_乳康宝_治疗奶牛乳房炎疗效观察

2007 年第 5（总第 130 期） 试验研究 3 “乳康宝”治疗奶牛乳房炎疗效观察 韩学霞 （莱西市奶牛良种繁育推广中心 266600） 张正杰 （莱西农业广播学校） 丁君云 （莱西市畜牧局） 摘要 本试验选用绿色药品—中成药制剂“乳康宝”治疗奶牛临床型乳房炎和隐性乳房炎各 120头，通过观察治疗效果 及对奶质的影响。其结果表明，该制剂临床效果明显，且对奶质无影响，是目前治疗奶牛乳房炎，生产无公害奶制品的首选药 物之一。具有很好的推广应用前景。 关键词 中成药 奶牛 乳房炎 中图分类号：S858.23 文献标识码：A 文章编号：1007-1733(2007)05-0003-02 乳房炎是目前危害奶牛业健康发展的主要疾病之一。 随着我国加入 WTO 以后，奶制品卫生安全问越发引起人 们的关注，加上近几年人们的健康意识不断增强和对绿色 食品的渴求，以及药物残留、药物副作用对人类危害的不 断认识，使治疗乳房炎的药物在应用上受到诸多限制。运 用中药防治奶牛乳房炎正日益受到普遍重视。 本试验选用中成药内服，治疗奶牛临床型和隐性乳房 炎，在治疗效果及防制奶的药物残留方面取得了较明显的 效果，为推行奶牛化养殖，生产绿色奶制品提供了有 力保障。 1 试验材料与方法 1.1 材料 1.1.1 中成药及诊断试剂 中成药选用由莱西市奶牛良种 繁育推广中心自行研制的由川莲子、皂角刺、牛蒡子、丹 参、黄芩、柴胡等 17 味纯正优质名贵中药材配制而成的药 剂—乳康宝。 隐性乳房炎诊断试剂（B.M.T）购自北京奶牛中心新技 术公司。 1.1.2 病例来源 试验患病牛选自莱西市夏格庄奶牛场和 姜山岭前奶牛场及社会散养户。 1.2 方法 1.2.1 诊断 （1）隐性乳房炎的诊断：选用 B.M.T 诊断液 对可疑奶牛进行检测。其方法是：弃去前几把乳，再将乳 分别挤在盘中。诊断盘倾斜 45°，弃去多余乳汁（乳面至 盘口处），诊断盘中各皿中约留 2 ml 乳样。每个样品加 2 ml 诊断液使诊断盘做水平同心圆摇动，上下倾斜摇动 50 s 作 判断。判定标准为：诊断液与乳汁混合后按凝集反应的程 度分为几个等级：“-”乳中体细胞计数为 0~20 万/ml，反应 均质，流动无异常，颜色呈黄色或稍有绿色；“±”乳中细 胞计数为 20~50 万/ml，倾斜诊断盘，盘底有薄絮层出现， 颜色稍有绿色，判定为可疑；“+”乳中体细胞计数为 50~150 万/ml，摇动可见物质不均匀，倾斜盘时混合物明显絮状， 颜色为黄绿色，该乳区为隐性乳房炎；“++”乳中体细胞数 为 150~500 万/ml，摇动时反应物呈粘稠挂底，颜色为黄绿 色；“+++”乳中体细胞计数＞500 万/ml，摇动反应物时呈 一块胶冻物，颜色深绿色或淡绿色。经检测，选出结果明 显的（++以上）的奶牛 120 头，作为治疗对象。（2）临床 型乳房炎的诊断：乳房组织不同程度的肿胀、温热和疼痛， 乳汁变性，呈灰白色，内混有大小不等的乳块、絮状物， 泌乳量显著减少，出现上述症状的奶牛选为本试验治疗对 象。2006 年 7 月 10 日至 8 月 20 日选出 120 头，并及时进 行治疗。 1.2.2 治疗 （1）隐性乳房炎的治疗：第 1 天用“乳康宝” 2 代（250 g/袋）早晚用热水冲开，冷却后灌服，第 2、3 天每天各服用 1 袋，停药 3 d，从第 7 天开始用“乳康宝” 1 袋，1 次/ d，连用 3 d。（2）临床性乳房炎的治疗：患病 奶牛确诊后，及时将乳康宝 2 袋（500 g/袋）用热水冲开， 冷却后加入 200 ml 黄酒（即墨产），搅匀，用投药瓶灌服。 每天用药 1 次，连用 3~5 d。治愈者不再继续投药，病情较 重者可配合应用乳房速效消炎膏（杭州元亨产）外敷，效果 更佳。 2 效果 痊愈判定标准：乳区肿胀、热痛消失、乳汁无异常、 产奶量恢复至正常水平。 无效判定标准：按疗程用药后，患病乳区红、肿、热、 痛变化不明显，乳汁仍异常，产奶量无恢复。 2.1 隐性乳房炎治疗效果 在结束治疗的第 4 天，用 B.M.T 诊断液检测转阴率为 90%，阳性减弱率为 2%，无明显变化率为 8%。 2.2 临床型乳房炎治疗效果 试验期内治疗总头数为 120 头，共治愈 113 头，无效 7 头，总治愈率为 94.2%，结果详见下表。 山东畜牧兽医 2007 年第 28 卷 4 青岛地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查与病原分离鉴定 冯永胜 兰信海 衣服德 王 彬 （青岛市畜牧兽医研究所 266100） 摘要 本文对不同地区 209份血清进行了猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的普查，以检查该病的阳性率。共检出 113 份阳性，阳性率在 43%~82%之间，平均为 64%；在感染猪群中，通过细胞培养技术分离到一株猪繁殖与呼吸综合征（PRRS） 病毒，利用免疫荧光抗体试验（IFA）、反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）电镜观察等技术进行了鉴定。 关键词 呼吸综合征 免疫荥光抗体 聚合酶链式反应 中图分类号：S858.28 文献标识码：A 文章编号：1007-1733(2007)05-0004-02 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种新的高度传染性 的猪病，俗称“蓝耳病”，以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸困难 为主要特征。自1996年以来，该病已被证实在我国存在。 本课题组对青岛部分地区进行了PRRS流行病学调查，并从 发病猪场分离到一株PRRS病毒。 1 材料与试剂 1.1 细胞 Marc-145细胞，本实验室保存。 1.2 MEM培养基、胰酶、新生牛血清 HyClone公司产品。 1.3 96孔细胞培养板 NUNC公司产品。 1.4 倒置显微镜 OLMPUS公司产品。 1.5 CO2恒温培养箱 SANYO公司产品。 1.6 PRRS血清ELISA检测试剂盒 武汉科前生物技术公司产品。 2 方法 2.1 血清学调查 从猪前腔静脉采血 ,每头猪不少于 2ml,3 000r/min离心5 min,收集血清,采用ELISA试剂盒检 测PRRS血清抗体水平。 2.2 细胞培养与病毒分离 无菌处理发病猪肺脏、淋巴结 和脾脏，接种Marc-145细胞，逐日观察细胞病变，盲传3代。 将病毒培养物冻融2次后，8 000 r/min离心15 min，然后取 上清，25 000r/min离心2 h，将沉淀用PBS悬起，采用磷钨 酸负染色，在电镜下观察病毒粒子形态。 2.3 分离株毒价测定 在96孔细胞培养板中培养Marc-145 细胞，长成单层后，将分离毒株原液分别做10-3，10-4，⋯⋯ 10-8稀释，每个稀释度接种 8孔，观察CPE变化。按 Reed-Muench法计算分离毒株的TCID50。 2.4 免疫荧光抗体试验（IFA） 参照王明俊及杨汉春等 方法进行，略有改进。用生长液将细胞稀释成1×105/ml，加 入细胞培养板，0.2 ml/孔，37℃，5%CO2培养。待细胞长 成单层后，接种疑似PRRSV分离毒，0.1 ml/孔，逐日观察 CPE。待CPE刚开始出现时，弃去细胞培养液，每孔加入预 冷的无水乙醇0.1 ml，室温作用10 min。然后弃去乙醇，自 然晾干，PBS洗3次，将标准PRRS美洲型阴、阳性血清分别 作1:20稀释后，加入细胞培养板内，0.1 ml/孔，同时设猪细 小病毒（PPV）阳性血清、猪伪狂犬病毒（PRV）阳性血清 和空白对照。置湿盒内，37℃感作45 min，PBS洗3次，去 离子水冲洗5次，吹干。每孔加入0.1 ml 1:20稀释的荧光抗 体FITC-SPA，置湿盒内，37℃感作45 min，洗涤同上，拍 干。置荧光显微镜下观察。 2.5 反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR） 参照Genebank 上已经发表的序列，设计并合成1对引物，上游引物序列为： CGA GGA TCC AAT ATG CCA AAT AAC AAC GG下游引 物为：CCA GAA TTC CAT CAT GCT GAG GGT GAT GC, 引物上含有限制性内切酶EcoR I和BamH I作用位点,扩增 ORF全基因序列。组织总RNA的制备按常规方法进行，采 用一步法进行RT-PCR。扩增产物于1%琼脂糖凝胶电泳，观 察DNA条带。 临床型乳房炎治疗结果 用药次数 1 2 3 4 5 治愈头数 3 23 57 21 9 治愈率 2.5% 19.2% 47.5% 17.5% 7.5% 2.3 药残及乳脂检测 经对供试奶牛取其奶样送雀巢公司奶源部进行检测， 无药物残留。经莱西市奶业公司对奶样用 GD98 乳脂检测 仪进行检测，乳脂率无明显变化。 3 小结 通过本试验得知，应用中成药制剂—乳康宝治疗奶牛 乳房炎疗效确切，且对奶质无影响，乳脂率无明显变化， 既治标又治本。 应用该制剂治疗奶牛乳房炎既经济又方便，且牛奶无药 物残留，对生产无公害、绿色奶制品具有重要的推动作用。 （收稿日期：2007―04―18）