人肝癌浸润性单核细胞初步观察及其与预后等因素的关系

� � 冯学胜等 人肝癌浸润性单核细胞初步观察及其与预后等因素的关系 人肝癌浸润性单核细胞初步观察 及其与预后等因素的关系 冯学胜 ‘ 鲍卫 华 ’ 摘要观测经 ! 染色的∀# 例肝细胞性肝癌手术标本石蜡切片中肿瘤浸润性单核细胞 的浸润程度 , 分析了它 与预后等因素的关系 。 结果显示 ∃肿瘤浸润性单核细胞的数量与患者 的性别 、 外周 血 甲胎蛋 白%& ∋ ( )的水亚 等无关 %( ∗ 。+ , − − ) . 与患者年龄 、 /0 感染状态 、包膜的完整性 、肿瘤大小 以及肿瘤 的坏死 程度等有关%( 1 , + ,− ) . 与患者 的预后高度相关%(1 。+ ,� ) 。 此外 , 经用肝动脉结扎加插管合并其他疗法 %如导向治疗 、免疫治疗等)后再手术切除 的标本中肿瘤浸润性单核细胞明显多于未经特殊治疗而直接手术者%( 1 。+ ,� ) 。 上述资料明 ∃肿瘤浸润性单核细 胞 的多少受多种因素的影响 , 综合分析 可为患者的预后等提供有用的信息。 关键词 人肝细胞性肝癌 肿瘤浸润性单核细胞 预后 肝细胞性肝癌 %下称肝癌 )是我国常见的恶 性肿瘤之一 。随着肿瘤免疫学的发展 , 肿瘤浸润 & 2345 6 78 3 ! &((9:;&3:78 7∋ ‘<‘:一 / = > 787;978&9 &83:/75 6 :8 :>> 4873&? ≅ !≅ :8≅ 3 !? &(6 7∋ 4>&8 ;; Α !87≅ ? &∋32 9 Β ΧΔ Ε , Φ Γ Η Ι 9 Β刀 Φ , 一 ; Η Ε ϑ Φ Κ :Ε Λ ΓΒΓ ∃‘Γ Φ , 2 Μ Η Ε Ν ΜΗ Β >七Ο Βϑ Η Ι 4 Ε ΒΠ Φ Κ Λ ΒΓΘ , 2 Μ Η Ε Ν Μ Η Β %Ρ , , , < Ρ ) & Σ Τ Δ Λ Φ Σ Τ Ε Τ Φ ΙΤ Ε Η Ι Η Ε ΓΒΥΤ ΟΘ Ο ΒΚ Φ ΦΓ Φ Ο Η Ν Η ΒΕ Λ Γ Μ Φ ς Η ΓΒΓΒΛ / Π ΒΚ Δ Λ % / 0 ) Α ς Κ Τ ΓΦ ΒΕ % / = & Ν ) Ω Η Λ ς Κ Φ ς Η Κ Φ Ο + 3 Μ Φ Η Ε ΓΒΥ Τ ΟΘ Ω Η Λ Δ Λ Φ Ο Γ Τ Λ Φ Κ Φ Φ Ε − , 9 ΒΠ Φ Κ Γ ΒΛ Λ Δ Φ Λ Φ Φ ΓΒΤ Ε Λ ΞΚ Τ Σ (Η ΓΒΦ Ε ΓΛ Ω ΒΓ Μ Μ Φ ς Η Γ Τ Φ Φ ΙΙΔ ΙΗ Κ Φ Η Κ Φ ΒΕ Τ Σ Η Η % ; ; ) Υ Θ ΒΣ Ψ Σ Δ Ε Τ Μ ΒΛ ΓΤ Φ Μ Φ Σ ΒΛ ΓΚ Θ + Ρ # Τ Ξ − , %− � Ζ ) Λ Η Σ ς ΙΦ Λ Ω Φ Κ Φ / = & Ν ς Τ Λ ΒΓΒΠ Φ ΒΕ Γ Δ Σ Τ Κ ΓΒΛΛ Δ Φ Λ · 3 Μ Φ ς Τ Λ ΒΓΒΠ Φ Κ Η ΓΦ Λ Τ Ξ / = & Ν Τ Ε ΙΘ ΒΕ ΓΔ Σ Τ Κ Γ ΒΛ Λ Δ Φ Λ Τ Κ ΒΕ Η Ο[Η Φ Φ Ε Γ Ε Τ Ε ΓΔ Σ Τ Κ ΓΒΛ ΛΔ Φ Λ Ω Φ Κ Φ Ρ ∀ Ζ Η Ε Ο � � Ζ · / Λ & Ν Ω Η Λ Ο Φ ΓΦ Φ ΓΦ Ο ΒΕ � �Ζ Τ Ξ Φ Η Λ Φ Λ Ω ΒΓΜ ΒΕ ΓΔ Σ Τ Κ Γ ΒΛ Λ Δ Φ Λ Η Ε Ο ∴ ∀ Ζ ΒΕ Λ Δ Κ Κ Τ Δ Ε Ο ΒΕ Ν Ε Τ Ε ΓΔ Σ Τ Κ ΓΒΛ Λ Δ Φ Λ · / Φ & Ν Ω Η Λ Τ Ε ΙΘ ΞΤ Δ Ε Ο ΒΕ Η Ο [Η ΦΦ Ε Γ Ε Τ Ε Γ Δ Σ Τ Κ ΓΙΛ Ψ Λ Δ Φ Λ , ΒΓΛ ς Τ ΛΒΓΒΠ Φ Κ Η ΓΦ Ω Η Λ � # Ζ · 3 Μ Τ Λ Φ Κ Φ Λ Δ ΙΓ Λ ΛΜ Τ Ω ΦΟ ΓΜΗ Γ / = & Ν �− Η Φ Τ Σ Σ Τ Ε ΚΕ Η Κ] Φ Κ ΒΕ ΙΒΠ Φ Κ Γ ΒΛ ΛΔ Φ ΞΚ Τ Ε Ι ς Η Ψ ΓΒΦ Ε ΓΛ Ω ΒΓΜ / 0 一 Κ Φ ΙΗ ΓΦ Ο ; ; + & ΞΓΦ Κ Η Ε ΓΒ一 / = > Τ & Υ Ω Η Λ Κ Η ΟΒΤ ΙΗ Υ Φ ΙΦ Ο Ω Β士Μ ’“, :一 ΒΤ ΟΒΕ Φ Η Ε Ο Η Ο Σ ΒΕ ΒΛ ΓΚ Η ΓΒΤ Ε , Γ ΜΦ Κ Η Ο ΒΤ Η Φ ΓΒΠ ΒΓΘ Τ Ξ ΓΜ Φ ΓΔ Σ Τ Κ , Τ Κ Ν Η Ε Λ Η Ε Ο Υ ΙΤ Τ Ο Ω Φ Κ Φ Φ Τ Δ Ε ΓΦ Κ ΒΕ Σ ΒΕ Β一 Ν Η Σ Σ Η ΦΤ Δ Ε ΓΦ Κ Η Γ Ο Η Θ Ι , < , − , ∴ ΒΕ Ε Δ Ο Φ Σ ΒΦ Φ Υ Φ Η Κ ΒΕ Ν ; ; = Φ Ε Τ Ν Κ Η ΞΓΛ , Η Ε Ο ΓΜ Φ Υ ΒΤ ΟΒΛ ΓΚ ΒΥ Δ ΓΒΤ Ε Η Ε Ο 3 ∃ 8 3 Κ Η ΓΒΤ Ω Η Λ Φ Η ΙΦ Δ ΙΗ ΓΦ Ο · 3 Μ Φ Γ Δ Σ Τ Κ ∃ ΥΙΤ Τ Ο Κ Η Γ Ι Τ Ω Η Λ Ι · − Η Ε Ο Γ Δ Σ Τ Κ ∃ ΙΒΠ Φ Κ Ω Η Λ � + − Τ Ε Ο Η Θ ∴ ΒΕ Φ = ς Φ Κ ΙΣ Φ Ε ΓΗ Ι Ν Κ Τ Δ ς , Κ Φ Λ ς Φ Φ ΓΒΠ Φ �Θ + 2 ς Φ Φ ΒΞΒΦ > Τ & Υ Δ ς ΓΗ ] Φ ΥΘ ΓΔ Σ Τ Κ Ω Η Λ Λ ΒΝ Ε ΒΞΒΨ Φ Η Ε ΓΙΘ Ν Κ Φ Η ΓΦ Κ Γ ΜΗ Ε Ε Τ Ε Λ ς Φ Φ ΒΞΒΦ :Ν ≅ %ς 1 7· , − − ) Τ Ε Ο Η Θ ∴ + 3 Μ Φ Κ Φ Λ Δ ΙΓΛ Ω Φ Κ Φ Φ Ε Φ Τ Δ Κ Η Ν ΒΕ Ν + 3 Μ Φ ΞΒΕ Ο ΒΕ Ν Τ Ξ ΓΜ ΒΛ − Γ Δ ΟΘ Λ ΜΤ Ω ΓΜ Φ ς Τ Λ Λ ΒΥ ΒΙΒΓΘ Τ Ξ Δ Λ ΒΕ Ν ’< ‘:一 Η Ε ΓΒ / = > Τ & Υ ΓΤ ΓΗ Κ Ν Φ Γ Φ Θ ΓΤ Λ Γ Η ΓΒΦ Ο Κ Δ Ν Λ ΓΤ Μ Δ Σ Η Η Ε ; ; · ⊥ Φ Θ _ Τ Κ Ο Λ ∃ Φ ς Η Γ Τ Σ Η Φ ς Η ΓΒΓΒΛ / 0 ΒΚ 、一Λ , & Ε ΓΒΥ Τ ΟΘ > Τ Ε Τ Φ ΙΤ Ε Η Ι :Σ Σ Δ Ε Τ Μ ΒΛ Γ Τ Φ ΜΦ Σ ΒΛ ΓΚΘ , ? Η ΟΒΤ ΒΣ Σ Δ Ε Τ ΓΜ Φ Κ Η ς Θ 上海市 %Ρ , , , < Ρ ) 上 海医科大学肝癌研究所 当代肿瘤学 杂志 � ⎯ ⎯ − 年第 Ρ 卷第 � 期 Χ%)4 ? 8 & : 7 ∋ ; 4 ? ? ! 8 3 7 8 〔二7 :Χ7 ≅ 6 0 7 : + Ρ 8 7 + � � ⎯ ⎯ − 性单核细 胞的研究 日益 引起 重视 仁‘一 <口, 但是迄 今为止 , 尚未见到对于肝癌肿瘤浸润性单核细 胞的较为详细的报道 。 术 文观测经 ! 染色 ∀ # 例肝细胞性肝癌手术标木石蜡切片中肿瘤浸润 性单核细胞的浸润程度 , 并分析 了它与预后等 因素的关系 。 材料与方法 � + 材料 ∃ 本文所用 ∀ # 例标本取 自本研究所 � ⎯ ⎯� 年 � 月一 � ⎯ ⎯ Ρ 年 � 月 手术的部分病人 , 其 中男性 ∀ , 例 , 女性 # 例 , 年龄 < Ρ 一 ∴Ρ 岁 , 平均 ∀∴ + < 岁 。 术前外周血 & ∋( 阳性 < ∀ 例 , 阴性 �∀ 例 。 所有病例均有完整的随 访资料 。 Ρ + 组织切片 、染色及镜检 ∃ 常规石蜡切 片 、 ! 染色 、倒置显微镜计数 。 < + 结果显示方法 ∃ 肿瘤浸润性单核细胞 的 程度用半定量法计算 , 标准如 下 ∃ “一 ”示没有 , “ α 一 ”偶有 , “ α ”较 少 , α α 较多 , 肿瘤浸润性 单核细 胞 阳性病例的百分 率指 各组 中 “十 ”和 “ α 十 ”病例之和与其相应组总病例之 比 。 ∀ + 患者生存率 ∃ 按寿命表法计算 。 − + 资料 统计 ∃ 应 用 ! ς Β :Ε ΞΤ 和 ( 7 > 2 软 件 , 计算机处理 。 结果 � + 肿瘤 浸润性单 核细 胞 的一 般观察 ∃ ! 染 色切 片显示浸 润的单核细 胞主要 为淋 巴 细 胞 。 浸润部位 以肿瘤与正常组织交界处最多 。肿 瘤间质中也有不 同程度的单个核细胞 , 且 与各 例肿 瘤边沿 的单个核细胞浸润程度大致平行 , 但量较少 。 Ρ + 肿瘤浸润性单核细胞程度与患者年龄 、 性 另ΙΧ、 / 状 态和 术前 外周 血 & ∋( 水平 的关 系 ∃ 如图 � 所示 , 肿瘤浸润性单核细胞的浸润程 度与患者性别和术前外周血 & ∋( 水平无 明显 的关系 , 但与 / 0 状态和患者年龄有关 。 < · 肿瘤浸润性单核细胞程度与 肿瘤大小 、 包膜情况 、肿瘤坏死程度以及患者预后的关系 ∃ 肿瘤浸润性单 核细胞程度与 肿瘤大 小 、包膜情 况 、肿 瘤坏死 程度 以及 患者预 后等均 具有 明显 的关系 %( 1 , + , � ) 。 表现为肿瘤 小者 %1 ΛΦ Σ ) 、 包膜完整者 、有肿瘤坏死者以及预后 良好者 , 肿 瘤浸润性单核细胞 明显增多 .反之则少 。 %图 Ρ) ∀ + 肝动脉结扎 加插管合并 其它治疗 %如导 向治疗或 β 和免疫治疗 )后肿瘤浸润性单核细胞 的变化 ∃ 如表 � 、 Ρ 所示 , 在其它条件相 同的前提 下 , 肝动脉结扎加插管合并其它治疗后再 手术 切除标本 % 八9 α & : 组 )中肿瘤浸润性单 核 细胞的程度明显地高于未经特殊治疗而直接手 术切除标本 %对照组 )%( 1 ,+ , � ) 。 讨 论 以前的文献多集中于对肿瘤浸 Β闰性单核细 胞亚型的报道9’一 <二, 笔者曾应用 & /; 免疫组化 的方法对 − 例井于癌患者手术标本石蜡切片中的 加 χ 。〔卜) / 0 巨旧旧口�的曰,� 次!博石性侧巴 图 ∀ 月干癌浸润性单核细胞 与年龄 、性别 、# ∃ % 状态以及甲胎蛋白的关系 图 & 月干癌浸润性单核细胞 与瘤体大小 、肿瘤坏死程度 、包膜及预后的关系 肝癌浸润性单 核细胞亚性进行 观测 , 但是结果 不甚理想 结 果未 显示 ∋ , 鉴于单纯 的标本石蜡 切片 # ( 染色亦会获得有 意义结果 的可能比 , 本 文只进行 了 石蜡包 埋标本 # ( 染 色片 的观 测 。 本文结果提示肿瘤浸润性单核细胞 的浸润 程度与 # ∃ % 状态和患者年龄有关 。 在本组病 人中 , 年 纪轻者多于年纪 老者 , # ∃) ∗ + 阳性者 明显多 与阴性者 , − 。. � / ∋ 。 这可能 与下列 因 素有关 0 1∋ 年龄对机体免疫功能的影响困 2 & ∋ # ∃ % 感染后激 发机体 的免疫系统困 。 此外 , 本 文结果还表 明肿瘤小者 − 万3 4 ∋ 、包膜完整者 、 Ι# 冯学胜等 人肝癌浸润性单核细胞初步观察及其与预后等因素的关系 有肿瘤坏死者以及预后 良好者 , 肿瘤浸润性单 核细胞明显增多 .反之则少 。提示在肿瘤生长过 程中机体免疫系统的参与受许多因素影响 , 将 之综合分析可望为临床提供有益的信息%如对 于少者术后采取措施 , 提高手术效果等) 。 肝动脉结扎加插管合并其它治疗是在大肝 癌缩小后再切除中应用 的主要方法之一川 , 它 所引起肿瘤局部免疫反应的变化 , 尚未见报道 。 本文结果提示 ∃ 肝动脉结扎加插管合其它治疗 可提高肝癌浸润性单核细胞的浸润程度 , 这可 能与肝癌细胞坏死 , 激发机体的局部的免疫反 应有关 。 综上所述 , 肿瘤浸润性单核细胞对于肝癌 的发生 、发展及预后均有重要意义 , 有必要进行 深入研究 。 目前 , 笔者正在进行对肝癌标本冷冻 切片中肿瘤浸润性单核细胞的亚型分析 , 可望 对肝癌的防治提供更有用的信息 。 参 考 文 献 ∃ � + :Ε Τ Δ Φ , & & Φ Η Φ Μ Ι > , ⊥ Η Κ ΒΣ ΒΕ Φ 8 , Φ Γ Η Ι+ :Σ Σ Τ Δ Ε Τ Ψ ΜΒΛ Γ Τ Φ ΜΦ Σ ΒΦ Η Ι Η Ε Η ΙΘ Λ ΒΛ Τ Ξ :ΘΣ ς Μ Τ Φ ΘΓ Φ Ν Δ Υ Λ Φ Γ Λ ΒΕ ΞΒΙΓ Κ Η ΓΒΕ Ν Ν Η Λ Ψ Γ Κ ΒΦ Φ Η Κ Φ ΒΕ Τ Σ Η Η ΞΓΦ Κ Σ ΒΓ Τ Σ ΘΦ ΒΕ ; Η Ο Σ ΒΕ ΒΛ Γ Κ Η Γ一Τ Ε + ; Η Ε Φ Φ Κ :Σ Ψ Σ Τ Δ Ε Ι :Σ Σ Δ Ε Τ ΓΜΦ Κ Ρ + _ Φ ΒΟ Σ Η Ε Ε � ⎯ ⎯ Ρ , < − ∃ Ρ ⎯ ∴ ! , _ ΜΒΓΦ ΛΒΟ Φ 3 9 , ≅ ΒΤ Κ Ο Η ? , ΦΓ Η Ι+ 3 ΜΦ 3 一 Φ Φ ΙΙ Κ Φ ΦΦ ςΓ Τ Κ 0 ς Ν Φ Ε Φ Δ Λ Η Ν Φ ΒΕ 3 :9 Λ Η Ε Ο ΥΙΤ Τ Ο Τ Ξ ς Η ΓΒΦ Ε Γ Λ Ω ΒΓΜ ΜΦ ς Η ΓΤ Φ ΦΙΙΔ ΙΗ Κ Φ Η Κ ΦΒΕ Τ Σ Η Η + ;Η Ε Φ Φ Κ ? Φ Λ , � ⎯ ⎯Ρ , − Ρ ∃ − ⎯ � < < + 冯学胜 , 林云璐 , 谢琪 , 等 + 小鼠肝癌肿瘤浸润性淋巴细 胞抗瘤活性的初步研究 + 肿瘤 , � ⎯ ⎯ < , � < ∃ Ρ� ∀ + 许祖德 , 张月娥 , 张其英 , 等 + 肝癌局部浸润的单个核细 胞亚型分析及其与患者预后的关系+ 临床与实验病理学杂志 , � ⎯ # � , Ρ ∃ < − + 7 Μ ΓΦ ]Β 3 , 7 ] Δ Θ Η Σ Η Η ? , 2 Φ] Β 2 , Φ Κ Η Ι+ & Ν Φ 一 Ο Φς Φ Ε Ψ Ο Φ Ε Γ ΒΕ Φ Κ Φ Η Λ Φ Λ Τ Ξ Φ = Γ Κ Η ΓΜ ΘΣ ΒΦ 3 Φ Φ ΙΙΛ ΒΕ ΓΜΦ ΙΒΠ Φ Κ Η Ε Ο ΓΜΦ ΒΚ Η ς Ψ ς Φ Η Κ ΗΕ Φ Φ ΒΕ ΓΜΦ ς Φ Κ Βς ΜΦΚ Θ Τ Ξ Τ ΙΟ Φ Κ Σ ΒΦΦ + Χ :Σ ΚΕ Δ Ε Τ Ι, � ⎯ ⎯ Ρ , �∀ ⎯ ∃ �− � Ρ � + & Κ Η ] Β ⊥ , > ΒΘ Η δ Η ]Β Χ, ΒΕ Τ 7 , Φ Γ ΗΙ+ ! = ς Κ Φ Λ Λ ΒΤ Ε Η Ε Ο Κ Φ ς ΙΒΦ Η Γ ΒΤ Ε Τ Ξ ΜΦ ς Η ΓΒΓΒΛ / Π ΒΚ Δ Λ Ν Φ Ε Τ Σ Φ ΒΕ ΓΚ Η Ε Λ Ν Φ Ε ΒΦ Σ ΒΦ Φ ( Κ Τ Φ 8 Η Η ΓΙ & Φ Η Ο 2Φ Β 4 2& , � ⎯ # ⎯ , # � ∃ Ρ , ∴ ∴ + 6 Δ 6 ε , Α Δ 5 / , φΜ Τ Δ Α 5 , Φ Γ Η Ι+ ! = ς Φ Κ ΒΦ Ε Φ Φ Ω ΒΓΜ ΙΒΠ Ψ Φ Κ Κ Φ Λ Φ Φ ΚΒΤ Ε Η ΞΓΦ Κ ΜΦ ς ΗΓΒΦ Η Κ ΓΦΚ ΒΗΙ Φ ΜΦ Σ Τ ΦΣ Υ Τ ΙΒδ ΗΓΒΤ Ε ΞΤ Κ ΜΦ ς Η Ψ Γ Τ Φ ΦΙΙΔ ΙΗ Κ ΦΗ Κ ΦΒΕ Τ Σ Η + ; Η Ε Φ Φ Κ , � ⎯ ⎯ < , ∴ � ∃ � Ρ %收稿日期 ∃ � ⎯ ⎯ ∀一 , �一 , # ) (ΗΓΜΤΙΤΝΒϑ ΗΙ7ΥΛΦΚΠΗΓΒΤ Ε 7Ξ 3 ΔΣ Τ Κ :Ε ΞΒΙΓΚΗΓΒΕ Ν > Τ Ε Τ ϑΘΓΦΛ :Ε ∀# (ΗΓΒΦΕ ΓΛ _ ΒΓΜ Φ(ΗΓΤ ϑ ΦΙΙΔΙΗΚ ;ΗΚ ΦΒΕ Τ Σ Η ∋ Φ Ε Ν Α Δ Φ一 Λ ΜΦ Ε Ν , / Η Τ _ Φ Ε 一Μ Δ Η 9 ΒΠ Φ Κ ;Η Ε ϑ Φ Κ :Ε Λ ΓΒΓ之‘Γ Φ , 2 Μ Η Ε Ν ΜΗ Β >七Ο ΒΦ Η Ι 4 Ε ΒΠ ΦΚΛ ΒΓΘ , 2 Μ Η Ε Ν ΜΗ Βφ, , , < Ρ 3 Μ Φ ΒΕ Γ Φ Ε ΛΒΓΘ Τ Ξ ΓΔ Σ Τ Κ ΒΕ ΞΒΙΓΚΗ ΓΒΕ Ν Σ Τ Ε Τ ΦΘ ΓΦ Λ %3 :> ) Ω Φ Κ Φ ΒΕ Π Φ Λ ΓΒΝ Η ΓΦ Ο ς Η ΓΜ Τ ΙΤ Ν ΒΦ Η ΙΙΘ Τ Ε ΓΔ Σ Τ Κ ΓΒΛ ΛΔ Φ Λ 、Τ Υ Ψ ΓΗ ΒΕ Φ Ο ΞΚΤ Σ ∀ # ς Η ΓΒΦ Ε Γ Λ Ω ΒΓΜ Μ Φ ς Η Γ Τ Φ Φ ΙΙΔ ΙΗ Κ Φ Η Κ Φ ΒΕ Τ Σ Η % ;; ) + 3 ΜΦ ΚΦ Λ Δ ΙΓΛ Λ ΜΤ Ω ΦΟ ΓΜΦ ΒΕ ΓΦ Ε Λ ΒΓΘ Τ Ξ 3 :> ΜΗ Ο Ε Τ ΚΦ Ψ ΙΗ ΓΒΤ Ε ΓΤ Λ Φ = Η Η Ε Ο Η 一ΞΦ ΚΤ (Κ Τ Γ Φ ΒΕ %& ∋() ΒΕ (Φ Κ Β(Μ Φ ΚΗ Ι Υ ΙΤ Τ Ο Τ Ξ ς Η ΓΒΦ Ε Γ %() , · , − ) . Μ Τ ΩΦ Π Φ Κ , Ω Η Λ Κ Φ ΙΗ Γ Φ Ο Λ ΓΗ Γ ΒΛ Γ ΒΦ Η ΙΨ ΙΘ Ω ΒΓΜ Η Ν Φ Η Ε Ο / 0 ΒΕ ΞΦ Φ ΓΙ Τ Ε Τ Ξ ς Η ΓΒΦ Ε ΓΛ , Η Ε Ο Ω ΒΓΜ ΓΔ Σ Τ Κ Φ Η ς Λ Δ ΙΦ , ΓΔ Σ Τ Κ ΛΒδ Φ , Η ΙΛΤ Ω ΒΓ Μ ΓΔ Σ Τ Κ Ε Φ Φ Κ Τ Λ ΒΛ %ς 1 , · , −− ) . Η Ε Ο Ω Η Λ Λ ΒΝ Ε ΒΞΒΦΗ Ε ΓΙΘ Κ Φ ΙΗ Γ ΦΟ Ω ΒΓΜ Γ Μ Φ ς Κ Τ Ν ΕΤ ΛΒΛ Τ Ξ ς Η Γ ΒΦ Ε ΓΛ Η ΞΓ Φ Κ Τ ς Φ Κ Η ΓΒΤ Ε %ς 1 , + , � ) + :Ε Η Ο ΟΒΓΒΤ Ε , ΓΜ Φ ΒΕ ΓΦ Ε Λ ΒΨ ΓΘ Τ Ξ 3 ; > ΞΚ Τ Σ ς Η ΓΒΦ Ε ΓΛ Ω Μ Τ Μ Η Ο Η ΦΦ Φ ς ΓΦ Ο Μ Φ ς Η ΓΒΦ Η Κ ΓΦ Κ ΒΗ Η Ι ΙΒΝ Η ΓΒΤ Ε Η Ε Ο Μ Φ ς Η ΓΒΦ Η Κ ΓΦ Κ ΒΗ Η Ι ΒΕ ΞΔ Λ ΒΤ Ε % & 9 α &: ) Η Ε Ο Τ ΓΜ Φ Κ Σ Τ ΟΗ ΙΒΓΒΦ Λ Τ Ξ ΓΚ Φ Η ΓΣ Φ Ε Γ Λ Δ Φ Μ Η Λ Κ Η Ο ΒΗ Γ ΒΤ Ε Η Ε Ο ΒΣ Σ Δ Ε Τ ΓΜ Φ Κ Η(Θ Ω Η Λ ΜΒΝ Μ Φ Κ ΓΜ Η Ε ΓΜ Η Γ Τ Ξ ΓΜ Τ ΛΦ Ω ΒΓΜ Τ Δ Γ Η Ε Θ ΓΜ Φ Κ Η ς ΒΦ Λ Υ Φ ΞΤ Κ Φ Τ ς Φ Κ Η ΓΒΤ Ε %ς 1 , + , � ) + ΓΜ Φ Λ Φ Ο Η Γ Η Λ Δ Ν Ν Φ Λ Γ ΓΜ Η Γ ΒΕ Γ Φ Ε Λ ΒΓΘ Τ Ξ 3 ;> ΥΦ ΒΕ ΞΙΔ Φ Ε Φ Φ Ο Υ Θ Σ Η Ε Θ ΞΗ Φ ΓΤ Κ Λ , Ω Μ ΒΦΜ Σ ΒΝ Μ Γ ΥΦ Τ Ξ ΒΣ ς Τ ΚΓ Η Ε Φ Φ ΞΤ Κ Σ Η Ε Η Ν Φ Σ Φ Ε Γ Τ Ξ ;; ΒΞ Η Ε Η ΙΘδ Φ Ο ς Κ Τ ς Φ ΚΙΘ · ⊥ Φ Θ Ω Τ Κ Ο Λ ∃ Μ Φ ς Η ΓΤ Φ Φ ΙΙΔ ΙΗ Κ Φ Η ΚΦ ΒΕ Τ Σ Η , Γ Δ Σ Τ Κ ΒΕ ΞΒΙΓΚ Η ΓΒΤ Ε Σ Τ Ε Τ Φ ΘΓΦ Λ , ς Κ Τ Ν Ε Τ Λ ΒΛ