人参皂甙治疗脊髓损伤的实验研究

ro le in the late comp lication of aging and diabetes1 In t J B iochem Cell B io l, 1996; 28 (12) : 1297 3 　V lassara H , B row nlee M , M anogub K et a l1Cachectin TN F and IL 21 induced by Gluco se2M odified p ro teins: Ro le in no rm al tissues remodeling1Science, 1988; 240: 1546 4　V ishw anath V , F rank KE, E lm ets CA et a l1Glycation of sk in co l2 lagen in type 1 diabetes m ellitus1D iabetes, 1986; 35: 916 5　V lassara H 1Recent p rogress in advanced glycation end2p roducts and diabetic comp lication1D iabetes, 1997; 46 (Supp l 2) : 19 6　Sim s TJ , Rasm ussen LM , O xlund H et a l1T he ro le of glycation cro ss2link s in diabetes vascu lar st iffen ing1D iabeto logia, 1996; 39: 946 7　Paul RG, Bailey A J1Glycation of co llagen: T he basis of its cen tral ro le in the late comp lication of aging and diabetes1 In t J B iochem Cell B io l, 1996; 28 (12) : 1297 8　Bobbink W G, Boer HC, T ekelenburg WL et a l1Effects of ex tra2 cellu lar m atrix glycation on endo thelial cell adhesion and sp read2 ing1D iabetes, 1997; 46: 87 9　Fong Y, Edelstein D , W ang EA et a l1 Inh ib it ion of m atrix2induced bone differen tiat ion by advanced glycation end p roducts in rats1D iabeto logia, 1993; 36: 802 10　M iyata T , Inagi R , Iida Y et a l1 Invo lvem ent of Β22m icroglob lin modified w ith advanced glycation end p roducts in the pathogenesis hemodialysis2associated am ylo ido sis: Induction of hum an mono2 cyte chemo tax is and m acrophase secretion of tumo r necro sis fac2 to r2Αand in terleuk in211J C lin Invest, 1994; 93: 521 11　M iyata T , L ida Y, U eda Y et a l1M onocyte m acrophage response to Β22m icroglob lin modified w ith advanced glycation end p rod2 ucts1Kidney In t, 1996; 49: 538 12　M iyata T , Sp rague SM 1A dvanced glycation of Β22m icroglob lin in the pathogenesis of bone lesions in dialysis2associated am ylo ido2 sis1N eph ro l D ial T ransp lan t, 1996; 11 (supp l 3) : 86 13　L ida Y, M iyata T , Inagi R et a l1Β22m icroglob lin modified w ith ad2 vanced glycation end p roducts induces in terleuk in26 from hum an m acrophages: Ro le in the pathogenesis of hemodialysis2associated am ylo ido sis1B iochem B iophys Res Comm un, 1994; 201: 1235 14　Kirstein M , A ston C, H in tz R et a l1Recep to r2Specific induction of insu lin2like grow th facto r2É in hum an monocytes by advanced glycation end p roducts2modified p ro teins1J C lin Invest, 1992; 90: 439 15　Kim ble RB, V anince JL , B loedow DC et a l1 In terleuk in21 recep to r an tagonist decreases bone lo ss and bone reso rp tion in ovariec2 tom ized rats1J C lin Invest, 1994; 93: 1959 16　Kanatan i M , Sugimo to T , Fukase M et a l1Ro le of in terleuk in26 and po staglandins in the effect of monocyte2condit ioned m edium on o steoclast fo rm ation1Am J Physio l, 1994; 267: E868 17 　 Ish im i Y, M iyaura C, J in CH et a l1 IL 26 is p roducted by o s2 teob lasts and induces bone reso rp tion1J Imm uno l, 1990; 145 (10) : 3297 〔1999209201 收稿　2000202210 修回〕 (编辑　牛铁兵) 人参皂甙治疗脊髓损伤的实验研究 1　长春市医院骨科　2　辽源矿医院 作者简介: 刘景臣, 男, 37 岁, 主治医师, 硕士, 主要研究脊髓损伤及治疗 刘景臣　尹　飞　赵　刚1　袁绍辉2　 (白求恩医科大学第三临床学院, 长春　130021) 赵　珉　 (白求恩医科大学第一临床学院) 　　摘　要　目的　探讨人参皂甙对脊髓损伤的作用, 寻求治疗脊髓损伤的新方法。方法　采用改良A llen 氏重量打击法制作猫脊髓损 伤模型。动物随机分组, 通过生物化学及病理学手段急性脊髓损伤中脊髓损伤节段水、钙离子 (Ca2+ )、丙二醛 (M DA ) 含量, 过氧化 物歧化酶 (SOD )、谷胱苷肽过氧化物酶 (GSH )活性, 观察伤段脊髓光境下组织形态改变及人参皂甙对其的影响。结果　①损伤组伤段脊 髓水、Ca2+ 、M DA 含量明显升高, SOD、GSH 活性明显降低 (P < 010)。②光镜下各组均有水肿, 损伤组最重、治疗组次之、对照组最轻; 损 伤组及治疗组均有中心性出血, 损伤组较重; 损伤组 3 h 即出现神经元空泡变性, 核溶解或固缩, 尼氏小体消失; 6 h 出现部分神经纤维脱 髓鞘或断裂。治疗组均有不同程度的恢复。结论　人参皂甙对脊髓损伤早期有保护作用。 关键词　人参皂甙　脊髓损伤　脂质过氧化 　　脊髓损伤 (SC I)导致截瘫的根本原因在于脊髓损伤后继发 性病理改变使脊髓损伤从可逆性损害发展成为不可逆性损伤。 自由基 (FR ) 介导的脂质过氧化 (L PO ) 在中枢神经系统外伤后 的继发性损害中起十分重要的作用, 是脂质过氧化的起动因子 和引发剂。主要现在损伤组织中脂质过氧化物的大量产生, 抗氧化剂水平的降低和磷质酶膜系统的抑制〔1〕。人参皂甙 (GS) 是人参的主要有效成份, 主要药理作用为改善微循环、提高组 织抗缺氧能力、抑制血小板聚集、影响前列腺素 (PGs) 代谢、 Ca2+ 拮抗作用。国内外大量实验对其有深入研究, 然而在治疗 ·303·刘景臣等　人参皂甙治疗脊髓损伤的实验研究　第 5 期 脊髓损伤的应用研究方面尚属空白〔2〕, 现对此进行研究报道。 1　材料与方法 111　动物与分组　采用杂种家猫 36 只, 雌雄不分, 体重在 1195～ 4110 kg, 平均 2188 kg。随机分为 3 h、6 h 两大组, 每组 再分为对照、损伤、治疗组, 各 6 只猫。其中每组抽取 2 只猫损 伤部位部分脊髓作病理, 其余留作检测其他各项指标。 112　脊髓损伤模型制作〔3〕　用 3% 戊巴比妥钠按 1 m lökg 体 重腹腔注射麻醉, 以猫 13 肋为标志, 行 T 13～L 1 椎板切除, 显露 脊髓硬膜。40 g 铜锤从 10 cm 高处沿中空玻璃管垂直自由落下 砸伤垫有垫片的脊髓。致伤能量为 400 gcf, 垫片面积 4510 mm 2、重量 01035 g, 造成中等程度以上的损伤, 然后缝合创口。 对照组未损伤脊髓。损伤组及治疗组于伤后 10 m in 分别腹腔 注射 015% 吐温280 水溶液 3 m lökg 体重、3% 人参皂甙溶液 (以 015% 吐温280 水溶液做溶剂) 3 m lökg 体重, 以后每 2 h 给半 量。 113　取材　3 h、6 h 组分别于伤后相应时间处死。脊髓组织首 先用 0℃冰盐水洗去表面血液, 用滤纸吸干硬膜外水份, 脊髓组 织从中间一分为二, 其中一半行水、Ca2+ 含量测定; 每组另一半 抽取 2 个样本伤区同部位部分组织行病理检查; 其余脊髓组织 称重, 以 1∶10 (W ∶V ) 比例加入 pH 816 的 012 mo löL 磷酸盐 缓冲液, 在冰水浴中用匀浆器磨成匀浆, 置于试管中- 20℃冰 箱保存待测。 114　测定方法　脊髓损伤节段含水量、Ca2+ 测定〔7〕,M DA 含 量、SOD、GSH 的活性检测方法〔4～ 6〕, 病理检查〔8〕均参照相应文 献进行。 2　结　果 211　脊髓损伤节段水、Ca2+ 、M DA 含量及 SOD、GSH 的活性 变化　损伤组损伤节段水、M DA 含量随时间呈不断升高, SOD、GSH 活性呈不断降低趋势, 与对照及治疗组间比较差异 显著 (P < 0105, P < 0101) ; 对照、治疗组间及损伤组两时点间 差异均不显著 (P > 0105)。显示 GS 确有减少 SC I后组织水肿, 降低组织中M DA , 保护抗氧化酶耗损的作用。Ca2+ 含量变化最 为明显: 损伤组两时点间及治疗组与对照组间比较差异显著 (P < 0105) , 损伤组与对照、治疗组间差异非常显著 (P < 0101)。表 明 SC I后Ca2+ 内流非常明显, GS 能够抑制损伤脊髓的Ca2+ 反 常, 但不能达到正常水平。见表 1。 表 1　脊髓损伤节段水、Ca2+ 、MDA 含量及 SOD、GSH 的活性变化 (x±s) 分组 H 2O (% ) Ca2+ (Λmo lög) M DA (nmo lög) SOD (uög) GSH (uög) 对照组 65157±0159 12123±0160 68140±1170 23510±27146 10135±1144 3 h 损伤组 73156±21371) 17156±01692) 3) 94161±61671) 156197±91471) 5110±11051) 治疗组 65195±0144 14147±0196 61156±11188 238146±13171 11134±2136 对照组 66100±0144 12125±0150 64158±9154 339176±72179 10100±0193 6 h 损伤组 80100±21311) 20146±01822) 3) 117172±71411) 160100±71311) 4140±01501) 治疗组 66192±0131 14198±0137 76133±3135 315174±58166 11100±1158 　损伤组与对照、治疗组相比 1) P < 0105, 2) P < 0101; 损伤组两时相比 3) P < 0105 212　病理学改变　对照组除轻度水肿、蛛网膜下腔偶见红细 胞外, 中央管、灰质、白质结构基本正常。损伤组 3 h 明显水肿, 广泛出血, 中央管结构破坏, 灰质内有组织坏死, 神经元空泡变 性, 部分核固缩及溶解, 尼氏小体消失。6 h 除上述改变外, 白质 中有炎性细胞浸润形成的血管套, 神经纤维断裂和脱髓鞘改 变。治疗组 3 h 中央管仍有部分破坏和出血, 少部分神经元空 泡变性, 核固缩或溶液, 尼氏小体基本恢复正常结构, 无脱髓鞘 改变。6 h 上述改变进一步减轻, 神经胶质细胞增生, 呈现损伤 修复的改变。 3　讨　论 311　病理性自由基的产生及其毒害作用　SC I 后组织水肿、 出血、缺血缺氧成为引发点, 通过多种途径使 FR 大量产生〔1〕: ①血管内皮细胞、神经细胞缺氧代谢, 通过黄嘌呤2黄嘌呤氧化 酶系统产生大量 FR; ②组织局部炎症反应, 网状内皮白细胞在 吞噬作用下产生大量 FR; ③应激状态下, 儿茶酚胺的升高及线 粒体传递氧漏失, 产生 FR; ④前列腺素 (PGs) 代谢障碍〔10〕; ⑤ SC I 后消耗了大量氧化剂, 使病理性 FR 堆积; ⑥Ca2+ 反常, 使 FR 大量产生〔10〕。 神经系统中富含磷脂, 最易受到 FR 的攻击, 发生脂质过 氧化, 使神经细胞膜及亚细胞膜尤其是线粒体膜遭到破坏, 膜 的动态性、流动性及通透性异常, 膜容量调节及离子转运功能 障碍。大量Ca2+ 沉积在线粒体内, 使线粒体磷酸化过程抑制, 加 速细胞死亡。这些环节互相交错促进, 最终导致神经细胞坏死, 神经损害从可逆性转变为不可逆性改变。 312　关于实验结果的几点探讨　实验结果证明 SC I 后 FR 代 谢紊乱呈恶性循环, 且 SOD、GSH 在清除自由基方面的作用是 不一样的, 损伤组 6 h 组织中 SOD、GSH 较正常降低分别为 3313%、5618% , 表明 GSH 更为重要。GS 作为外源性清除 FR 的药物抑制 FR 的产生, 使抗氧化酶维持在较高水平; GS 抑制 ·403· 中国老年学杂志 2000 年 7 月第 20 卷 Ca2+ 内流却不能使细胞内Ca2+ 降低到正常水平, 表明 GS 不能 清除以磷酸盐沉积在细胞线粒体内的Ca2+ , 即不能挽救已坏死 的神经细胞, 只能阻止进一步的Ca2+ 沉积和细胞坏死。病理形 态学 3 h、6 h 治疗组均有部分神经元细胞变性坏死亦证实了此 观点。这为临床早期用药提供了依据。研究表明线粒体内Ca2+ 的变化是使细胞由可逆转变为不可逆的关键〔10〕, 因此 GS 的 Ca2+ 拮抗作用对挽救濒临死亡的神经细胞具有重要意义。 313　GS 治疗 SC I的及其意义　GS 治疗急性脊髓损伤的 机理可能与以下几点有关: ①强心、增加心输出量、扩张血管, 降低总外周阻力, 改善微循环及组织能量代谢; ②提高组织抗 缺氧能力; ③抑制血小板聚集影响 PGs 代谢, 降低 TXA 2öPG I2 比值; ④Ca2+ 拮抗作用〔2〕。其中以①③④点最为重要。GS 在不 同环节上阻断了 FR 产生及发展的恶性循环, 抑制了 FR 反应; 以往大量研究治疗 SC I多为毒副作用极大的药物, 临床应用少 或用药剂量及时间受到限制; 而 GS 则相反, 常做为补品而应 用。 4　参考文献 1　戴力扬综述, 徐印坎审校 1 脊髓损伤与脂质过氧化 1 国外医学·创 伤与外科基本问题分册, 1989; 3: 160 2　王本祥主编 1 人参研究进展 1 天津科学技术出版社, 1991: 97 3　华筑信 1 脊髓打击致伤试验A llen 方法的讨论 1 河北大学科学通 报, 1988; 3: 218 4　龚守良主编 1 实用基础医学实验技术 1 长春: 吉林科学出版社, 1985: 30 5　赵琢道, 黎　鳌, 杨宗成 et a l1 一种测定 SOD 活力的新方法——碱 性二甲基亚砜2鲁米诺化学发光法 1 生物化学与生物物理进展, 1987; 6: 55 6　夏奕刚, 夏亦明, 朱莲珍 1 血和组织中谷胱苷肽过氧化物酶活力的 测定方法 1 卫生研究, 1987; 16 (4) : 29 7　黄志宏, 王子灿, 李麟仙 1 钙和 TXA 2 在猫局部脑缺血重灌流损伤 中的作用 1 中国病理生理, 1990; 6: 459 8　凌启波编著 1 实用病理特殊染色及组化技术 1 广州: 广东高等教育 出版社, 1987: 149 9　王禾综述, 何凤慈, 刘英炳审校 1 前列腺素在脊髓损伤中的地位 1 国外医学·创伤与外科基本问题分册, 1990; 4: 195 10　H all ED , W o lf DL 1A pharm aco logical analysis of the pathophysi2 o logical m echanism s of po sttraum atic sp inal co rd ischem ia1J N eu2 ro surg, 1986; 64 (6) : 951 〔2000201207 收稿〕 (编辑　曲　莉) 不同年龄大鼠组织NO 含量和NO S 活性的变化与衰老之间的关系1 1　本研究系重庆市卫生局资助 2　重庆医科大学第一临床学院老年病科 作者简介: 曾昭淳, 男, 50 岁, 副教授, 研究方向: 自由基对机体的影响 曾昭淳　马厚勋2　曾繁荣2　 (重庆医科大学基础医学院生化教研室, 重庆　400016) 　　摘　要　目的　探讨组织一氧化氮 (NO )含量与一氧化氮合酶 (NO S)活性的变化规律, 揭示其与衰老的关系。方法　采用铜离子活 化镉还原法、硫代巴比妥酸染色法和血红蛋白氧化法测定组织NO、丙二醛 (M DA )含量和NO S 的活性。结果　与青年鼠组 (4～ 5 月龄) 相比, 老年鼠组 (20～ 22 月龄)心脑肾组织NO 降低差异显著性 (P < 0101) , 而中年鼠组 (9～ 10 月龄) 仅肾组织NO 含量降低有显著性差 异 (P < 0105)。与中年鼠组比较, 老年鼠组仅在心脏组织NO 含量降低差异有显著性 (P < 0101)。中年鼠组心脑组织NO S 活性较青年鼠 组降低 (P < 0105) ; 而老年鼠组组织NO S 活性较中年鼠组增高, 仅脑组织NO S 增高有显著差异 (P < 0105)。与青年鼠对照组比较, 老年 鼠组组织NO S 活性降低, 但无显著性差异 (P > 0105)。与青年鼠组比较, 老年鼠组心肝脑肾组织M DA 增高 (P < 0101) , 中年鼠组仅在肝 组织有显著性 (P < 0105)。老年鼠组心肝脑肾组织M DA 较中年鼠组增高, 但仅在脑组织有显著性 (P < 0105)。结论　NO 与衰老之间存 在着一定的相关关系。 关键词　一氧化氮　一氧化氮合酶　丙二醛　衰老 　　自 1987 年血管内皮舒张因子被证实为一氧化氮 (NO ) 以 来, 已知NO 在调节血压、维持血管张力、抑制血小板聚集与白 细胞对血管壁的附壁作用以及在防止动脉粥样硬化的形成、发 展中的作用。R eckelhoffdeng 等〔1〕报道在衰老过程中大鼠组织 的NO 含量降低与组织内源性L 2精氨酸 (L 2A rg) 的含量减少 有关。Stro llin2Benedett 等也发现大鼠多个脑功能区NO 的产 生随增龄而减少, 也与L 2A rg 含量减少有关。为进一步研究NO 与衰老的关系, 本研究于 1998 年 3 月至 1999 年 2 月期间通过检测不同年龄组W istar 大鼠心肝脑肾组织NO 含量与一氧化氮合酶 (NO S) 活性, 揭示NO 在衰老过程中的变化规律及作用, 为今后继续探讨NO 在衰老中的作用提供实验依据。 1　材料和方法 111　主要试剂制备 11111　组织匀浆缓冲液　含 50 mmo löL N 222羟乙基哌嗪2N ’2 乙磺酸 (H EPES) , 015 mmo löL 乙二胺四乙酸 (ED TA ) , 1 ·503·曾昭淳等　不同年龄大鼠组织NO 含量和NO S 活性的变化与衰老之间的关系　第 5 期 tu res of ligam entum flavum in C5～ 6 and C6～ 7 w ere observed in five group s of fetuses, infan ts, adu lts, elderly and patien ts w ith cervical sp inal steno sis w ith the conten ts of co llagen in these ligam ents determ ined by W oessner’s m ethod. Results　 In the group s of fetuses, elast in consist ing the elast ic fibers w ere few er, w ith no o r quite th in peripheral layer of m icrofib ris. In the group s of infan ts. Q uantit ies of elast in w ere mo re than that of the fetuses group s w ith th in peripheral layer of m icrofib ris. T hese structures w ere sim ilar to that of the adults group s. In the group s of o ld peop le, cervical ligam entum flavum show ed decrease of the elast ic fibers and p ro liferation of the co llagen fibers, w ith fib ro tic changes and calcification. T hese changes w ere mo re severe in the group s of sp inal steno sis patien ts. Conclusion s　Structures of ligam entum flavum in the fetuses group s w ere differen t from that of the adult group s. Structures of ligam entum flavum in the infan ts group s w ere sim ilar to that of the adults group s. T he ligam entum flavum show ed degeneration, affer aging and m ay cause o r aggravate cervical sp inal steno sis. Key words　L igam en tum flavum　Cervical spondylo sis　H isto logy　Con ten ts of co llagen　A ging changes (O riginal paper see page 288) An investiga tion of the rela tion sh ip of ca lc ium overload and neurona l apoptosis in cerebra l ischem iaöreperfusion in jury ra ts m odel Chen Kangn ing, D ong W e iwe i The South-W est Hosp ita l, Th irdM il itary M edica l Un iversity, Chongq ing 400038 Objective　To exp lo re the relat ion betw een calcium overload induced by cerebral ischem iaöreperfusion and neuronal apop to sis. M ethods　A fter the ischem iaöreperfusion model w as estab lished in m aleW istar rat, the changes of in traneuronal free calcium conten t and neuronal apop to sis w ere ob- served. Results　cerebral ischem iaöreperfusion could resu lt in calcium overload and incerase of neuronal apop to sis. T he change of in tracellu lar free cal2 cium conten t w as in acco rdance w ith that of neuronal apop to sis induced by cerebral ischem iaöreperfusion in jury. Conclusion s　T he calcium overload w as invo lved in neuronal apop to sis induced by cerebral ischem iaöreperfusion. Key words　Cereb ral ischem iaöreperfu sion　Calcium overload　N euronal apop to sis (O riginal paper see page 293) Analysis of D NA damage in per iphera l blood lym phocytes of ra ts induced by H2O 2 with single-cell gel electrophoresis An W en l in , L iL in , P iao J inghua et a l D epartm en t of Pharmacology, Xuanwu Hosp ita l of Cap ita l Un iversity of M edica l Sc iences, Be ij ing Key Labora tory for Bra in Ag ing, Be ij ing 100053 Objective　To investigate DNA dam age in peripheral b lood lymphocytes of rats w h ich w ere incubated w ith various do ses (25～ 20 Λmo löL ) of H 2O 2 fo r differen t t im e duration (5 m in o r 20 m in). M ethods　DNA dam age w as m easured by single2cell gel electropho resis (SCGE) and laser scanning confocal m icro scopy. T he degree of DNA dam age w as judged by the percen tage of lymphocytes w ith com et2like tail, the tail length and tail mom ent of the cell. Results　DNA dam age w as demonstrated do se dependently in the peripheral b lood lymphocytes of rats w hen the cells w ere incubated w ith the H 2O 2 fo r certain tim e. T he percen tage of lymphocytes w ith com et2like tail, tail length and tail mom ent w ere aggravated sign ifican tly. Conclusion s 　T he resu lts indicate that the increasing of reactive oxygen o r free radicals m ay p lay an impo rtan t ro le in the DNA dam age. Key words　H 2O 2　L ymphocyte　DNA 　Single2cell gel electropho resis　L aser scann ing confocal m icro scopy (O riginal paper see page 296) Sp ina l cord in jury trea ted by Gen- seng sapon in—An exper im en t study L iu J ingchen , Zhao M in , Y in Fe i et a l D epartm en t of Plastic Surgery, the Th ird Teach ing Hosp ita l of Norman Bethune Un iversity of M edica l Sc iences, Changchun 130031 Objective　T he effects of Gen2seng (GS) saponin on sp inal co rd in jury w ere studied. It w as observed that the conten t of w ater, Ca2+ iron, lip id perox idation nam ed M DA in the in jured segm ent, the activit ies of SOD and GSH , the vary regulation of the mo rpho logical change of the in jured seg2 m ent and the effects of GS w ere observed. M ethods　T he modified A llen’s w eigh t heating m ethod w as adap ted to m ake the cat acu te SC Imodel. A ll an im als w ere random ly divided in to group s. T he resu lts w ere exam ined biochem ically and patho logically. Results　 (1) T he conten t of w ater, Ca2+ and M DA in the in jured sp inal segm ent increases sign ifican tly. But the activit ies of endogenetic SOD and GSH decreased sign ifican tly. (2) In every group , the degere of edem a differen t. T he edem a is mo st serious in the in jured group , secondly in the treated group and lighest in the contro l group. T here w ere som e exten t of b leeding in the cen ter of the in jured segm ent. Bo th in the in jured group and the treated group , bu t mo re serious in the in2 ju red group w ith, the neuron degeneration of vacuo le, the nucleus caryo lysis o r pykno sis and the N esle bodies van ish occurred after 3 h. T hese changes becom e mo re serious w h ile som e nerve fibers dem yelinated o r rup tured, after 6 h. A ll the data in treated group resto re in differen t degree. Conclusion s　GS saponin p lays a p ro tective ro le in early sp inal co rd in jury. Key words　Gen2seng 　Sp inal co rd in ju ry　L ip id perox idat ion　 (O riginal paper see page 303) The rela tion between changes of tissue n itr ic ox ide concen tra tion and n itr ic xo ide syn thase ra ts in d ifferen t age-groups and ag ing Zeng Zhaochun , M a Houxun , Zeng Fanrong D epartm en t of B iochem stry, the Basic M edic ine College of Chongq ing Un iversity of M edica l Sc iences, Chongq ing 400041 Objective　T he relation betw een changes of tissues n itric ox ide (NO ) and nitric ox ide synthase (NO S) activity and aging w ere studied. M ethods　 T issue ino rgan ic n itrate, m alonaldehyde (M DA ) and NO S activity of the heart, liver, b rain and k idney w ere determ inated respectively by Cu2+ 2acti2 vated cadm ium 2reduction m ethod, th iobarb itu ric acid (TBA ) test and oxyhemoglobin oxidation m ethod. Results　Compared w ith the young rats group , NO in the heart, b rain and k idney tissue of the aged rats group w ere decreased sign ifican tly (P < 0101) , bu t in the m iddle2age rats group only k idney tissue NO decreased sign ifican tly (P < 0105). Compared w ith the m iddle2age group , NO only in the heart t issue decreased sign ifican tly in the aged group (P < 0101). NO S actitvity in the heart and brain in the m iddle2age rats group w as low er than that in the young rats group (P < 0105). NO S activity in the heart and brain in the o ld rats group w as h igher than that in m iddle2age rats group , bu t that just in the brain had sign ifican t differ2 ence betw een two group s (P < 0105). Compared w ith the young rats group , t issue M DA of the heart, liver, k idney and brain in the o ld rats group w ere sign ifican tly increased (P < 0101) , bu t on ly increase of tissueM DA of liver in the m iddle2aged rats group had sign ifican tly (P < 0105). Compared w ith the m iddle2aged rats group , on ly increase of tissue M DA of liver in the o ld rats group w as sign ifican tly (P < 0105). Conclusion s　T he study demonstrates that there is som e relative betw een NO and aging. Key words　N itric ox ide　N itric ox ide syn thase　M alonaldehyde　A ging (O riginal paper see page 305)