3实验三粪便隐血试验null实验三 粪便隐血试验实验三 粪便隐血试验一、邻联甲苯胺法一、邻联甲苯胺法 【目的】 掌握粪便隐血试验(OBT)邻联甲苯胺法的方法及其评价。
【原理】 血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化过氧化氢分解释放新生态氧,将受体邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。null【操作】
1.制备涂片
2.滴加试剂
3.结果判断
4.报告方式 二、单克隆抗体胶体金法二、单克隆抗体胶体金法 【目的】 熟悉隐血试验的单克隆抗体胶体金检测法。
【原理】 胶体金是由氯化金和枸橼酸合成的胶体物质,具有...
null实验三 粪便隐血试验实验三 粪便隐血试验一、邻联甲苯胺法一、邻联甲苯胺法 【目的】 掌握粪便隐血试验(OBT)邻联甲苯胺法的
及其评价。
【原理】 血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化过氧化氢分解释放新生态氧,将受体邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。null【操作】
1.制备涂片
2.滴加试剂
3.结果判断
4.报告方式 二、单克隆抗体胶体金法二、单克隆抗体胶体金法 【目的】 熟悉隐血试验的单克隆抗体胶体金检测法。
【原理】 胶体金是由氯化金和枸橼酸合成的胶体物质,具有胶体化的性质,呈紫红色。特制的乙酸纤维膜上含均匀分布的胶体金标记的羊抗人Hb单克隆抗体和无关胶体金标记鼠IgG,膜的上端由上至下依次包被羊抗鼠IgG抗体和羊抗人Hb多抗。检测时,试纸条浸入被检的稀释粪便液中,粪便悬液通过层析的作用,沿着试纸条上行,如粪便null 中含有Hb,在上行过程中与胶体金标记羊抗人Hb单克隆抗体结合,待行至羊抗人Hb多抗体线时,形成金标记的抗人Hb单抗-粪Hb-羊抗人Hb多抗复合物,在纸条上显现一条紫红色线,即为隐血试验阳性;试带上无关的金标记鼠IgG随粪便悬液上行至羊抗鼠IgG处时,与之结合形成又一条紫红色线,为阴性对照线(试剂质控线),即隐血试验阳性时试带出现2条紫红色线,如果只显现1条紫红色线为隐血试验阴性,试带无紫红色线出现即说明已失效。null【操作】
1.制备粪便悬液
2.浸试带
3.结果判断
4.报告方式 null 【注意事项】
1.实验所用的器材用具要清洁、干净无酸碱残留,无铁剂、血迹等污染。
2.试剂
(1)化学法试剂:H202最好新鲜配制,做 标本检测时应做阴、阳性对照试验。
(2)金标试纸质量:如试纸渗透性差,粪液渗透不良,可造成假阴性。null 3.结果
(1)化学法:
①反应时间不足,尤其温度低时;
② 粪便中存在抑制过氧化物酶的物质;
③粪便留取时间较长,血红蛋白被细胞分解。
(2)胶体金法:
①上消化道出血患者有时可因为血红蛋白经过肠 道消化酶降解变性而不具有原来的免疫原性,单克隆抗体与血红蛋白抗原不匹配;
②消化道出血过多,抗原过剩出现后带现象;
③粪便留取时间较长,血红蛋白被细胞分解。
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