转移,余24例前哨淋巴结及非前哨淋巴结均无 肿瘤转移,HE染色的检测阴性的前哨淋巴结患者假阴性率为7.7%(2/26).结论早期乳腺癌前哨淋巴结可以准确反映腋窝淋巴结转移情况. 2.期刊论文 左晓明.林晓燕.孙海雯.张小君.吴赟.方红 乳腺癌前哨淋巴结微转移与非前哨淋巴结转移的关系 -宁 夏医科大学学报2009,31(4) 目的 探讨乳腺癌前哨淋巴结(SLN)微转移与非前哨淋巴结(nSLN)转移的关系,并分析其影响因素.方法 对86例乳腺癌患者采用美蓝染料法定位活检前 哨淋巴结,并用HE和CK19免疫组化法检测微转移灶.结果 本组SLN阳性检出率约80%,假阴性率7.4%(2/27);灵敏度89%(24/27);准确率96%(66/69).CK19免疫 组化法检测出微转移前哨淋巴结9例,共12枚.检出率为20%(9/45).SLN微转移与nSLN的转移无明显相关(P=0.127,P>0.05),而发生微转移的前哨淋巴结的数 量和微转移灶的大小与nSLN的转移有关.结论 染料法定位SLN、CK19免疫组化法检测微转移灶简便可行,微转移的SLN数目≥2和微转移灶直径>1mm可能对 nSLN的转移具有明显的提示作用. 3.期刊论文 罗开.于泽平.王震龙.吴波.黎介寿.LUO Kai.YU Ze-ping.WANG Zhen-long.WU Bo.LI Jie-shou 新辅助 化疗对可手术乳腺癌前哨淋巴结病理结果的影响 -医学研究生学报2007,20(8) 目的:研究新辅助化疗后乳腺癌前哨淋巴结活检结果是否真实可靠.方法:60例乳腺癌患者手术前应用2～3个疗程的新辅助化疗;48例化疗方案采用 CEF(环磷酰氨60mg/m2,表柔比星70mg/m2,氟脲嘧啶60mg/m2),12例患者采用CET(环磷酰氨50mg/m2,表柔比星50mg/m2,多西紫杉醇75mg/m2).乳腺癌改良根 治术前取亚甲蓝2ml皮下均衡注射于肿瘤四周各个象限,切除的标本计数淋巴结总数和染蓝的淋巴结数,与大体标本同时作常规病理检查.结果:66例乳腺癌 患者中,60例前哨淋巴结染色成功(90.9%),平均检查前哨淋巴结数为1～5枚/例.8例在手术前肿瘤已局部切除的患者前哨淋巴结均染色成功.60例患者前哨 淋巴结癌转移阳性23例,其中同时腋窝淋巴结阳性15例,阴性8例.前哨淋巴结阴性的37例患者中,腋窝淋巴结阴性35例、阳性2例(前哨淋巴结假阴性占 5.4%),假阴性率为8%.48例采用CEF方案的患者,前哨淋巴结假阴性1例.12例采用CET方案的患者,前哨淋巴结假阴性1例.60例患者中58例前哨淋巴结准确地 预测了腋窝淋巴结转移状况.结论:采用CET或CEF方案新辅助化疗的乳腺癌患者,其前哨淋巴结检查的病理结果同样能准确地反映腋窝淋巴结的转移状况. 4.期刊论文 徐敏.刘琳.孙耘田.陈盛祖.XU Min.LIU Lin.SUN Yuntian.CHEN Shengzu 乳腺癌前哨淋巴结核素淋巴 显像和活检 -中华医学杂志(英文版)2002,115(8) 目的评价核素淋巴显像和γ线探测仪(γ探针法)定位前哨淋巴结(SLN)的临床价值,并评价HE染色和免疫组织化学分析(IHC)联合应用对淋巴结中微转 移灶检出的作用.方法我们对42名乳腺癌患者进行了前瞻性的研究.在肿瘤周围注射99Tcm-右旋糖酐之后,进行核素淋巴显像.在术中用手持γ探针对前哨 淋巴结进行定位切除,同时完整地切除腋窝淋巴结(ALN).所有切除的淋巴结都先进行常规的HE染色.对经过前哨淋巴结HE染色没有发现有转移的患者,再同 时进行HE染色和免疫组织化学分析(IHC).结果在42名乳腺癌患者中,定位并切除了39名患者的前哨淋巴结.根据前哨淋巴结的病理检查判断腋窝淋巴结状 况,其灵敏度、特异性及准确性分别为92.9%(13/14)、 100%(25/25)和97.4%(38/39).HE染色和免疫组织化学分析相结合发现了3个前哨淋巴结(2名患者 )中有微转移灶,而在相应的非前哨淋巴结(NSLN)中则没有发现微转移灶.结论核素淋巴显像和γ探针法能准确地定位乳腺癌的前哨淋巴结.HE染色和免疫 组织化学分析相结合可以提高乳腺癌前哨淋巴结中微转移灶的检出率.乳腺癌前哨淋巴结的病理检查不仅能反应腋窝淋巴结的情况,而且对乳腺癌的分期 与治疗有着重要的指导意义. 5.期刊论文 李大光.黄先河.皮洪涛 应用美蓝显示乳腺癌前哨淋巴结病理检查的意义 -现代医药卫生2005,21(24) 目的:研究乳腺癌前哨淋巴结病理检查的临床意义.方法:在乳腺癌根治性切除手术开始时将美蓝2ml注射于乳腺肿瘤区域,在切除标本中寻找蓝染的前 哨淋巴结以及未染色的淋巴结,均行HE染色病理检查.结果:34例乳腺癌患者中显示蓝染色的前哨淋巴结定位成功29例,成功率85.3%(29/34),前哨淋巴结癌 转移率58.6%(17/29),前哨淋巴结与非前哨淋巴结病理检查符合率96.6%(28/29),前哨淋巴结假阴性率3.4%(1/29).结论:乳腺癌前哨淋巴结检查对预测腋 窝淋巴结状态的可靠性尚有待进一步研究提高. 6.学位论文 黎剑 乳腺癌前哨淋巴结与非前哨淋巴结微小转移及免疫细胞的临床研究 2006 前哨淋巴结活检(SentinelLymphNodeBiopsy,SLNB)技术在当今乳腺癌治疗中起重要作用。前哨淋巴结(SentielLymphNode，SLN)是首先接受原发肿瘤 淋巴引流的淋巴结，也是最有可能发生转移的淋巴结。它的临床应用使得选择淋巴结转移阳性患者行腋窝淋巴结清扫 (AxillaryLymphNodesDissection，ALND)，而避免对淋巴结转移阴性患者行腋窝淋巴结清扫成为可能。对前哨淋巴结的详细检查，包括连续切片，免疫 组织化学染色，或基于PCR的分子生物学技术的检测可发现相当一部分为游离肿瘤细胞(IsolatedTumorCells，ITC)及微转移(Micrometastasis，MIC)。 这部分病人是否应该行腋窝淋巴结清扫，还存在争议。因此本研究将阐明是否有一些确定的参数壁如这些微小转移病灶的大小或其在淋巴结中的解剖位 置与下游非前哨淋巴结转移相关，这将为在前哨淋巴结出现微小转移病灶的情况下选择腋窝淋巴结清扫提供依据(研究目的一)。 而且SLN作为肿瘤抗原呈递细胞与肿瘤引流淋巴系统首先接触的淋巴结，SLNB为研究肿瘤引流淋巴系统提供一个理想模型。现在的免疫学研究表明 SLN在肿瘤引流淋巴结中起重要的免疫作用，其中包括重要的免疫监控作用。对比非前哨淋巴结，前哨淋巴结主要表现在抗原呈递细胞如树突状细胞发生 改变。因此SLN可能是研究与淋巴结转移发生相关的免疫学改变最适合的淋巴结。然而，转移的出现对这些结果的影响还不清楚。本文进一步比较研究乳 腺癌前哨淋巴结不同转移状态前哨与非前哨淋巴结的成熟树突状细胞的密度(研究目的二)。病人和方法研究对象来源于柏林RRK肿瘤外科医院乳腺癌前哨 淋巴结研究数据库(1994年-2004年)。 49例前哨淋巴结出现游离肿瘤细胞或微转移的乳腺癌患者纳入研究目的一。重新评估所有前哨淋巴结及非前哨淋巴结的病理染色切片以核实诊断 ，并记录病灶在淋巴结中的位置。患者所有相关的临床病理资料纳入计算与下游非前哨淋巴结出现转移相关危险因素的单因素分析(卡方检验)，单因素 分析证实有意义的因子进一步纳入多因素回归分析以寻找独立的相关因子。 79例符合研究标准的女性乳腺癌患者纳入研究目的二。根据前哨淋巴结的转移状况，分为三组。A组(28例)，所有淋巴结包括前哨与非前哨淋巴结均 无肿瘤细胞的证据；B组(25例)，仅微小肿瘤沉积出现于前哨淋巴结，来源于研究目的一病例，包括B1组(16例)，仅游离肿瘤细胞出现于前哨淋巴结 ；B2组(9例)，仅微转移出现于前哨淋巴结；C组(26例)，转移出现于前哨淋巴结，非前哨淋巴结有或无转移。所有前哨淋巴结及非前哨淋巴结均按前哨 淋巴结病理研究方案常规检查。首先随机从A，B1，B2组分别选择两对SLN与Non-SLN与DC-LAMP，CD68，CD123，FOXP3，行免疫组织化学反应以确定DC- LAMP对成熟DC的特异性染色及效果。所有前哨淋巴结及非前哨淋巴结蜡块切片均行与DC-LAMP抗体(BeckmanCoulter(R)France)免疫反应的免疫组织学检 查以确认成熟树突状细胞。蔡司图象分析系统(AxioImager,ZeissImagingSystems，Germany)定量分析每个淋巴结DC-LAMP阳性细胞的相对密度(DC- LAMP阳性细胞面积/淋巴结面积)。Wicoxon检验和Mann-Whitney检验分别用于DC-LAMP阳性细胞相对密度的组内和组间比较。与抗CD1a抗体 (Immunotech(R)，France)的免疫化学反应用于确定未成熟树突状细胞。 结果：研究目的一的49例患者中，20例前哨淋巴结为微转移，29例前哨淋巴结为游离肿瘤细胞；11例患者出现非前哨淋巴结转移 (11/49，22.4％)，其中5例(17.2％)前哨淋巴结为游离肿瘤细胞，6例(30％)前哨淋巴结为微转移(p=0.239)。多因素分析显示微小转移病灶的定位(淋巴 结实质vs淋巴窦或淋巴管道)(p=0.008)，pT分级(p=0.011)。微小转移出现在淋巴实质可确诊91％(10/11)出现非前哨淋巴结转移的患者。年龄，分化程 度，以及雌激素受体状态仪在单因素分析显示相关(p=0.036，0.042，0.019)。而淋巴管侵润，血管侵润，及微小病灶大小与非前哨淋巴结转移无相关。 研究目的二DC-LAMP阳性细胞相对密度的组内比较显示组A和组B前哨淋巴结DC-LAMP阳性细胞平均密度较非前哨淋巴结高(P=0.024，0.009)；组C前哨 淋巴结DC-LAMP阳性细胞平均密度与非前哨淋巴结比较无明显差异(P=0.107)。组间比较显示各组前哨淋巴结DC-LAMP阳性细胞平均密度无显著差异；而组 B(尤其组B2)非前哨淋巴结DC-LAMP阳性细胞平均密度较组A和组C显著升高(P=0.023，0.007)。淋巴结中CD1a阳性细胞与DC-LAMP阳性细胞的出现相关。而 CD68，CD123，FOXP3阳性细胞在前哨与非前哨淋巴结并无显著差别。 结论：本研究显示乳腺癌前哨淋巴结中微小转移病灶的定位(淋巴结实质vs淋巴窦或淋巴管道)较微小转移的大小与非前哨淋巴结转移有较好的相关 。这将简化乳腺癌患者SLN出现微小转移时选择腋窝淋巴结清扫的指征。 前哨淋巴结和非前哨淋巴结DC-LAMP阳性细胞平均密度在淋巴结肿转移形成过程发生改变，并在出现微转移状态时DC-LAMP阳性细胞平均密度增加显 著。揭示前哨淋巴结在肿瘤与引流淋巴结间相互作用中起重要作用。进一步的研究需要阐明DC-LAMP阳性细胞密度改变是肿瘤免疫抑制或肿瘤淋巴结转移 形成前的伴随现象。 7.期刊论文 江晨.董淑敏.孙远召.赵涛.张静.于彬.董焱 应用美蓝显示乳腺癌前哨淋巴结病理检查的意义 -中国临 床医学2003,10(2) 目的:研究乳腺癌前哨淋巴结病理检查的临床意义.方法:在乳腺癌根治性切除手术开始时将美蓝2ml注射于乳腺肿瘤区域,在切除标本中寻找蓝染的前 哨淋巴结以及未染色的淋巴结,均行HE染色病理检查.结果:64例乳腺癌患者中显示蓝染色的前哨淋巴结定位成功55例,成功率85.9%(55/64),前哨淋巴结癌 转移率为58.2%(32/55),前哨淋巴结与非前哨淋巴结病理检查符合率为96.4%(53/55),前哨淋巴结假阴性率为3.6%(2/55).结论:乳腺癌前哨淋巴结检查对 预测腋窝淋巴结状态的可靠性尚有待进一步研究提高. 8.期刊论文 何建军.任予.陈武科.任宏.党诚学.常东民.刘大鹏 经乳房切除切口鉴别乳腺癌前哨淋巴结的价值 -西 安医科大学学报2001,22(3) 目的探讨经乳房切除切口鉴别前哨淋巴结(SLN)的价值及预测腋窝淋巴结状态的准确性。方法按接受手术的先后顺序将72例病人分为经乳房切除切口 组(B组，36例)和腋窝切口组(A组，36例)，采用专利蓝(Patent blue violet)癌周注射鉴别乳腺癌前哨淋巴结。结果SLN鉴别成功率为 83％(60/72)，SLN有转移的18例中，唯一转移者6例(33.3％)，B组鉴别成功率94％(34/36)，预测腋淋巴结的准确性100％；A组鉴别成功率为 72％(26/36)，预测液淋巴结的准确性为100％。结论采用蓝染剂经乳房切除切口，比腋窝切口更能精确地鉴别前哨淋巴结，提高预测腋窝淋巴结状态的 准确性。 9.期刊论文 陆云飞.陈波.曾健.陈俊强.廖清华.林进令.林坚.LU Yun-fei.CHEN Bo.ZENG Jian.CHEN Jun-qiang. LIAO Qing-hua.Lin Jin-ling.LIN Jian 乳腺癌前哨淋巴结定位切除、微转移检测及其临床意义 -广西医学 2006,28(1) 目的探讨乳腺癌前哨淋巴结定位切除方法及检测淋巴结微转移的方法,并分析其临床意义.方法48例乳腺癌病人,采用专利蓝和锝99标记的大分子右旋 糖苷(99mTc-DX)为示踪剂行前哨淋巴结显像,术中先进行前哨淋巴结活检(SLNB),再行乳癌改良根治术或保乳手术,对其中20例病人的腋淋巴结进行微转移 检测,用免疫组织化学方法检测EMA、CK-19在淋巴结的表达,RT-PCR方法检测淋巴结中CK-19mRNA.所有数据用SPSS软件包进行分析.结果48例中有44例前哨 淋巴结成功显像,成功率91.7%,其中20例病人联合应用专利蓝和99mTc-DX两种方法定位前哨淋巴结,成功率100%.成功显像的44例病人共找到前哨淋巴结 (SLN)95个,病理检查发现转移率(阳性率)为37.9%(36/95);非前哨淋巴结(NSLN)457个,转移率为19.7%%(73/457).两者差异有显著性意义(P=0.000 2).腋 淋巴结微转移检测:20例病人共有239个腋淋巴结,其中SLN48个,NSLN 191个.常规病理检查SLN微转移阳性率为14.6%(7/48),NSLN为0;用EMA免疫组化方法 检测,SLN阳性率为29.2%(14/48),NSLN为1.6%(3/191);CK-19免疫组化方法检测,SLN阳性率为22.9%(11/48),NSLN为1.1%(2/191);RT-PCR方法检测SLN阳性 率为62.5%(30/48),NSLN为11.5%(22/191).常规病理检查、免疫组织化学检测与RT-PCR检测结果差异有显著性意义(P＜0.01).结论联合应用专利蓝和 99mTc-DX两种方法进行乳腺癌前哨淋巴结定位优于单用其中一种方法;免疫组化方法和RT-PCR方法是检测淋巴结微转移的敏感方法,而且RT-PCR方法比免 疫组化方法更敏感;前哨淋巴结定位和微转移的检测等技术对乳腺癌的治疗有较大意义. 10.期刊论文 刘国津.范志民.唐强.杨明.付强.付彤.张宏.宋冬 乳腺癌前哨淋巴结定位和活检 -中国肿瘤临床 2000,27(7) 目的:验证乳腺癌前哨淋巴结定位和活检技术的可行性和前哨淋巴结的组织学状况能否准确预告腋淋巴结的状况.方法:本研究使用专利蓝,对33例乳 腺癌患者进行了术中及术后前哨淋巴结定位和活检术.结果:30例(91%)找到前哨淋巴结,前哨淋巴结预告腋淋巴结的准确率为96.7%,假阴性1例.结论:本研 究结果证实,乳腺癌前哨淋巴结定位和活检技术是可行的,前哨淋巴结的组织学特征能够准确反映腋淋巴结的状况.我们相信在将来治疗腋淋巴结阴性的乳 腺癌中,这一技术可以免除患者接受不必要的腋淋巴结清扫术. 引证文献(3条) 1.辛国荣.高艳华.王柏欣.姜广林.吴庆田.王淑秋 女性乳腺癌原发灶前哨淋巴结微转移与nm23-H1的表达[期刊论文 ]-中国老年学杂志 2008(11) 2.陈斌.王梦龙.王小农 胃癌术中前哨淋巴结的定位检测研究[期刊论文]-山东医药 2008(3) 3.王蕾.宋东.刘国津 乳腺癌术后上肢淋巴水肿的治疗[期刊论文]-山东医药 2007(31) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_shandyy200508004.aspx 授权使用：广西医科大学(gxykdxIP)，授权号：83d0e4ee-2021-4ab7-b732-9df500254a41 下载时间：2010年9月18日