（目录5）白色念珠菌检查法

白色念珠菌检查法 白色念珠菌的典型特征白色念珠菌的典型特征 1.1.白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形,,直径为直径为3~6um, 3~6um, 革蓝染色为阳性革蓝染色为阳性,,但菌体着色不均匀但菌体着色不均匀,,以出芽方式繁殖以出芽方式繁殖,, 在适宜的培养基上芽生孢子及假菌丝生长在适宜的培养基上芽生孢子及假菌丝生长,,在假菌丝在假菌丝 间其末端形成厚膜孢子。间其末端形成厚膜孢子。 2.2.白色念珠菌具有白色念珠菌具有ββ--硝基半乳糖苷酶硝基半乳糖苷酶, , 可分解可分解 NGLNGL，， 使对使对--硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。 22、菌落形态、菌落形态 ⑴白色念珠菌在沙氏葡萄糖培养基上呈乳白色偶见淡⑴白色念珠菌在沙氏葡萄糖培养基上呈乳白色偶见淡 黄色，面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落 增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 ⑵白色念珠菌在⑵白色念珠菌在1%1%吐温吐温8080--玉米琼脂培养基上呈灰色玉米琼脂培养基上呈灰色 或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则 菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 ⑶白色念珠菌在血平板上呈灰色或奶油色，表面 光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大 ，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 ⑷白色念珠菌在TTC（氯化三苯四氮唑-沙保罗琼 脂培养基）培养基平板上呈乳白色或淡红色， 菌落小。其他酵母菌为红色、热带念珠菌为深 红色或紫色。 参见下表 白色念珠菌菌落形态 培养基 菌落形态 沙氏琼脂培 养基 乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养 时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱 摺。 吐温—80玉 米粉琼脂培 养基 灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间 稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 血平板 灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间 稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 TTC平板 乳白色或淡红色，表面光滑 3、常见念珠菌在显色培养基上的菌落颜色不同 白色念球菌显绿色，翠绿色（直径约2mn）、热带念球 菌显蓝色，铁蓝色（直径约1.5mn）、克柔念球菌显粉 红色（直径约4.5mn）、光滑念珠菌显紫色（直径约 2mn）、其它念珠菌显白色（直径不定）。 参见下表 念球菌在显色培养基上的菌落颜色 念 球 菌 菌 落 颜 色 白色念球菌 热带念球菌 克柔念球菌 光滑念珠菌 其它念珠菌 绿色，翠绿色（直径约2mn） 蓝色，铁蓝色（直径约1.5mn） 粉红色（直径约4.5mn） 紫色（直径约2mn） 白色（直径不定） 图1 白色假丝酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态 图2 热带假丝酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态 图3 酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态 4、显微镜下特征 ⑴白色念珠菌在沙氏葡萄糖培养基上于25~28℃培养24h生长缓 慢， 30~35℃培养24h培养物革兰染色为阳性菌，圆形或椭圆形、 菌体着色不均匀，假菌丝与芽管模糊。 ⑵白色念珠菌在1%吐温80-玉米琼脂培养基上于25~28℃24-48h 培养物，革兰染色为阳性菌、圆形、菌体着色不均匀，高倍镜下 观察，可见到大量厚膜孢子和假菌丝，芽管模糊，30~35℃培养 24h,显微镜下可见丰富假菌丝和芽管生长，在菌丝顶端及侧缘厚 膜孢子生长。见图4 、 5、6、7、8、9 图4 白色假丝酵母菌的镜下形态（假菌丝） 图5 白色假丝酵母菌的镜下形态（厚膜孢子） 图6 白色假丝酵母菌的镜下形态（芽管） 图7 热带假丝酵母菌的镜下形态（厚膜孢子） 图8 热带假丝酵母菌的镜下形态（芽管和假菌丝） 图9 白色假丝酵母菌在血平板的镜下形态（芽管） 5、芽管形成试验 用白金铒挑取少量的1%吐温80-玉米琼脂培养基或沙 氏葡萄糖培养基和血平板上的培养物，接种在滴加一 滴血清的载玻片上，然后加以盖玻片，置湿润的平皿 内，于35~37℃、1~3h，置显微镜下观察，可见到由 孢子长出短小芽管。 常见念球菌及酵母菌生化试验结果 细菌名称 生 化 试 验 蔗糖发酵 葡萄糖发酵 麦芽糖发酵 尿素酶分解 白色念球（1） - + + - 白色念球（2） - + + - 热带念球菌 + + + - 啤酒酵母菌 + + - - 酿酒酵母菌 + + - - 7、白色念珠菌与酵母菌的鉴别 ⑴酵母菌在显色培养基上不显色，为乳白色。 ⑵酵母菌无假菌丝和厚膜孢子。 ⑶酵母菌可发酵蔗糖不能发酵麦芽糖。 以上试验结果和特征可与念珠菌进行鉴别。 三、鉴定依据 1、菌落特征 2、显色培养基反应 3、厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成典型 的厚 膜孢子 4、芽管形成 由孢子长出短小芽管 5、生化试验 6、注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别。 结果判断 试验结果符合以上条件应判该供试品 检出白色念珠菌。