血清中IgG红细胞血型抗体定量检测方法初探

¡⁄ 216 ¡⁄ —„œ ˚ “ 2009˜Œ 03´ 22 3˘ Chin J B lood Transfusion March, 2009, Vol . 22, No. 3 IgG” ˇ‚ ß “ —˝ ¿„ ¸ … ¡¡ ˇ ¶« ¡¡ ˝ı‰¡ `« (ˇ ¡¡ ¡¡ “ “ :˜¿ ˜ ¡¡ ‰¸ ‰¤ `¢ ˝‹ , ˛“ ¿ ˆ ¶ ı —” ˇ‚ ß ˘‰ —— † ¶¨ ,»»¸ª ‡ “ ˙ —¿„ ¶¤`¿ …† •‰ •¤ ‡ı ‰ ”£ ˚— “ ” ——˜,ˇ ”£ 200051 ) ¶¤ `¿ ˜ ˛ ˚ •¯ ¢ 2EL ISA …… ˚ı ¡£•‰ •¤ ¡¡ † ˆ ,ˆ EL ISA •‰ •¤ † ¶¤ •¯ ¢ ” — IgG¿„ 4 ¯¤ (¿„ 2 D¡¢ ¿„ 2E‚ )‰ł—— ¶¤ `¿ …† ¡£‰Æ „ß …¨• † ¶¤ —‚ “ »… “ ˙ — IgG” ˇ‚ ß “ —˝ ¿„ 8ˆß —‚ “ ˙ —˜ ˝‹ ¿„ ,˝¤ „ ˛ ˚ ¡¢ •¯ ¢ ·¿ »fl“ ˙ — IgG¿„ ¯¤ ¶¨ ¡£† ˆ ‚ˆ •‰ •¤ ¶ ¡¡ EL ISA •¤ † ¶¤ 4ˆß — ‚ “ ˙ — IgG¿„ 2 D ¯¤ ¶¨ •¶ ˛§ ˛“ ( 11086¡“ 541712 ) ƒ g/m l, IgG¿„ 2E ¯¤ ¶¨ •¶ ˛§ ˛“ ( 01080¡“ 71646 )ƒ g/m l¡£‰Æ ´ ¡¡ – —¿ ‡ı †‰ ‰¤ `¢ ˜ …–ª ¡¢ ˚ ˆ ˜ “ ˙ ˙ — IgG —¿„ ˜ ¯¤ ¶¨ ¡£ + IgG” ˇ‚ ß “ —˝ ¿„ ¶¤ `¿ •‰ •¤ ,¿ ˆ ¡¡ ¡¡ „ …·˚ :˛ ˚ •¯ ¢ ; EL ISA;¶¤`¿ ; IgG¿„ ¡¡ ¡¡ —˝… • ”¯ : R457. 1 1¡¡ R446161¡¡ ¡¡ ˛˜ ˇ –Œ ˚¶ ´º : A ¡¡ ¡¡ ˛˜ ´ – ”¯ : 1004 2 549X (2009) 03 2 0216 2 02 ‰ł —— ¶¤ `¿ …† , , —˚fi • ”‹ †¢˚„ ˆ `¸ ˝ º º ‰Ø ˚ ,˛“ 4 m l“ ˙ , 1 m l˝ º ‰Ø ˚ ¨ ” , ¡¡ ¡¡ ¶ “ ˙ — IgG” ˇ‚ ß “ —˝ ¿„ “ ˜ ` ·† ,¨ … † ˜‚ `¿ ,⁄ ¯— —´ œ ¶ø¨ “ †¡ ˇ globulin test, I A T)† ¶¤¿„ † ˆ ˜ ˛“ †˛ ‰¤ `¢ 1 “ ˙ — ¿„ ¨ ˇ´ ¡£ 1¡¡ †˜ `ˇ º •‰ •¤ ,˙ ˚ Ig M ¿„ ‡ ¶¨ “ ˙ — ¿„ 2IgG D / E˜ ¿„ [ 1¡“ 3 ] 1 m l„ » ” ˇ‚ ß ‡ • » ¨ , 37 ¡ •ı 5% ˛ ¸fi ¨ ” 20 m in¡£ ˛“ ˇ¡ ˚˝ …`¡£ † ¨¡ ˇ ƒ ˛ `˘ ·º ˚' ¡£ ˇ ¶ „ ˇ ˚ ;„œ˝ ˘ –Ø —˜ –Œ …˘• ¸ ,˛ ˆ˙ ‰¸ 1. 4¡¡ —§ … ˛ ¶¤ ¡¡ † ˆ •¯ ¢ ” ˜ —§ … ,˚„ ˆ I A T•¤ ˝‹ ˚– † ¶¤ˆ¿ • “ ˙ …˘ ˚ Ø Ø 2Ø “ ˙ ˜ •¯ ¢ ” ‰ł —— ˜¿ ˙ „œ˜ ¶ † ˆ … ‰ ¿„ ¨¸ ˙ ˚ Ø ( indirect anti2human —§ … ,˚˙ » ‚ ¨¯ ¡£»ø 1. 5¡¡ EL ISA …† ¡¡ · ˚ Ø Ø —§ …¶ ¶ ˚ …` ”— Æ „' ˜ ¨¸ · †˛ ˘ –Œ …˙œˇ (˝… 1 ) ¡£ ¶fl»fl“ ” ˜ …fl …… ˚ı ,—Ł “ ˚„ ˆ ˇ ƒ –¶–¨ ˇ¡ ˚˝ ” ,˘‰ —— ‰ł —— EL ISA† ¶¤ ,‚· ¿ † ¶¤ 4¡“ 8·˛ ¡£˝‹ ˚– “ ˙ ‰ł—— ¶¨ ˇ¡ ˚˝ ,‚· ¿ † ¶¤ ,» † ˇ ‚æ· ˚ …` ”— ¸ ˆ ˚Ø ¡£ —´ ˜ ˛ ˚ •¯ ¢ 2EL ISA •‰ •¤ ,…·† ˆ ˛ ˚ ¡¢ •¯ ¢ ·¿ »fl — IgG¿„ ,˝¤ „ EL ISA •‰ •¤ † ¶¤ •¯ ¢ ” — IgG — IgG¿„ ‰ł—— ¶¤ `¿ ,ˇ –¤ ¯¤ ¶¨ ,· ¶ł ¶ “ ˙ — 1. 1¡¡ “ ˙ ”˝ ” ˇ‚ ß ¡¡ 8ˆß —‚ “ ˙ ,¿„ 2 D¡¢ ¿„ 2E‚ …˘ 8• , 1¡“ 4 ”¯ ˛“ ¿„ 2 D , 5¡“ 8 ”¯ ˛“ ¿„ 2E, ø · cee¡– —´ ˇ˚ ” ˇ‚ ß ( < 72 h ) ,ø 1. 2¡¡ ˚ …` º ˙ ˘ ”—( ˚ ¡¡ ¨¸ · – ˚ Æ „' ¡£ 4 • ,„† 2000 ˜Œ 1 Y = { ( - 21682) / [ 1 + ( X /701901) ¡`11178 ] } + 21721¡¡ R 2 = 1 ˝… 1¡¡ ¨¸ · †˛ ´ ¡“ 2007˜Œ 12´ – ˚ †œ˙ … †Øø – ;¡ O , DCcEE¡– ,¡ O , dc2 IgG¿„ EL ISA ¶¤ `¿ ˚ …` ”—(ˆ „œ “ ˙ –Œ …˙œˇ ¯¤ ¶¨ ¯¤ ¶¨ =•¯ ¢ ” (—§ … ˛“ Bethyl Laboratories Inc,¯œ”¯ : E80 2 104 2 17 ) , EL ISA ‚¤ œ ˚ …` · ¿˘ ˛“ œ ˛ …… ˚ı —ˇ „« ¸ ,¯œ”¯ : 071222 ) , GAMMA …` ( ˆ „œ O rtho 2 Clinical D iagnostics Inc, ¯œ ”¯ : ‰Ø ˚ ¯¤ ¸ı ” (ˇ ”£ “ ” œ ˛ ‰' —ˇ • „ „ ¶¨ …˘ (ˆ „œ Molecu2 KUBOTA Corp ) ,˛¢ Ø 2Ø ‰ł—— ,˚ Ø Ø Ø (¿ ¶ ) ¸Æ•¯ ¢ ˚ …` ”—(ˆ „œ I MMUCOR Inc,¯œ”¯ : 359001 ) ,¿„ ¨¸ ˙ IGG157A ) ¡£˝ º 1. 6¡¡ ˝‡ …˘ • ˛ ¡¡ …˘ ¸ª •¯ ¢ ” (—§ … ˛“ 1 ) ¡¢ “ ˙ —¿„ ˜ ˘‰ ø 1 )¿„ …–Œ … † ¡£ “ ˙ — ˜ ¿„ ¯¤ ¶¨ ¡`“ ˙ ¿„ —§ … „ ˚ ¡£ 2¡¡ ‰Æ „ß – 1˛“ ˆ¿ • “ ˙ … 2 Ø •¯ ¢ ” — ˜ ¿„ ¿ ¶ ؘ ¯¤ ¶¨ ,¿ ¿· ¨˛ „« ¸ ,¯œ”¯ : 20070828) ¡£˛¢ ¿ `¿ ‰ł ø ˘ (˜ · ß ˙ lar Devices Corp ) , KA 2 2200 º —˜ »œ (¨ – Labsystem s Corp ) ¡£ 1. 3¡¡ ˛ ˚ •¯ ¢ ¡¡ ˚ Ø • ˚ Ø Ø º ¶ ‡ :– —§ … ˛“ 1 ˚– ,¿„ 2 D ˚ Ø Ø ¯¤ ¶¨ ˛“ ( 51078¡“ 61868 ) ng/ m l,ˆ ˇ ‚ ( 01190¡“ 01836) ng/m l; ¿„ 2E˚ ¿ ¶ ؘ ˜ ˚ —§ …, ˇ …ı,•¯ ¢ ” —¿„ 2 D ¿„ Ø Ø ¯¤ ¶¨ ˛“ ( 121271¡“ 231082 ) ng /m l,† ‚ ( 01185¡“ 91885 ) ng/m l¡£¶ …˚¯¤ ¶¨ ˚˙ ˛“ · …“ ˙ º ¡ O , DCcEE¡– ” ˇ‚ ß •· ƒ ,¶ ˛ ¸fi ˇ· º ˛“ · …“ ˙ º ¡ O , dccee¡– ” ˇ‚ ß •· ƒ ¡£‰« —´ ˇ˚ ” ˇ‚ ß ˆ œ 3–Ø ,º —˜ ˘ –‚ ˛“ „ » ” ˇ‚ ß ,–‚ ˆ ¡£¨¡ 1 m l“ ˙ 60 m in¡£‰« ˛ ˚ ” ˛ ¸fi ˇ· † ˇ ‚æ· 6–Ø ,‚ ¨¡ 015 m l„ » ” ˇ‚ ß ‰ł—— ˚ …` ”— ¸ ˆ ‰ł —— ¡£ 5”¯ ¡¢ 6”¯ ø – ˛ ˚ „ ‡ —…· `¸ “ ˙ `¿ , 1 m l„ » ” ˇ‚ ß ‡ • » ¨ , 37 ¡ •ı ( 41242¡“ 61679 ) ng/m l, ¿„ 2E ˜ ˚ …˚¯¤ ¶¨ ˚˙ ¯¤ ¶¨ ˛“ ¿„ 2 D ( 11086¡“ 541712 )ƒ g/m l¡¢ ¿„ 2 ‚· …† 2¡“ 3 ·˛ ,¸ø ˆ ¡£ ( 101052¡“ 141934 ) ng /m l¡£†˛ ¿… › ˚… “ ˙ — ˇ ƒ ¿„ ¿ “ “ ˙ —˜ ¿„ ‰Æ „ß ˛ ˆ ˇ † E (01080¡“ 71646)ƒ g/m l¡£ˆ¿ • “ ˙ ˜ ” ˇ‚ ß œ ¸Æ•¯ ¢ , ¿„ 2E“ ˙ —§ … ˘« ˝ ,˛ ˆ˙ —„œ ˚ “ 2009˜Œ 03´ 22 3˘ Chin J B lood Transfusion March, 2009, Vol . 22, No. 3 ¡⁄ 217 ¡⁄ ( ng/m l) ¡¡ ¡¡ “ ˙ I A T—§ … 8 192 1 024 512 256 8 32 512 512 I A T—§ … ¿„ 2 D /E 54 7111680 4 8031488 3 1531195 1 0851904 801414 4221294 7 6461320 6 0371291 1¡¡ EL ISA ”˝ I A T† ¶¤ 8ˆß —‚ “ ˙ ¡¢ •¯ ¢ ” — IgG¿„ 2 D / E¯¤ ¶¨ – ”¯ 1 2 3 4 5 6 7 8 •¯ ¢ ” ˚ Ø Ø ( EL ISA ) 61868 ¡ 11721 51459 ¡ 01416 61474 ¡ 11065 51078 ¡ 01099 151604 ¡ 11973 231082 ¡ 41825 151120 ¡ 01731 121271 ¡ 11320 -¶ ¶ Ø ( EL ISA ) 01190 ¡ 01111 01768 ¡ 01475 01316 ¡ 01096 01836 ¡ 01059 51552 ¡ 01746 91885 ¡ 31755 01185 ¡ 01101 01479 ¡ 01174 Ø EL ISA ¿„ 2 D /E 61679 ¡ 11828 41691 ¡ 01337 61159 ¡ 11154 41242 ¡ 01159 101052 ¡ 21719 131197 ¡ 11760 141934 ¡ 01655 111792 ¡ 11481 I A T—§ … 1 1 1 1 1 1 1 1 ¢ :•¯ ¢ ” ¿„ 2 D / E =˚ Ø Ø EL ISA ;“ ˙ ¿„ 2 D / E = (•¯ ¢ ” ¿„ - D / E) ¡`“ ˙ 3¡¡ ´ ˜¿ ˙ „ª •” ˆ IgG¿„ ¶¤`¿ ˜ …‰¿„ ˙ —¿„ ,« 2 •¤ ,˚„ ˆ ˛“ · •‰ •¤ ˜ ¯ ª ¯¤ ¶¨ ¡£ „œ˝ — ¡¢ ¯¤ ¶¨ · m l¡£¿„ 2 D º ¿„ 2E˜ „ — ‰Æ ”ˇ `ƒ ˙¿ ¶¨ ø ·ƒ 800 ) Cal/mol… ,” ˜ ˆ ¿„ …‰Æ „„ ˜ † ¶ł ¿„ , ”‹ `¿ ,« ‰˜ Æ „' º ¶¤ `¿ ‰Æ , [8 ] ( - 10 200¡“ 12 2 ¿„ › ¿ — IgG ‰ˇ ¶ ˜ ˚– ,¶ ˚„ ˆ I A T˜ —¡ … ‡ `¿ fi … ˜ † ˙ ”˝ `ƒ †»˝‹ · ‰˚˝ ,¿ ˜ ˚˙ ‡ ¿„ ˙ —” ˇ‚ ß ¿ – ‰† ¶¤ „ß ¡£ EL ISA •‰ •¤ `¿ •˙ “ —˝ ‰¸ ‰¤ `¢ 1 IgG¿„ † ł — ˜ —˜ —“ —˝ IgG¿„ IgG• ˚ Ø …† ˜ `ƒ —¸ø †»˝‹ ¡£ —¶¤ `¿ ¡¢ …¨• ¡¢ … –ª ¨ ¯ ª ˜ ¯¤ ¶¨ ¡£˛ ˆ˙ ‰Æ ”ˇ ˇ ˚ fi ,˛ ˆ˙ ‰¸ ‰¤ `¢ …–ª ¡¢ ˚ ˆ ˜ “ ˙ ˜ ‚ ¨¯ ,†»˜ – ‰† ¶¤ “ ˙ — ¶¤`¿ …† •‰ •¤ ,‡ı †‰ ˜ ˚ Ø ‰Æ „ß – ˆ ,˜ „» ¡£ ¿… ˛˜ ˇ …˜ »æˆ –¨ ‰ˇ …¨• ˜ ‰Æ „ß ,ˇ£ ˝ß ˜ ˛“ —´ œ ¶ø¨ “ †¡ ˜ ` ·† … † …˛ `˘ Æ „' …¨• ˜ ˚ Ø †˛ —´ ˜ ‡ — : ˛ ˚ ¡¢ •¯ ¢ ¡¢EL ISA † ¶¤ •¯ ¢ ” — ,« ¶… —Ł “ ˚„ ˆ ˇ ƒ ¯¤ ¯¤ ¶¨ ¡¢ —§ … ˛ ¶¤ ¡¢ »» ¸ª ‡ “ ˙ — ¿„ ¸˘ ˜ ‡ —–¤ “ ˜ –Œ …˘• » —£ …˘• ‰ł —— ⁄ ˚ Ø ,¨• ¶¤ ¸ø ˆ –Œ …˘• » —£ …˘• “ ¯¤ ¶¨ º ˛ ˚ ¡¢ •¯ ¢ ¡¢EL ISA •‰ •¤ † ˆ ˜ –Œ …˘• » —£ … ¶ ˘‰ [ 1 ] ¡¡ B ritish Comm ittee for Standards in Haematology . B lood Transfusion Task Force. Guidelines for blood group ing and red cell antibody testing during p regnancy . Transfus Med, 1996, 6 ( 1) : 71¡“ 74 [ 2 ] ¡¡ ‡´ ¿„ ,¯ ˜ ˜Æ. ¨ “ —˚ “ •· ƒ º •˙ ABO —´ œ ¶ø ¨ “ †¡ †»„ ”ˇ • ˛ . ` ·† …Ø , 2001, 19 ( 6) : 377¡“ 378 ˘• ¯¤ ¶¨ ˜ „ `“ •¶ ˛§ ¡¢ ˇ „ •‰ ˇ …‡ ¶¨ ,¯ »fl˚ Ø ı …” , ˛· “ ø ˘• ‰ł—— † ¶¤ ,† —— † ¶¤ “ ˙ ”˝ •¯ ¢ ” — •– ¸ ,„⁄ IgG¿„ `¿ · ¯¤ ¶¨ , [ 4, 5 ] ¡£ ˛ ˆ˙ ˝‹ ˚– —§ … ,†¢‰« •¯ ¢ ” ‡¸ ¡£ ¯¤ ¶¨ EL ISA † ¶¤‰Æ „ß »»¸ª ‡ —§ … ˛“ 1 ˚– ˜ ¿„ —§ … „ ˚ ,…· ˛“ “ ˙ —˜ ¿„ ˇ ƒ ˜ “ ˙ ¿„ ø †»‰†»—Ł “ ¡£˙ – ‰Æ „ß ˇ IgG¿„ 2 D‰ ¶ ˜ – ¡£‰Æ „ß ˇ º , [ 3 ] ¡¡ W u KH, Chu SL, Chang JG, et al . Haemolytic disease of the new2 born due to maternal irregular antibodies in the Chinese population in Taiwan. Transfus Med, 2003, 13 ( 5) : 311¡“ 314 [ 4 ] ¡¡ Lambin P, Ahaded A , Debbia M , et al . An enzyme2linked immu2 nosorbent assay for the quantitation of IgG anti2 D and IgG subclas2 ses in the sera of alloimmunized patients . Transfusion, 1998, 38 ( 3) : 252¡“ 261 [ 5 ] ¡¡ Ahaded A , B rossard Y, Debbia M , et al . Quantitative determ ination of anti2K ( KEL1) IgG and IgG subclasses in the serum of severely alloimmunized p regnant women by EL ISA. Transfusion, 2000, 40 ( 10) : 1239¡“ 1245 [ 6 ] ¡¡ Harvey GK, David JA. B lood group ing techniques¡˛ Harvey GK, David JA. Mollisonπ s blood transfusion in clinical medicine. 11 th ed. Oxford: B lackwell Publishing L td. 2005, 323¡“ 325 [ 7 ] ¡¡ Pinkerton PH, Zuber ED , Barr RM , et al . Sensitivity of routine blood bank methods for the detection of anti2 D as deter m ined dur2 ing p roficiency testing . Am J Clin Pathol, 1984, 82 ( 3) : 326¡“ 329 [ 8 ] ¡¡ Harvey GK, David JA. I mmunology of red cells¡˛ Harvey GK, David JA. Mollisonπ s blood transfusion in clinical medicine. 11 th ed. Ox2 ford: B lackwell Publishing L td. 2005, 85¡“ 87 ( 2008 2 05 2 16˚ ‚ , 12 2 08—» ) – ˛˜ – …›:— ¡¡ ˘ —–Œ …˘• » —£ …˘• ,‚ · · …»fl`¸ ˚ Ø † [ 6 ]–¤ ˜ † ˆ –Œ … ˘• ¿ … ‡ ˝ ` 5 ng/m l˜ ˚ —§ … ˛“ 1˚– IgG¿„ 2 D ˜ ˘‰ ø ¯¤ ¶¨ ˛“ 51443 ng /m l,º ˛˜ ˇ ‰ ,– ˆ ‚ˆ •‰ •¤ ˚ ,‡ 2 —ª „» ˜ ˆ ‚— —”˝ …¨• — ¡£ 6 ¿„ ˝‹ ˚– ,˛ ˆ˙ ¶ ˆ¿ • “ ˙ ø – ø Ł ˆ `¸ ¿ ¿„ 2E ( 5”¯ ¡¢ 6”¯ )˝ ,˘ [ 4 ]–¤ ˜ 25 ng/m l¡£ IgG•˙ —§ … ˘« ˝ , ‰Ø ˚ ,…´ ø —¡ ˛˜ ˇ ¿„ 2E“ ˙ ˆ `¸ ˝ º —¶ ˆ ¢ ˜ ˚˙ , 5 ”¯ ¡¢6”¯ ˙¿ ,•¯ ¢ ” ˇ …ı ˆ ‰ 2 ˛ ˚ „ ‡ —…· `¸ “ ˙ `¿ ,†¢˚„ —˛ ‚‰ ˆ ˇ ‚ ,« ¶ Ø º ˚ Ø Ø ¿„ ¯¤ ¶¨ –¨ ø ˆ ˇ ˜ ¿„ 2E¯¤ ¶¨ (5”¯ , 101052 ng/m l; 6”¯ , 131197 ng/m l)º ` ˛· ˚„ ˆ ˝ º “ ˙ `¿ ¡¢ † ˆ ˝ º ——§ ¡£ ——¿ –¤ D [7 ] ¡£ ˛ ˆ˙ ˜ ‰Ø ˚ ˜ ¿„ 2E‰Æ „ß ( 7”¯ , 141934 ng/m l; 8”¯ , “ ˙ ,… · ‰Ø ˚ …¸ ˛ ˚ ˚˙ ¿ —— ˜ ,¸ø ˆ ‰Æ „ß …¨• I A T˜ … ‡ ¯¤ ¶¨ ˝ ` ˆ 111792 ng/m l)˛ ˆ ˇ † – ¡£ – ˆ ¶ ˝ ¯¤ ¶¨ ¿„ 11 ng /m l˜ IgG¿„ 2 ‰Æ„ß – , I A T˜ „» …† ‰˜ ˜ » º ,¿ ˜ ˚˙ IgG¿„ 2 D ¯¤ ¶¨ ‚ ˚„ ˆ `¸ 5% …˛“ 121494 ng / ˝ ,…˛“ 51443 ng /m l,˚˙ ˙ ¨ ” ˛“ ˇ¡ ˚˝ …` ˜ ‰Æ „ß ; IgG¿„ 2E