人胎盘免疫调节因子对亲细胞性抗体产生的影响

赣 南 医 学 院 学 报 1995年 Ca 内流也应有抑制作用 “ 。本实验结果 明，XT和钙通道阻断剂维拉帕米对螗蜍 离体坐骨神经动作电位振幅的抑制程度大致 相同，又都能明显提高兔心室电致颤阈，这 些均提示 XT对钙通道有阻断作用 至于 xT确切的抗心律失常作用机制，尚有待于 进一步研究。 参考文献 l 《全 国中草药汇编》编写组．全国 中草 药汇编 {上 册 )．第 一版 ．北 京 ： 人 民 卫 生 出版 杜 ， 1975．781～782 2 向仁德，等 中草药，1984，15(9)：14 向仁德，等．中草药，1986 17(2)：6 陈志存，等冲 药通报+ 1986， Il(2)：50 陈志存，等．中国中药杂志， 1990．15 (5)：48 谢华 等 中国药理学报， 1994，15(4)：37I 上官玮 等 中国药理 通讯，1994，11(3)：25 张志祖 等 中国 中 药杂 志 ，1995，2O(2) II4 9 连 其辣， 等 中国 中药 杂志 1992， I7(5)： 3o6 J0 中国药理学会编．药理学进展，心 血管药理分 册 {1980) 箭 一版t 北京： 人 民 卫生出 版 社， 1981．136～ 157 {收稿 tq期：1995-05,-J4) Studies Oil the pharmacodynamics of xanthotoxol I．Antiarrhythmic Effects Lian Qishen．et al tDepartmenl ofPharttmcology) Xanthotoxol(XT) is a coumarin isolated fro111 ethyl alcohol extracts of the fruits of cnidium monnieri(L) Cusson It is not only effective in preventing ventricular fibrillation induced by chloroform in mice or by calcium chloride in rats， but is effective in treating arrhythmiainduced by aconitineinrats．It can raisethethrethold ofventrieularfibrillationin— duced by electrical stimulation in rabbits Furthermore， XT can inhibit the action potential amplitude of isolated sciatic nerves in toads．These results indicate that XT possesses antiarrhyihmic effects．The acute L D l1 of XT in mice is iv 47 ． 0 mg·kg Key WOrds：Coumarins／pharmacodynamics； Xanthot0xoi； 一 Arrhythmia／chemically induced； Arrhythmia／drug therapy 一 80一 、 维普资讯 http://www.cqvip.com ． 。一 第15卷 第2期 赣 南 医 学 院 学 报 L o F G NNAN M EDicAL CO LLEG E 人胎盘免疫调节因子对亲细胞性抗体产生的影响 严 宜明 童竞亚 ， 腿 学寰舯 心 ㈣ 提 要 应用大鼠被动肥大细胞脱颗粒试验，研究丁人胎盘免疫调节因子 (HPIF)对大双亲 细晌性 抗体产 生 的影响 研究结 果表 明：HPIF能显 著地 抑制 大 鼠亲细 胞 性抗体 的产 生 (P<0 00 1 J 有力地支待丁HPIF在临床上治疗 I型变态反应性疾病所取得的明显疗效。 关键词 胎盘提取物；亲细胞性抗体：肥太细胞脱颗粒；大鼠 lgE是参与I型变态反应的主要抗体， 这种亲细胞性抗体的 Fc受体有两类，一类 为高亲和力的 IgE Fc受休，亦称 Fce,RI， 另 一类为低 亲和 力的 lgE Fc受休，亦称 FcP,R 。肥大细胞上台有大量的 Fc+：R．，可 与 lgE Fc牢 固结合，在有适量相应抗原存 在时，抗原与肥 大细胞膜 上的 IgE结 合， 因 IgE桥联而移位、变构，激活肥大细胞 内的酶，从而使肥大细胞脱颗粒 1gG 也 有上述作用，但比 IgE弱得多。人胎盘免 疫 调 节 因 子 《 Human Placental 1mmunoregulatory Factor． HPIF)是从健 康产妇胎盘中提取的具有较强免疫活性的小 分子混合物 临床应用时，发现 H P1F对I 型变态反应有 明显的治疗效果 。为 了 解其作用原理，我们用大鼠被动肥大细胞脱 颗粒试验，研究了H PIF对亲细胞性抗体产 生的影响。 1 材料与方法 ，．， 动物 采用 SD 大 鼠 《广卅I自云 山制 药厂动物室提供，动物质量检测台格证书 号：94030)，雌性，体重 15O～20Og。 2 药品与试剂 冻干 HPIF：广东省生物制品研究所 生产，批号：930302。 嘿’百 日咳死菌苗 学鸡蛋清：本室 自制。 · l含 Ca ，Mg 的 Hanks液。 。 生理盐水配制的 O．025％中性红。 ，j 方 法 按文献 ” 所述方法并加以改良，具体 方法如下：用 2％ 的鸡 蛋清 O．5ml给 体重 1 50～200g的 5只雌性 SD 大鼠肌肉注射一 次。同时给大鼠腹腔注射洗涤过三次的百 日 咳死菌苗 1ml(2x 10 个细菌 ／m1)。于注 射后第 15天用乙醚麻 醉，颈动脉放血．分 离血清。将 5只大鼠的血清混台．4+C保 存 另 5只条件相同的 SD 大鼠，除注射与 上述 5只鼠相等量的 2％的鸡 蛋清及百 日咳 死菌苗 {2×lO⋯个细菌 ／mI)外，每天肌 肉注射 HPIF1ml，也于第 15天乙醚麻醉， 解剖取血，分离血清 另取正常 sD大鼠2 只，颈动脉放血致死后，由腹腔注射预温的 含 Ca“、 Mg Hanks液 10ml至腹 腔 中， 轻揉 2min后 ，取腹 腔液 1 000rpm 离心 15min，弃上清，加 Hanks液 2ml，摇匀， 即为肥大细胞悬液 肥大细胞分 为 4组试 验，每组 4管，每管 O 2ml 试验时 4组分 别与下述物质混和：l Hanks液 O．1ml， 大 鼠抗鸡 蛋清抗血清 0．1ml， 注射 HPIF大 鼠的抗鸡蛋清抗血清 O．1ml，· 正常sD大鼠 血清 O．1m1。于 37℃水温箱中孵育 1h，促 8I～ 维普资讯 http://www.cqvip.com 赣 南 医 学 院 学 报 995 使亲细胞性抗体吸附于肥大细胞上，然后 1 000rpm离心 5rain，除去上清，加 Hanks 液 0．2ml恢 复原体积，再加上 Hanks液稀 释 至 10-*的鸡 蛋 清 0．2ml，37℃ 中作 用 10rain+然后 每管 加人 用生理盐水配成 的 0．025％中性红溶液 30#1，室温放置 5rain后 在显微镜下观察。 如果肥 大细胞形态为圆 形，有完好的细胞膜，边缘光滑、核不着 色，细胞内有均匀分布的石棉红色颗粒，即 判为正常胱大细胞 (图 1)。凡有以下 3点 之一的肥大细胞 形状即判 为肥 大细胞脱颗 粒：．qc肥大细胞膨胀，边缘不规则 (图 2)； 学胞膜部分破裂，颗粒外排 (图 3)；孕颗粒 内容物排空，出现空泡 (图 3)。每张玻片 数 200个肥大细胞，并按下式计算脱颗粒肥 大细胞的百分率 脱颗粒肥大刿胞 分率；堕 昌 器； } x ∞ 圈 1 正常肥大细胞×锄I HJ 圉 2 日巴大细胞膨胀越 缘不整 1000 围 3 肥大细胞捧出眉粒，出琨空泡x 11100 2 结果 HPIF对 SD 大鼠亲细胞性抗体产生的 影响详见附表 从附表结果可看 出： i 1，4 组肥 大细 胞 均有 非特异性 的脱颗 粒现 象 (10．67±2．30，13．35±5 82)；· 注射鸡蛋清 产生的亲细胞性抗体与肥大细胞结台、在与 相同的适量蛋清抗原结合时，肥大细胞脱颗 粒作用显著 增加 (43．80±13．19)；⑨注射 HPIF的大鼠，吸附在肥大细胞上的亲细胞 性抗体明显减少，故在与相同适量的蛋清抗 原 作 用 时 ， 肥 大细 胞 脱 颗 粒 明显 减 少 (23．03± 11．73)。 附衰 HPIF对 SD太鼠亲细胞性抗体产生的 畸 3 讨论 - ，亲细胞性抗体对 同种属动物肥大细胞 有强烈韵吸附作用，lgE以其 Fc的CH3部 位与 Fc~,R1牢固结合 ‘ 体内如果 IgE含 量增高．附着在 肥大细胞上的 IgE就多， 一 82一 在同等条件下，脱颗粒的肥大细胞就多．越 易产生 I型变态 反应。 27lgE抗体生成的调节机制 已取得很大 进展。早在 20年代初期，Tada等发现新生 期切除胸腺的大鼠不能合成较大量的 [gE． 维普资讯 http://www.cqvip.com 2期 严宜明，等 人胎盘免疫调节因子对亲细胞性抗体产生的影响 表 明在 IgE反 应 中需 要 T 辅助 细 胞 的 参与” 。[gE的产生受 TH(cDj)与 Ts (cDj)细胞的调节，如果 Ts细胞功能或 数 量低 下，对 合成 [gE的 B细胞 不能控 制，致使 IgE的合成增加。体内 外实验 证明HPIF可使过敏体质患者 cDj细胞低 下调至正常 “ ”，从而提示 HP[F通过提 高抑制性 T细胞后抑制 B细胞使 [gE产生 降低。本文研究结果表明：HP[F能显著地 抑 制 SD 大 鼠 亲 细 胞 性 抗 体 的 产 生 (P<0．001)。有力地支持了 HP[F在临床上 治疗 I型变态反应性疾 病所取得的明显疗 效。初步发现了其作用的环节。故 HPIF不 失为治疗I型变态反应性疾病的良好制剂。 固本项研究改进了肥大细胞被动脱颗粒 方法t使试管内所有肥大细胞颗粒均可均匀 着色，便于观察。避免了原方法中因中性红 在盖玻片上分布不均匀，致玻片上肥大细胞 着色不均，不利于观察的缺点。 参考文献 1 冯益真t 等．胎盘肚治疗d,JL哮 喘50侧观察．见： 张光曙主编 胎盘转移因子的研究和应用．北京： 中国科学技术出版社，1992 3 19 2 刘月新，等．胎盘多肽治疗哮 喘的抗过敏研 究 见：张光曙主编．胎盘转移日子的研究和应用．北 京：中国科学技术出版社，1992．3 19 3 李仪 奎主编．中草药药理实验方 法学．第1版．上 悔：上海科技出版社．199I．I203 4 B．J．Suluttoo， H．J．Go：lid．The human IgE net- WOrk．Naturc， I993， 366 {6454l： 42l 5 Tada T， Okumura K． Regulation of homoeytotropie antibody forrnatj0 】 the rat- Effect of thymectomy and speleneetomy． 1mmunol， 197 l。 l06： l019 6 严宜 明。等 人胎盘免疫调节因子对过敏体质患 者 T细胞亚群的影响 (待发表) (收倍 H靳： 1995--05--08) Effects of Human Placental Immunoregulatory Factor on the Production of H omocytotropie,Antibody in Rats Yan Yiming。et al fCcnl ral Laboratory) the effects of human placental immunoregulatory factor《HPIF) on the production of homocytotro pic antibody in rats were studied with rats mastocyte passive degranulation test．the results have shown that HPIF may obviously inhibit the production of hOmOcytOtrOpic antibody in rats．The study has potently suppo rted that HPIF has obvious ef- feet on curing type【allergy． Key words：placental extract； homocytotropic antibo dy； mastocyte degra nulation； rat 一 83 ● — 。 维普资讯 http://www.cqvip.com