薄荷油_环糊精包合物的制备

薄荷油 ��环糊精包合物的制备 宋凤兰1 , 杨轶群2 , 梁开艳1 , 杨帆1 ( 1. 广东药学院中山校区, 广东 中山 � 528458; 2. 广州白云山天心制药有限公 司, 广州 � 510300) 摘要: 目的 � 优选薄荷油��环糊精包合物的制备工艺。方法 � 采用 L 9 ( 34 ) 正交实验设计, 以薄荷油的包合率为 指标, 考察薄荷油与��环糊精的比例、包合温度、搅拌时间、��环糊精与水的比例对制备工艺的影响, 并用 TLC 与 IR光谱验证包合物的形成。结果 � 最佳的工艺条件为薄荷油���环糊精为 1� 8, 包合温度为 45 , 搅拌时间为 2 h, ��CD与水的比例为 1� 10。结论 � 此法可用于薄荷油��环糊精包合物的制备。 关键词: 薄荷油; ��环糊精; 包合物; 正交实验; 薄层色谱; 红外光谱 中图分类号: R944� 9� � � � 文献标识码: A � � � � 文章编号: 1672�2981 ( 2009) 03�0193�03 Preparation of mentha oil���cyclodextrin inclusion compound SONG Feng�lan1 , YANG Yi�qun2 , LIANG Kai� yan1 , YANG Fan1 ( 1. Zhongshan College of Guang dong Pharma� ceutical Univer sity , Zhong shan Guangdong 528458; 2. Guangz hou Baiyunshan T ianx in Pharmaceutical Co . , Ltd, Guangdong 510300) Abstract: Objective� T o optimize t he including pr epar ation for mentha oil w ith ��cyclodex tr in. Methods � Inclusion rate of mentha oil was used t o evaluate the techno lo gies based on o rthogonal design, in which the propo rtion o f mentha oil and��cyclodextr in, the exper iment t em perat ur e, the time of stir ring , and the propo rtion o f��cyclodext rin and wa� ter wer e used as 4 main technolog y facto rs. The inclusion compound was proved by thin layer and infrar ed chromato g� r aphy . Results � The optimum prepar ation conditions fo r inclusion were established as mentha oil� ��cyclodex tr in = 1 � 8, 45 , st irr ing for 2 hour s, ��cyclodex trin� w ater = 1� 10. Conclusion� The method can be used for the pr ep� ar ation o f mentha oil���cyclodextr in inclusion compound. Key words: mentha oil; ��cyclodex trin; inclusion compound; o rthogonal t est; T LC; IR � � 薄荷油 ( mentha oil) 为唇形科植物薄荷 Mentha hap lo� caly x Br iq. 的新鲜茎叶经蒸馏、冷冻、部分脱脂加工得到 的挥发油, 具有疏风散热、清利头目、利咽、透疹等功 效[1] , 在中药制剂中被广泛使用。薄荷油极易挥发, 稳定性 差, 严重限制了其发展应用。��环糊精 (��CD) 是由 7 个葡 萄糖分子以 1, 4�糖苷键连接而成的化合物, 具有环状中空 圆筒形结构, 能够将药物分子包嵌在其空穴结构内形成包合 物。��CD 包合物能够增加药物的稳定性、改善药物的溶解 性, 并使液态药物固态化[ 2, 3]。因此, 将薄荷油制成 ��CD 包合物能够防止其有效成分的挥发, 并使其固态化以便于制 剂和应用。本文采用饱和水溶液法制备薄荷油 ��CD 包合 物, 并通过正交实验设计对制备工艺进行了优化。 1 � 仪器与试药 1� 1 � 仪器 CL- 2 型恒温磁力搅拌器 (巩义市予华仪器有限责任公 司) ; SHZ- D ( ! ) 型循环水式多用真空泵 (巩义市英峪 予华仪器厂) ; GZX- 9240 型电热鼓风干燥箱 (上海博讯实 业有限公司医疗设备厂) ; T C- 15 型电热套 (海宁市新华 医疗器械厂) ; IR200 傅立叶红外分光光度计 (美国 Nicolet 仪器公司)。 1� 2 � 试药 薄荷油 (广州致信药业有限公司, 批号 20080115) ; �� CD (上海博奥生物科技有限公司, 批号 060621) ; 无水乙醇 (天津市永大化学试剂开发中心, 批号 20070311) ; 羧甲基 纤维 素钠 ( 天 津市 永 大化 学 试 剂开 发 中 心, 批 号 20060521) ; 硅胶 G ( 青岛 海洋化 工有 限公司, 批号 060615) ; 石油醚 (天津富宇精细化工有限公司 , 批号 080705) ; 乙酸乙酯 (江 苏强盛化工 有限公司, 批号 20080816) ; 香草 醛 ( 天津 市大茂 化学 试剂厂, 批号 20070526)。 2 � 方法和结果 2� 1 � 薄荷油��CD包合物的制备 ��CD包合物的制备方法有饱和水溶液法、研磨法、液� 液法等[ 4, 5] , 其中饱和水溶液法应用较多, 较适合工业化大 生产, 本文采用该法制备薄荷油包合物。取一定量的��CD, 加适量水加热溶解, 制成饱和溶液。将此饱和溶液, 放置于 � � 作者简介: 宋凤兰, 女, 助理实验师, 主要从事药物新剂型与新技术的研究, T el: ( 0760) 23430076, E�mail: f englansong@ 126� com 193 中南药学 2009年 3月第 7卷第 3期� C ent ral South Ph armacy. March 2009, Vol� 7 No� 3 适当的温度下恒温。取薄荷油 1 mL , 缓缓滴入��CD饱和溶 液中, 恒温搅拌一定的时间, 取出, 冷却, 置冰箱冷藏过 夜, 取出, 抽滤, 用无水乙醇洗至表面无油渍为止。将粉末 置真空干燥器中干燥 24 h, 即得薄荷油��CD包合物。 2� 2 � 挥发油包合率的测定[ 6] 参照中国药典 2005 年版一部附录挥发油的测定进行。将 薄荷油��CD包合物置圆底烧瓶中, 加蒸馏水 300 mL, 连接 挥发油提取器, 沸腾 2 h 以上, 至油量不再增加。放置至室 温, 读取挥发油回收量 ( mL) , 按下式计算挥发油包合率。 挥发油包合率= 包合物中挥发油回收量 ( mL )挥发油加入量 ( mL ) ∀ 100% 2� 3 � 正交实验设计 根据文献[7, 8]及预实验结果, 选择薄荷油与 ��CD 的配 比, 包合温度, 搅拌时间, ��CD 与加水量的比值为考察因 素, 通过 L9 ( 34 ) 正交表优化制备工艺, 因素水平表见表 1, 并以薄荷油的包合率为考察指标。结果见表 2。 表 1 � ��CD包合薄荷油因素水平表 Tab 1 � Factors and levels of��CD inclusion of menthaoil 水平 ( level) A 油���CD ( oil � ��CD) / mL � g B 包合温度 ( in clusion temperatu re) / C 搅拌时间 ( mixtu re time) / h D ��CD �水 (��CD� w ater) / g � mL 1 1� 4 30 1 1� 10 2 1� 6 45 2 1� 15 3 1� 8 60 3 1� 20 表 2 � ��CD包合薄荷油的正交实验设计表及结果 Tab 2 � Orthogonal experiment of��CD inclusion of mentha oil 实验号 ( No� ) A B C D 包合率 ( rate of envelopmen t) / % 1 1 1 1 1 57� 24 2 1 2 2 2 60� 82 3 1 3 3 3 48� 27 4 2 1 2 3 65� 19 5 2 2 3 1 61� 83 6 2 3 1 2 59� 25 7 3 1 3 2 73� 42 8 3 2 1 3 80� 63 9 3 3 2 1 81� 10 K 1 166� 3 195� 8 197� 1 200� 2 K 2 186� 3 203� 3 207� 1 193� 5 K 3 235� 2 188� 6 183� 5 194� 1 R 68� 9 14� 7 23� 6 6� 7 � � 结果表明, 影响薄荷油包合率的因素依次为 A> C> B > D, 主要影响因素为 A, 最佳工艺条件为 A3B2C2D1 , 即 薄荷油与��CD 的比例为 1� 8 ( mL � g) , 包合温度为 45 , 搅拌时间为 2 h, ��CD与水的比例为 1� 10 ( g � mL)。 2� 4 � 验证性实验 取薄荷油 3 批, 按最佳工艺条件进行验证性实验, 制得 包合 物 的 薄 荷 油 包 合 率 分 别 为 84� 56%、85� 23%、 85� 58% , 均超过正交设计实验中的最大值。3 批薄荷油的 包合率 RSD仅为 0� 61% , 说明该最佳制备工艺稳定可靠。 2� 5 � 包合物的薄层鉴别 取薄荷油��CD包合物 1 g, 加入 95%乙醇 4 mL , 超声 5 min, 抽滤, 滤液为样品 a; 取同比例的薄荷油 ��CD 混合 物 1 g, 加入 95%乙醇 4 mL , 超声 5 min, 抽滤, 滤液为样 品 b; 取薄荷油 2 滴, 加入 95% 乙醇 2 mL 混合溶解, 得样 品 c; 取从包合物中回收的薄荷挥发油 2 滴, 加入 95% 乙醇 2 mL 混合溶解, 得样品 d。分别吸取样品 a、b、c、d 液各 约 10 �L , 点于同一硅胶 G 薄层板上, 以石油醚�乙酸乙酯 ( 17� 3) 为展开剂上行展开。取出晾干后喷以 1%香草醛硫 酸液, 105 烘至斑点清晰。结果包合物图谱无明显斑点, 而薄荷油、��CD的混合物与包合物中回收的薄荷油具有相 同的色谱图, 证明薄荷油被��环糊精包合形成新的物相, 且 包合对薄荷油化学性质无影响 (见图 1)。 图 1 � 薄荷油��CD包合物 T LC层析图 Fig 1 � TLC ch rom atogram of menth a oil���CD inclusion compound a. 薄荷油��CD 包合物 ( mentha oil�B�CD indusion compound) ; b. 薄荷油��CD 混合物 ( mentha oil�B�CD commixtur e com pound) ; c. 薄荷油 ( mentha oil) ; d. 提取挥发油 ( ex t racted naphth a) 2� 6 � 红外光谱分析 取��CD、薄荷油与 ��CD 的物理混合物、薄荷油���CD 包合物为样品, KBr 压片, 在相同的条件下测其红外光谱 图。由光谱图及数据可见, 在混合物中 ��CD 中的- OH 伸 缩振动峰没有变化, 仍为 3 391 cm- 1 , 在包合物中向低波数 位移。在 1 000~ 1 300 cm- 1波长处, 混合物与薄荷油���CD 包合物的图谱也有明显差异, 说明在包合物中已形成了新的 物相 (见图 2)。 图 2 � A 物理混合物、B包合物的 IR 图 Fig 2 � IR spect ra of phys ic mixture ( A) an d inclusion com plex 3 � 讨论与结论 194 C ent ral South Ph arm acy. M arch 2009, Vol�7 No� 3 � 中南药学 2009年 3月第 7卷第 3期 � � 本文采用饱和水溶液法制备薄荷油��CD 包合物, 以薄 荷油的包合率为考察指标, 对制备过程中的主要影响因素进 行了考察, 并且首次考察了��CD 与水的比例对薄荷油包合 率的影响, 结果表明水的比例对包合率的影响不大。由正交 实验结果可见, 薄荷油��CD包合物的最佳制备工艺条件为 薄荷油与��CD的比例为 1� 8, 包合温度为 45 , 搅拌时 间为 2 h, ��CD与水的比例为 1� 10, 影响最大的因素为薄 荷油与��CD的配比。 本法简便、易行, 适合工业化生产。实验中少部分未被 包合的薄荷油附着在包合物表面, 可用少量无水乙醇洗涤除 去, 有文献认为无水乙醇可能会对包合物有一定的破坏作 用, 影响包合率[9, 10] , 本研究考察了不同用量的无水乙醇洗 涤, 对包合物包合率的影响。发现无水乙醇的用量在 10 mL 以下时, 包合率无显著变化, 但无水乙醇用量超过 20 mL , 包合率会明显降低。也有文献报道用其他溶剂做为洗涤溶 剂, 如石油醚、乙醚、乙酸乙酯等[5, 11] , 但考虑到溶剂残留 问题, 本研究没有采用。 参考文献 [ 1] 徐国钧. 生药学. 第 2版 [ M ] . 北京: 人民卫生出版社, 1996: 290�291. [ 2] 陆彬. 药物新剂型与新技术 [ M ] . 北京: 人民卫生出版社, 1998: 36�38. [ 3] 何茹, 侯世祥, 郭丹丹. 鱼腥草挥发油��环糊精包合物的制备 工艺研究 [ J] . 中南药学, 2005, 3 ( 6) : 331�333. [ 4] 白云娥, 漆小梅. ��环糊精在中药方面的应用 [ J ] . 中国医院 药学杂志, 2000, 20 ( 4) : 237�238. [ 5] 王存琴, 高惠琴, 彭晓霞, 等. 荆芥挥发油��环糊精包合技术 的研究 [ J] . 中南药学, 2007, 5 ( 2) : 118�121. [ 6] 覃柳娟, 莫少红, 陈晓军. 薄荷油��环糊精包合物的制备研究 [ J] . 时珍国医国药, 2003, 14 ( 6) : 348�349. 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(收稿日期: 2008�12�26; 修回日期: 2009�02�04) 反相高效液相色谱法测定盐酸麻黄碱滴鼻液中主药的含量 刘坚华, 陈豪 (长沙市中心医院药剂科, 长沙 � 410004) 摘要: 目的 � 建立反相高效液相色谱法测定盐酸麻黄碱滴鼻液主药含量的方法。方法 � 色谱柱为 Shim�pack VP� ODS C18 , 流动相为水 (含 0� 1 %三乙胺, 甲酸调 pH 值至 2� 5) �甲醇 ( 90� 10) , 检测波长为 200 nm, 流速为 1� 0 mL# min- 1 , 柱温为 30 , 进样量为 20 �L。结果 � 盐酸麻黄碱检测浓度的线性范围为 1� 026 ~ 12� 825 �g # mL- 1 ( r= 0� 999 9) ; 最低检出限为 513 ng # mL - 1 ; 平均回收率为 98� 88% , RSD = 1� 33%。结论 � 本法简便、 快速, 结果准确、可靠, 可用于该制剂的质量控制。 关键词: 盐酸麻黄碱; 含量测定; 反相高效液相色谱法 中图分类号: R927� 2� � � � 文献标识码: A � � � � 文章编号: 1672�2981 ( 2009) 00�0195�03 Content determination of main components in ephedrine hydrochloride nasal drops L IU Jian�hua, CHEN H ao ( D ep ar tment of P harmacy , Central H osp ital of Changsha , Changsha 410004) Abstract: Objective� T o det ermine the content of main com pinents in ephedrine hydrochlo ride by RP�H PLC. Methods The chromatog raphic separ ation w as per formed on Shim�pack VP�ODS C18 column w ith column temperature at 30 . The mobile phase consisted o f water ( 0� 1% triethy lamine, pH adjusted to 2� 5 with fo rmic acid) �methano l ( 90� 10) at 1� 0 mL # min- 1 . T he detection w avelengt h w as 200 nm and the sam ple size w as 20 �L . Results� The linear range � � 作者简介: 刘坚华, 男, 主管药师, 主要从事药物制剂及临床药学工作, T el : ( 0731) 5668122, E�mail: hao102237@ sohu� com 195 中南药学 2009年 3月第 7卷第 3期� C ent ral South Ph armacy. March 2009, Vol� 7 No� 3