促甲状腺素释放激素_TRH_及SS_酒石酸盐结晶的合成

实验研究 促甲状腺素释放激素 及 一酒石酸盐结晶的合成 天津医学院 化学教研室 同位素实验室 本文采用液相法合成 和 一 , 一酒石 酸盐结晶。 从底料至接肤均未使用任何保护基 , 手 续简化并避免了使用光气 , 克服了无定形 及 盐酸盐吸潮性强 , 保存困难的缺点 。 经 生物 活性测定 , 证 明有生物活性 。 制成品进行了化学分 析 , 红外光谱 、 核磁共振谱 、 质谱分析 , 测定均证 明产品结构正确 。 合成路线 一 , 一 ‘ ’ ‘一 一 ‘ ·升 ‘ ‘ 匹 , 毒 , , 一 一 一 淤 一 。”一 ’ ℃ ,一亏一 ’ ,‘ 十 分 一 一 · 一 〕 一 一 ℃ 一 一 一 一 · 实 验 部 分 一 、 一焦谷氨酸 一 的制备 一 一 一 ·丫· 今 一 一 一 丫一 的制备 · 一 一 , 名 。 毫升 含 。 克 放置 分钟后 , 加千乙盛 毫升 , 放置过夜 , 得 一 。卜 。 。 克 毫克分子 。 ’ , 产率 。 , 一 一 一 将预冷的乙酞抓 毫升加到 毫升冷千 甲 醇 中 , 棍匀后 , 加入 。 克 一 毫克分子 , 剧烈振摇 , 至固体全部溶解 , 放置 小时后 , 加 奄升毗睫 , 放置 小时 , 得大量 白色片状 一 , 。 结晶 , 过滤 , 用乙醇及干 乙醚洗涤 , 干燥 得 克 , 一 分解 , 产率 。 一 一 一 一 — 小 一 将 。。 克 一 一 丫一 · 。 克 分 子 , 溶解在 毫升甲醇中 , 边搅边加 毫升 氨水 。 克分子 , 减压浓缩即得粗品 , 以 乙醉 水 再结晶得 一 一 了 · , 。 。一 分 解 二 一 的制备 图 , 一 场去 场 , ‘” 一 工 右 一 了一 ‘场 。、 一 ‘ 邢 邢 工 图 另法 一 — , 一 一 一 · ‘ 工 · 一 · 称取 。 克 一 玩 毫克分子 , 加干 甲醇 ‘ 取 克 一 ·卜 毫克分子 , 溶 于 毫升用干氨饱和的甲醇溶液中 , 小时后取 样走纸层或薄层鉴定 , 待基本环化完全后 , 减压浓 缩 , 残渣加甲醇溶解 , 再浓缩 , 重复三次 , 残渣溶 · 天 津 医 药 · 厅「 名一 , 药, 一 卜 阿 尸 一 一 场 尹 碑 护 一 · 场 一 盆 图 一门 一 一 , 工 、 矛产一 ‘ 、 , 、 凡 一 一 ‘ 一 二 已 扭告 、 一甲 · 于 毫升 溶液 , 加 毫升丙 酮沉淀氯化按 , 过滤 , 减压浓缩 , 残渣 用热丁酮 毫升分三次溶解 , 合 并 溶 液 , 弃去残渣 , 于溶液中加足量四氯化 碳 , 使 一 沉淀 , 直至沉 淀完全 , 放置过夜 。 次 日 , 析出无色针状结晶 , 过滤收集 , 干燥后得产 物 一 克 , 一 一 , 产 率 。 二 、 一组氨酸甲酪盐酸盐 《 一 · · 的制备 图 称取 克 一 。 毫克分子 溶 于 毫升 干 甲 醇 中 , 加 。 毫 升 浓 ‘ , 回流一小时后 , 通干 气至饱 和 , 放冰箱过夜 。 次 日 , 无色粒状结晶 一 · 几 ,、 ’ 一 图 , 再加少量甲醉 , 再减压蒸 干 , 如此反复 次 , 得无色糖浆 状 一脯氨酸甲醋盐酸盐 克 , 产率 以上 。 。 一脯氨 酸 甲 醋 的 制 备 一 · 称取 一脯 氨酸甲酷盐酸盐 。 克 毫克 分子 , 溶于 毫升水中 , 加入 毫升乙酸 乙醋 , 置 盐冰裕内 冷却 , 滴加预 冷 的 。 毫升剧烈振摇 一 分 钟 , 约 一 。, 加干燥的 碳 酸 钾 克 , 再振摇 分钟 , 迅速滤 至放有炒过的无水 硫酸钠的抽滤 瓶中 , 再过滤 , 用 乙酸 乙酪洗 次 , 压干 , 滤液于礴扩 以 下 减 压浓缩得无色透明油状 一脯 氨 酸甲酷 克 , 产率 。 。 二 一脯氨酸胺 一 。 一 , 的制备 称取 克 一脯 氨酸甲酷 毫克分子 , 溶于 毫升干甲醇中 , 置冰盐 浴 冷 却至 一 左 右 , 通干氨至饱 析出 , 过滤收集 , 干燥后得 克 , 也 · 。。。 一 , 产率 。 三 、 一脯氨酞胺的制备 , 图 一 一脯氨酸甲醋的制备 。 一脯氨酸甲酷 盐 酸 盐 一 ’ 的制备 称取 克 一脯氨酸 毫克 ‘ 分子 溶于 毫升干甲醇中 , 置盐冰浴冷却 , 通 至 饱和 , 于室温放置过夜 。 次日减压浓缩抽去溶剂及 和 , 将瓶 口扎紧 , 于室温放置 天 。 然后 , 先于冰 裕中通空气赶走部分氮气 , 再减压蒸千 得 无 色 固 体 , 加少量千甲醇 , 减压蒸干 , 反复 次 , 加苯 毫 升 , 减压蒸干 , 反复 次 , 得无色固体 一脯 氨 酞 胺 克 , 用苯重结晶 , 干燥后得 克 毫 克 分 子 , · 一 , 产率 。 四 、 一焦谷氨酸 、 一组氨酸甲醋 · 。 一 的制备 图 自 氏 一 , 盗 尹 一 一门卜 亡 一 一 二‘ 。 图 洲 材 一「 一 · 一 盗 , 产付 , ’甲 ’“ 。 双场 护产 一 一 一 三。 护夕 尹 产 一 谊一 一 一 图 年第 期 , 了 一 一组氛酸甲醋 一 的制备 图 称取 克 一 一 · 毫克分 子 , 溶于 毫升水中 , 加热溶解后 , 于冰盐浴冷 却 , 加入 毫升 , 剧烈振摇 分钟 , 一 , 再加入 毫升冰冷的氯仿 事 先 用无水 碳酸钠干燥 , 振摇 分钟 , 迅速抽滤至装有干燥的 无水硫酸钠的抽滤瓶中 , 再过滤至梨形瓶中 , 滤渣 用舰仿洗两次 , 合并滤液 , 于 水浴减 压 浓 缩 得油状 一组氨酸甲醋 。 克 , 产率 以上 。 二 一焦谷氨酞 、 一组氨酸甲醋的制备 称取 一 克 毫克分子 溶 于 毫升 处理过的二甲基甲疏胺 中。 将上述 制 备的 一 克 毫克分子 , 溶于 毫 升 中 , 二者混合后 , 于冰浴冷至 “ 。 另取 。 克二环 己基碳二亚胺 毫克分子 溶 于 毫升 中 , 于冰浴冷至 后 , 边搅边滴入 上述混合溶液中 , 继续搅拌两小时 , 放冰箱过夜 。 次 日 , 加两滴冰醋酸 , 过滤除去 , 滤液于 以下浓缩至约 毫升时 , 又有 白色结晶析出 , 趁热过滤 , 用 洗 , 合并滤洗液 , 继续浓缩至 一 毫升 , 加乙酸乙酷 , 使 一 一 沉淀 , 直至沉淀完全 , 置冰箱放置数小时 , 得无色结晶 , 千燥 后 得 粗 品 一 · 一 。 。 克 , 经甲醇重结晶得 克 , 一 分解 , 产率 。 。 口 代 一 一 · · 去 洲 叹守尹 。 一 一呈 艺一 尽 一 一 一 一 , 一 二 一 二。 · 图 元素分析 , 。 。 。 理论值 , , · 实验值 。 , , 五 、 一焦谷氨酞 · 一组 氨 酞阱 · · 一 一 的制备‘ 图 称取 克 一 · 一 · 。 毫克 分子 溶于 毫升干甲醉 , 于盐冰浴冷却至 一 后 , 加入 毫升 水合阱 , 置冰箱过夜 。 次 日 , 过建收集无色结晶 , 用甲醇 乙醚 洗涤 , 至洗涤液 近中性 , 干燥后得 克 一 少 一 。 元素分析 。 理论值 , 。 , 实验值 。 , 。 六 、 一焦谷氨酞 · 一组氨酞 · 一脯氨酞胺 · 一 · 一 · , 的制备 图 称取 克 一 · 一 · 毫克 分子 , ‘ 在。“ 溶于 毫升 及 毫升二甲基亚 矾 中 , 搅拌 分钟后 , 加入 毫升 , 约半小时溶完 。 用干 冰 冷 却 至 一 “ , 滴加 毫升亚硝酸叔丁 醋 , 反 应 液 于 一一一 一一一 一 一 】 —一 · 一 一 一 了 爵 一 祷, 一一一 护 一 一 叶卜 一 一 一 ℃ 一 ℃ 厂 一 一 厂 一 · 一 、 · 一 · 图 多 少 津 医 药 · 一 至 一 搅拌反应半小时 , 于 一 ” 滴加 入 毫升 毫克分子 三 乙胺 , 约为 , 再加 入 。 克 一 · 毫克分子 溶 于 毫 升 及 毫升 混 合 溶 液 。 反 应 液 在 一 反应半小时 , 。。 反应 小时 , 然后转 冰 箱 反应过夜 。 次 日 , 过滤除去三 乙胺盐酸盐 , 滤液于 一 减压浓缩至约 毫升 , 加 人 毫升甲 醇 , 以 毫升处理过的四氢峡喃 及 毫 升处理过的乙醚混合液沉淀 , 得微黄色枯状固体 , 密闭抽滤 , 除去滤液 , 残渣再用 毫升甲醇溶解 , 用 毫升 及 毫升乙醚混合液沉淀 , 如 此 重复 次 , 于 。真空干燥后 得 白 色 粉 末状固体 一 一 · 一 粗品 。 克 。 七 、 一焦谷氨酞 一组氨酞 · 一脯氨酞 胺的 精制 一 硅胶的处理 取 一 目硅胶 , 用热 水授泡过夜 。 次 日 , 倾去上清液 , 用热蒸馏水洗 一 次 , 再分别用甲醇 , 氯仿洗 一 次 , 待有机 溶剂挥发后 , 于 一 遵 烤箱烤 一 小时 。 二 装柱 干装法 厘米 将处理 好的硅胶 克 , 通过大颈漏斗匀速倒入层 析 柱 , 待装满后 , 取下层析柱 , 于桌面上垂直 向 下 搜 几 次 , 使硅胶紧而均匀 。 三 加样 称 取 一 一 一 。 粗品 克 , 溶于 毫升氯仿 甲醇 混合 液中 , 加入 克硅胶 , 使成糊状 , 减压抽去溶剂 , 至颗粒松散 , 但又不十分干燥 , 然后加 于 层 析 柱 顶 , 上面铺一块滤纸 , 以防洗脱剂将硅 胶 冲 松 浮 起 。 四 洗脱 用氛仿 甲醇 为 洗 脱 剂 , 每 分钟收集 毫升 , 合并 反应阳性 , 呜嗓醒反应阴性部分的洗脱液 , 减压浓缩得白色泡 沫状固体粉末 , 置 。 真空干燥得 毫 克 , 精制产率 。 八 、 一 , 一酒石酸盐的结晶‘ 称取 毫克纯 溶于 毫 升 蒸 馏 水 中 另取 毫克 , 一酒石酸溶于 毫升无水乙醇 加入 溶液中 , 置冰箱放 天 , 加 毫升无 水 乙醉 , 室温放置 天 , 得 白色结晶 , 过滤 , 用适 量 乙醉洗涤 , 真空 干 燥 , 一 , 晶形如图 。 图 一 一 酒石酸盐结晶 九 、 的分析卜气 一 产品经高压电泳鉴定 伏特 , 毫 安 , 分钟 冰 醋 酸 甲 酸 水 · 。 , 试剂显色为单点 , 呜嗓 醒反应阴性 。 二 元素分析 。 理论值 , 。 , 实验值 。 , 。 三 氨基酸组成分析 。 , , 。 四 红外光谱 一 甲醇 , 说 明 环谷氨酸的内酞胺结构 。 五 核磁共振谱 方 , , 一 。 。 , , 一 , ,“一 魂 一 , , 一 、 及 一 。 。 , , 占 , 占 , 一 , , , 月, 月, 一 。 。 一 。 , , 月一月, 丫 , 丫 , 一 及月, 月, 丫 , 丫 , 一 一 , 一酒石酸盐核磁共振谱 古 。 , , 一 。 , , 一 , , 一 · , , 及价 一酒石酸 弓 一 , 一 , 及 一 。 , 占 , 占 , 一 。 , 月, 户, 一 一 , 月, 月, 丫 , 丫 , 一 夕 年第 期 多 及月, 日, 丫 , 丫 , 一 六 质谱 相对丰度 扭 相对丰度 相对丰度 。 马 质荷比相对应的结构如 图 、 以上数据与资料基本一致 。证明了合成的 结构正确 。 射后 小时 , 每只小白鼠腹腔注射三碘甲腺原氮酸 。。 微克 。 次 日晨 , 从小白鼠一侧眼静脉丛取 血 。 毫升 , 再以腹腔注射不同浓度的合成 生 理盐水溶液 。 毫升 , 分别注射 。 , , , , , 毫微克 。 小时后 , 再 从另侧眼静脉丛 取血。 毫升 。 以生理盐水作对照 , 每 组试验小白 鼠各 只 , 每个血样标本经过称重后于井型闪烁计 数器中计数 , 计算每毫克血样每分钟脉冲数 毫克 。 反应率 二 注射 后的 奄克 注射 前的 奄克 。。 甲 。 ,。 。 求出每组平均值 , 与对照组相比 , 注射 组反应率均大于对照组 , 。 , 有极显著性差 异 , 表示合成的 有生物活性 。 如果以对照组反应率为 , 校正后所得反应 率的校正值作为纵坐标 , 以 毫微克为横 坐标 图 , 根据 值测验回归系数的显著性 。 。· , 线性不显著 , 表明线性关系不够理想 , 此点有待进一步重复试脸 。 。 钵 。 一 尹们 , 对照 忍一 ‘徽克 对吸生林 矛口月 、﹃‘悦图 图 注射荆 与血流中 释放 的关系 , 考 资 料 、 产图 , 。 生物活性洲定 , 。一“ 选用雄性小白鼠 , 体重 一 克 , 以低碘饲料 和燕馏水喂养 一 天 置恒温箱 。 第 天 或第 天每只小白鼠皮下注射‘ , 碘 微 居 里 。 注 , 君 。 恤位 , , 。 , , 中国科学院上海生化所多肤激素组 生物化举与 生物物理学报 , , , 。 丫 , , , , 也 , 透 ‘ 。 中 。 , 魂魂 , 同上 , , 。 同上 , 魂‘ , 比 七公 , ‘ , , , , , , , 天 津 医 药 ·