HPLC法测定维生素C制剂

810 中国药事2008年第22卷第9期 HPLC法测定维生素C制剂 李文玉，李虎将1(吉林省通化市食品药品检验所，通化134000；，通化市疾病预防控制中心) 摘要： 对2005年版《中国药典》收栽的维生素C片、维生素C注射液及维生素C丸含量测定进行 改进，建立HPLC法测定维生素C含量。采用KromasilC18色谱柱；以甲醇一O．1％磷酸(5：95)为流动 相；柱温：25"C；流速：0．8mL·min-1；检测波长：242nm。维生素C进样量在0．0618～0．5562t．￡g范围 内呈良好的线性关系；平均回收率(竹=6)为100．o％，RSD为0．33％。本方法简便、快速、结果准确， 可作为维生素C多种制剂的质量控制。 关键词：HPLC法；维生素C片；维生素C注射液；维生素C丸；维生素C；含量测定 中图分类号：R927．2文献标识码：A 文章编号：1002—7777(2008)09—0810—03 DeterminationofVitaminCPreparationsbyHPLC LiWenyuandLiHujian91(JilinTonghuaInstituteforFoodandDrugControl，Tonghua134000； 1 TonghuaInstituteforDiseasePreventionContr01Centre) ABSTRACTThemethodsforthedeterminationofVitaminCTablets，VitaminCInjectionandVitaminC PillsinChP(2005)wereimproved．AnHPLCmethodwasdevelopedforthedeterminationofVitaminC Tablets．TheHPLCsystemconsistedofC18column，withmethanol一0．1％phosphoricacid(5：95)as mobilephase，at25℃．Thewavelengthwas242nrmTheflowratewas0．8mL·mifflandtheinjection volumewaslOlL．ThelinearrangerofvitaminCwas0．0618～O．5562pg．Theaveragerecoveryforthe compoundwas100．O％(RSD—O．33％，咒一6)．ThemethodiSsimple，quickandaccurate．ItiSsuitable forqualitycontrolofmanykindsofvitaminCpreparation． KEYWORDsHPLC：VitaminCTablets；VitaminCInjection；VitaminCPills；vitaminC； determination 维生素C的化学成分为I，抗坏血酸，是维生 素类药[1]。其制剂维生素C片、维生素C注射液 收载于《中国药典》2005年版二部，维生素C丸 收载于《卫生部药品标准》二部第二册。由于维生 素C具有很强的还原性，因此在以上质量检验标 准中均采用氧化还原滴定法进行含量测定。本文参 考有关文献[z喝]采用高效液相色谱法测定维生C制 剂的含量，具有适用性广，干扰少，操作简便、准 确、重复性、回收率和精密度均较好的特点，可用 于本制剂的质量控制。 1仪器与试药 LC-2010AHT型高效相色谱仪(日本岛津)， LC-solution工作站；AEl63型电子天平(瑞 士梅特勒)；UV-260型紫外可见分光光度计(日 本岛津)。 维生素C对照品(中国药品生物制品检验所， 批号：100425—200301；规格：50mg；供含量测定 用)。维生素C制剂(购自药店，编号为001， 002，003，004；其中001、002为维生素C片， 003为维生素C注射液，004为维生素C丸)。甲 醇为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为分析纯。 2方法与结果 2．1色谱条件 色谱柱：KromasilC18(4．6mm×200ram， 5肛m)；流动相：甲醇一0．1％磷酸(5：95)；柱温： 25℃；流速：0．8mL·rain-1；检测波长：242nm； 作者简介：李文玉，本科，副主任药师；Tel：13944596351；E-mail：thlwy@126．coEfl 万方数据 中国药事2008年第22卷第9期 811 理论板数按维生素C峰计算应不低于3000。 2．2对照品溶液的制备 精密称取维生素C对照品20mg，置25mL量 瓶中，加1％偏磷酸溶液溶解并稀释至刻度，摇 匀；精密量取1mL，置25mL量瓶中，加1％偏磷 酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL中含维 生素C32弘g)。 2．3供试品溶液的制备 1 a ^ 【● ， 取本品适量(约相当于维生素C20mg)，置 25mL量瓶中，加1％偏磷酸溶液溶解并稀释至刻 度，摇匀，精密量取1mL，置25mL量瓶中，加 1％偏磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 2．4测定法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液及1％ 偏磷酸溶液各lo弘L，按上述色谱条件进样，测定， 结果见图1。 0．0 1．0 20 304．0 50Umin 0．0 1 0 203．04050Umin 0010 2．0304．05．0帅矾 a．对照品fb．供试品；c．空白溶液；1．维生素C。 图l维生素c制剂HPLC色谱图 2．5线性关系考察 精密称取维生素C对照品适量，加1％偏磷酸 制成每lmL含32．10肛g的溶液，分别精密吸取2， 6，10，14，189L测定，以对照品进样量为横坐 标，以峰面积为纵坐标，计算回归方程，结果明 维生素C进样量在0．0618～0．5562弘g范围内，呈 良好的线性关系，符合外标法定量测定的要求。回 归方程为： Y一3．972084×106X+2．298×103，．一1．0000 2．6稳定性试验 取同一供试品溶液(编号001)，在室温条件 下分别放置0，2，4，6，8小时后进样测定，结果 维生素C峰面积的RSD为0．33％，表明供试品溶 液在8小时内稳定。 2．7精密度试验 精密吸取供试品溶液(编号001)，连续进样5 次，测定维生素C峰面积。结果维生素C峰面积 的RSD为0．25％。 2．8重复性试验 取同一供试品(编号001)，依正文方法独立 测定5次，平均含量为72．67％，其RSD为 0．31％。 2．9加样回收试验 2．9．1维生素C片 取已知含量的供试品(编号：001规格100mg· 片～，含量为72．67％平均片重o．13629)，研细，称 取6份，每份约0．0149，精密称定，精密加入维 生素C约10mg，依法测定，计算回收率，结果见 表l。 表1 维生素C片加样回收率试验结果(n=6) 2．9．2维生素C注射液 取已知含量的供试品(编号：003规格2mL： 0．59含量为25．2％)，分别精密量取6份，每份 0．04mL，精密加入维生素C约10mg，依法测定， 计算回收率，结果见表2。 表2维生素C注射液加样回收率试验结果(n=6) 10．08 lO．08 10．08 10．08 lO．08 lO．08 10．01 10．03 10．12 10．20 10．16 10．15 20．09 20．16 20．18 20．25 20．25 20．23 2．9．3维生素C丸 取已知含量的供试品(编号：004规格 』t5●Ol●OO1 l 1 8 5 1 O ● ● ● ● ● ● O 1 9 9 O O O O 9 9 O O l l l l 9 3 9 3 8 6 2 8 5 5 5 7 ● ● ● ● ● ● O O O O O O 2 2 2 2 Z 2 7 O 2 2 5 8 O 3 l 2 3 l ● ● ● ● ● ● O O O O O O；i 1 2 9 6 2 8 2 4 4 3 2 5 ● ● ● ● ● ● O O O O O O 82●O0●0Ol O 5 8 7 1 O ● ● ● ● ● ● O O 9 9 O O 0 O 9 9 O O 万方数据 812 中国药事2008年第22卷第9期 100mg／丸含量为51．1％平均丸重0．20139)，研 细，称取6份，每份约0．0209，精密称定，精密 加入维生素C对照品约10mg，依法测定，计算回 收率，结果见表3。 表3维生素C丸加样回收率试验结果(打=6) O．49 O．47 O．24 O．23 O．25 O．23 10．21 10．33 10．20 lO．30 10．Z6 10．03 20．68 20．80 20．42 20．52 20．52 20．28 2．10样品含量测定 依正文方法及药典方法测定4种样品，结果见 收，因此确定242nm为本实验的测定波长。 3．2色谱柱的选择 我们以该分离方法对不同色谱柱进行考查，结 果本方法具有柱适用性广，稳定性好的特点。 3．3提取溶液的选择 维生素C水溶液在空气中极不稳定，只有在 酸性环境中稳定性较好，因此，我们分别采用不同 浓度的不同溶媒提取，其含量测定结果差异显著， l％偏磷酸作溶媒提取效果及稳定性均好，因此我 们采用1％偏磷酸作为提取溶剂。 采用1％偏磷酸作溶媒，加不同量的Vc对照 品配制等差浓度的Vc溶液，用本方法进行含量测 定，结果显示，溶媒对Vc含量测定无影响，不干 扰含量测定。 参考文献： 表4。 [1] 中国药典[s]．二部。2005：669． 表4 样品中维生素C的含量测定结果 ％ [2]平成斌，葛红，刘忠·等-HPLC法测定维牛素C葡萄糖 绾粤 期榕 堑璺鎏 望!竺鲨 (3)：67． C 20078————————————：———————————————一 注射液中维生素 的含量[J]．中国药品标准， ，编号规格———— L3，： 标示百分含量RSD标示百分含量RSD [3] 赵建峰．HPLC法测定维牛素C口含片中维生素C的含量 001100mg’片～ 98·9 0·50 98·9 0·31 [J]．上海医药，2006，27(3)：115． 00250r唱‘片一1 95·8 0·38 95·9 0·25 [4]史亚军，唐志书。崔春利．HPLC测定决明降脂片中维生索 003o·59。2mL：100．4 o·47 100·8 o·20 C的含量[J]．陕西中医学院学报，2005，28(5)：61．』些■竺型L立￡——』丝叠———生塑———』丝生——旦 [5] 胡晓艳．HPLc测定力度申泡腾片中维生素C的含量[J]． ．⋯． 、 广东药学，2005，15(1)：8· 3 讨论 [6] 单鸣秋，张丽，孔铭。等．反相高效液相色谱法测定许氏葡 3．1 测定波长的选择 金胶囊中维生素C的含量[J]．时珍国医国药，2003，14 取维生素C对照品适量，用1％偏磷酸溶液配 (6)：332· 璧釜譬垄。粤。：：磐登：在200nm：竺竺羔口1嚣嚣：0瓮轰，鬣絮芑嚣肿 围内进行扫描，维生素C在242．6nm处有最大吸 ⋯⋯⋯⋯～⋯一⋯ 。’ (上接第809页)藿香正气口服液、藿香正气水、 藿香正气软胶囊的质量标准，结合本品的处方、工 艺，建议本品每片含厚朴酚、和厚朴酚总量应在 0．6mg以上。目前，对本品其它组份的研究也有 很多，采用TLC法对方中白芷、广藿香、陈皮、 白术进行定性鉴别，采用GC法测定百秋李醇的含 量[4]，高效液相色谱法测定藿香正气水中橙皮苷的 含量[5]等，这些都有利于制定出更加完善的质量标 准，确保药品质量。 由于中药材的产地、采收、加工、贮藏，生产 等多方面的因素对中成药的质量均有较大的影 响，因而生产厂家应对其原材料进行严格控制，全 面检验，严格按生产工艺进行生产，确保成品质 量，保证疗效。 参考文献： 卫生部药品标准IS]．中药成方制剂．第十五册，1998： 221． 中国药典[s]．一部，2005：660，176． 孙业成，付凌燕，李亚荣．HPLC法测定藿香正气片厚朴 酚、和厚朴酚含量[J]．中国药师，2006，9(6)：522． 张小兵，任锦文，汤莉，等．加味藿香正气丸的质量标准研 究[J]．解放军药学学报，2007。23(4)：291． 吴丽璇．高效液相色法测定藿香正气水中橙皮苷的含量 [J]．中国药师．2006，9(1)：43． 盂蕾蕾，李梦，王国平．HPLC法测定藿香正气胶囊中厚朴 酚与和厚朴酚的含量[J]．齐鲁药事，2007，26(8)：466． 钟小群，蔡庆顺，李玉云，等．HPLC测定藿香正气胶囊厚 朴酚及和厚朴酚含量[J]．中成药，2006。28(2)：288． 吴丽璇．反相高效液相色谱法测定藿香正气胶囊中厚朴酚和 厚朴酚的含量[J]．海峡药学，2005，17(6)：92． 6L●OO●O01 8 O 8 9 1 2 ● ● ● ● ● ● 9 O 9 9 O O 9 O 9 9 O O ] ]] ] ] ] ] ] 口 心口 艮 口 口 口 I竺l 万方数据 HPLC法测定维生素C制剂 作者： 李文玉， 李虎将， Li Wenyu， Li Hujiang 作者单位： 李文玉,Li Wenyu(吉林省通化市食品药品检验所,通化,134000)， 李虎将,Li Hujiang(通化 市疾病预防控制中心) 刊名： 中国药事 英文刊名： CHINESE PHARMACEUTICAL AFFAIRS 年，卷(期)： 2008,22(9) 被引用次数： 1次 参考文献(7条) 1.中华人民共和国药典(二部) 2005 2.平成斌.葛红.刘忠 HPLC法测定维生素C葡萄糖注射液中维生素C的含量[期刊论文]-中国药品标准 2007(03) 3.赵建峰 HPLC法测定维生素C口含片中维生素C的含量[期刊论文]-上海医药 2006(03) 4.史亚军.唐志书.崔春利 HPLC测定决明降脂片中维生素C的含量[期刊论文]-陕西中医学院学报 2005(05) 5.胡晓艳 HPLC测定力度申泡腾片中维生素C的含量[期刊论文]-广东药学 2005(01) 6.单鸣秋.张丽.孔铭 反相高效液相色谱法测定许氏葡金胶囊中维生素C的含量[期刊论文]-时珍国医国药 2003(06) 7.李春成.余丽丽.杨星昊 HPLC法测定Vc银翘片中VC含量的方法[期刊论文]-科技通报 2004(04) 引证文献(1条) 1.杨玉琼 高效液相色谱法测定猕猴桃中VC含量[期刊论文]-安徽农业科学 2009(22) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zhonggys200809024.aspx