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山羊子宫内膜炎病理模型的制备

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山羊子宫内膜炎病理模型的制备 山羊子宫内膜炎病理模型的制备 包喜军1 ,2 , 孙  琳1 , 吕俊锦1 , 刘  孟1 , 李建基1 , 王  亨1 (1. 扬州大学兽医学院 , 江苏 扬州 225009 ; 2. 公安部南昌警犬基地 , 江西 南昌 330100) 中图分类号 :S858. 27     文献标识码 :B     文章编号 :052926005 (2009) 0520037202   长期以来 ,对子宫内膜炎的研究大多采用自 然病例 ,由于发病时间和疗效判定标准不尽一致 , 所以试验结果很难比较。通过实验室建立山羊子 宫内膜炎病理...
山羊子宫内膜炎病理模型的制备
山羊子宫内膜炎病理模型的制备 包喜军1 ,2 , 孙  琳1 , 吕俊锦1 , 刘  孟1 , 李建基1 , 王  亨1 (1. 扬州大学兽医学院 , 江苏 扬州 225009 ; 2. 公安部南昌警犬基地 , 江西 南昌 330100) 中图分类号 :S858. 27     文献标识码 :B     文章编号 :052926005 (2009) 0520037202   长期以来 ,对子宫内膜炎的研究大多采用自 然病例 ,由于发病时间和疗效判定标准不尽一致 , 所以试验结果很难比较。通过实验室建立山羊子 宫内膜炎病理模型 ,保证其发病程度和症状的一 致 ,从而为研究该病的诊断、治疗及防治方法创造 良好条件。 收稿日期 :2008207216 作者简介 :包喜军 (19842) ,男 ,硕士 ,主要从事奶牛疾病的研究 , E2mail :xijunb @126. com 通讯作者 :李建基 ,E2mail :yzjjli @163. com 1  材料与方法1. 1  实验动物  健康经产母山羊 12 只 ,年龄 3~5岁 ,体重 20~25 kg。随机分为 2 组 ,每组 6 只 ; Ⅰ组为对照组 , Ⅱ组为试验组 ;实验羊均施行子宫角插管和子宫卵巢静脉插管手术。1. 2  器械与材料  XL230 扫描电子显微镜和FP5012/ 10 透射电镜 (荷兰产) , EMU16 超薄切片机与轮转式切片机 (浙江金华无线电厂 ) , H E2MAV ET950 全自动动物血液分析仪 (英国产) ,医用硅胶管 (日本进口) 外径 2. 0 mm ,内径 1. 0 mm。 表 2  辣木粉对肉鸡血液生化指标的影响 (g/ L) 日龄 项目 对照组 1 %辣木粉组 2 %辣木粉组 7 ALB 17. 84 ±1. 04 17. 24 ±0. 87 19. 85 ±0. 41 TP 64. 63 ±4. 85ab 59. 44 ±5. 24b 66. 88 ±6. 01a GLB 46. 79 ±4. 32 42. 20 ±4. 15 47. 03 ±3. 48 14 ALB 18. 63 ±3. 47 19. 67 ±2. 74 21. 41 ±2. 24 TP 65. 25 ±4. 54b 65. 82 ±6. 45b 69. 52 ±5. 41a GLB 46. 62 ±5. 51 46. 15 ±4. 64 48. 11 ±4. 04 42 ALB 14. 34 ±6. 87b 15. 65 ±4. 08ab 16. 04 ±3. 14ab TP 44. 81 ±7. 61b 59. 56 ±7. 84a 56. 41 ±6. 57a GLB 30. 53 ±4. 10b 43. 31 ±4. 68a 40. 37 ±5. 42a 3  讨论 红细胞数量的增加对血红蛋白的合成、造血功 能和免疫力的提高都有很大的促进作用[10 ] 。本试 验中 2 %辣木粉添加组肉鸡的红细胞数在 42 日龄 时显著高于 1 %组和对照组 ;而在 7 日龄和 14 日龄 时 ,两个试验组的红细胞数却都显著低于对照组。 产生的原因可能是辣木中含有丰富的铁和铜元素 , 可以促进红细胞的成熟[11 ] ;但在鸡生长早期红细胞 数低于对照组 ,主要原因可能是幼龄鸡对辣木的消 化吸收较低所致。 2 %试验组鸡体的 AL P , TP 和 GLB 在 7 日龄 时比对照组和 1 % 试验组的略有增加 ,但差异不显 著。14 日龄时 2 %组的 TP 值对比其他两组差异显 著 ( P < 0. 05) ;球蛋白 ( GLB)值比 1 %组和对照组都 高 ,但差异不显著 ( P > 0. 05) ;在 42 日龄时 ,2 %组 和 1 %组的 ALB 值、TP 值和 GLB 值都高于对照 组。特别是 1 %组和 2 %组的 TP 值和 GLB 值显著 高于对照组 ( P < 0. 05) ,说明添加辣木粉能促进免 疫球蛋白的合成 ,进而提高机体的免疫功能 ,特别是 添加量稍大效果较为明显。 参考文献 : [1 ]  刘昌芬 ,李国华. 辣木的研究现状及其开发前景[J ] . 云南热作 科技 ,2002 ,25 (3) :20224. [ 2 ]  刘昌芬 ,李国华. 辣木的营养价值 [J ] . 热带农业科技 ,2004 ,27 (1) :427. [ 3 ]  Anwar F , Latif S , Ashraf M , et al . Moringa Olei f era : a food plant wit h multiple medicinal uses[J ] . Phytot her Res ,2007 ,21 (1) :17225. [ 4 ]  Ghasi S , Nwobodo E , Ofili J O. Hypocholesterolemic effect s of crude ext ract of leaf of Moringa Olei f era Lam in high2fat diet fed wistar rat s[J ] . Journal of Et hnopharmacology , 2000 , 69 (1) :21225. [ 5 ]  Pankaj Tahiliani , Anand Kar. Role of Moringa Olei f era leaf ext ract in t he regulation of t hyroid hormone status in adult male and female rat s[J ] . Pharmacological Research , 2000 ,41 (3) :3192323. [ 6 ]  Guevara A P , Vargas C , Sakurai. An antitumor promoter f rom Moringa Olei f era L am [ J ] . Mutation Research , 1999 , 440 (2) : 1812188. [ 7 ]  罗云霞 ,陆斌 ,石卓功. 辣木的特性与价值及其在云南引种发 展的景况[J ] . 西部林业科学 , 2006 ,35 (12) :1372140. [ 8 ]  张燕平 ,段琼芬 ,苏建荣. 辣木的开发与利用 [J ] . 热带农业科 学 ,2004 ,24 (4) :42248. [ 9 ]  李树荣 ,许琳 ,毛夸云 ,等. 添加辣木对肉用鸡的增重试验 [J ] . 云南农业大学学报 ,2006 ,21 (4) :5452548. [ 10 ] 陈静 ,刘显军 ,边连全. 谷氨酰胺对早期断奶仔猪血细胞数目的 影响[J ] . 沈阳农业大学学报 ,2006 ,37 (4) :6512653. [ 11 ] 斯德勒. 家禽日龄中微量元素的平衡及新产品开发[J ] . 饲料 广角 ,2006 ,15 :17218. 73  Chinese Journal of Veterinary Medicine                     中国兽医杂志 2009 年 (第 45 卷)第 5 期 1. 3  子宫卵巢静脉插管术  常规腹中线旁切开腹 壁 ,暴露子宫角和子宫卵巢静脉 ,用手术镊游离子宫 卵巢静脉 0. 5~1 cm。在预插管部位做一荷包缝合 , 用手术剪在荷包缝合的中央剪一小口 ,将硅胶管迅速 插入血管内 ,待插入近子宫角处时将荷包缝合线拉 紧 ,缝合血管壁与浆膜。将硅胶管另一端引出体外。 1. 4  子宫角插管术与子宫腔人工感染  在输卵管 和子宫角交界处剪一小口 ,将硅胶管从小口内插入 子宫腔。用手隔子宫壁触摸硅胶管已插入子宫角中 部后 ,将荷包缝合线拉紧 ,固定硅胶管。硅胶管另一 端引出体外。 术后 ,试验组的羊立刻经子宫角插管注入大肠 杆菌 (来自羊子宫内膜炎病例 ,血清型 O18 ) 0. 5 × 1010个 ,隔 2 d 再次注入大肠杆菌 1 ×1010 个。对照 组注入等体积的灭菌生理盐水。 1. 5  临床与实验室观察 术前和术后 1、3、5、7、9、11 d 分别观测实验羊体温、呼吸和脉搏的变化 ,并同时 采集颈静脉血和子宫卵巢静脉血 ,进行白细胞计数。 在子宫内接种大肠杆菌前和接种后 1、3、5、7、 9、11 d 分别经子宫角插管无菌采集子宫分泌物。 若分泌物较少不易采集到时 ,可向子宫角内注入定 量的灭菌生理盐水。取子宫分泌物做涂片 ,按瑞氏 染色法染色镜检并进行细胞计数 ,以此确定子宫内 膜炎的发展进程[1 ] 。将采集到的子宫内分泌物迅速 移入灭菌试管内 ,送实验室进行检测。 手术采取试验前、发病时山羊的子宫壁 ,用于病 理组织学观察和扫描电镜观察。 2  结果 2. 1  临床症状与白细胞计数  实验羊体温、呼吸、 脉搏均有变化 ,但变化不明显 ( P > 0. 05) 。山羊经 2 次接种细菌后 ,出现明显的子宫内膜炎症状 ,血液中 白细胞数明显升高 ;子宫卵巢静脉血液中白细胞数 高于颈静脉血液 ,但发病后前者血液中白细胞数增 加的幅度低于后者 (表 1) 。 表 1  实验羊颈静脉( JV)与子宫静脉( UV)血液白细胞计数 ( ŠX ±S) (109 / L) 组别 试验前 发病后第 1 天 发病后第 3 天 发病后第 5 天 发病后第 7 天 发病后第 9 天 发病后第 11 天 Ⅰ J V 12. 37 ±3. 42 12. 40 ±2. 56 12. 70 ±4. 01 13. 09 ±2. 79 △ 12. 76 ±4. 31 12. 64 ±3. 21 12. 44 ±2. 35 UV 12. 86 ±2. 34 12. 79 ±3. 42 12. 72 ±3. 56 13. 45 ±3. 05 △ 12. 45 ±2. 90 12. 71 ±3. 46 12. 62 ±3. 19 Ⅱ J V 12. 75 ±1. 24 13. 08 ±1. 09 14. 34 ±1. 01 3 16. 80 ±3. 54 33△△ 15. 95 ±2. 58 3△ 16. 56 ±1. 20 3△ 16. 42 ±1. 39 3△ UV 16. 51 ±2. 89 16. 85 ±2. 10 17. 35 ±4. 01 3△ 18. 90 ±2. 89 33△△ 17. 05 ±3. 27 3△ 17. 32 ±1. 29 3△ 17. 21 ±1. 64 3△   与Ⅰ组比较 3 : P < 0. 05 , 3 3 : P < 0. 01 ,与试验前比较△: P < 0. 05 , △△: P < 0. 01 2. 2  子宫分泌物与子宫壁镜检结果  自接种大肠 杆菌后的第 5 天开始 ,子宫分泌物中的白细胞数介 于 11~30 之间 ,子宫内膜炎呈阳性 ,第 11 天时更为 明显 (图 1) 。 图 1  子宫颈口黏液白细胞增多  ( ×1 000) 镜下 ,病羊子宫黏膜损伤 ,上皮细胞变性、坏死 ,毛细 血管充血、淤血和水肿 ,有大量炎性细胞浸润 (图 2) 。子宫内膜上皮分泌细胞微绒毛和纤毛大片脱落 或部分脱落 ,致病细菌、坏死组织、细菌分泌物与纤 维素相互交织 ,凝结成薄膜 (图 3) 。 3  讨论 奶牛发生子宫内膜炎后 ,主要表现为精神不振 , 食欲减退 ,体温升高 ,前胃弛缓 ,白细胞总数升高等 全身性反应 ,随后或与此同时出现阴门排出大量分 泌物。初期 ,分泌物稀薄 ,随后变为黏液性或黏液脓 性分泌物 ,呈灰白色或黄白色 ,严重病例呈污红色或 棕色。本研究中实验奶山羊均出现了类似症状 ,表 明奶山羊可以用作奶牛子宫内膜炎的实验动物。 图 2  正常子宫(左)与发病子宫(右)组织结构  ( H. E. ×400) 病羊子宫黏膜损伤 ,毛细血管充血 83 中国兽医杂志 2009 年 (第 45 卷)第 5 期                     Chinese Journal of Veterinary Medicine    乳炎康对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验 及对奶牛隐性乳房炎的疗效 边志丰1 , 储卫华2 (1. 江苏省无锡市祖代鸡场有限公司 , 江苏 无锡 214161 ; 2. 中国药科大学生命科学与技术学院 , 江苏 南京 210009) 中图分类号 :S859. 7 ;S858. 23     文献标识码 :B     文章编号 :052926005 (2009) 0520039201   目前国内对奶牛乳房炎的治疗主要以抗生素为 收稿日期 :2007209214 通讯作者 :储卫华 ,E2mail :chuweihua2002 @yahoo . com. cn 主 ,因此存在诸多不利因素 ,如耐药性细菌的增加 ,使得抗生素的效果不理想 ;抗生素在奶中的存在 ,导致人无病吃药等问题。随着人们生活水平的提高 ,对奶制品的要求也不断提高 ,因此开发无抗生素 图 3  羊子宫内膜的电镜下结构变化 A :正常羊子宫上皮分泌细胞微绒毛均匀分布 ( ×25 000) ;B :发病羊子宫上皮损伤、微绒毛脱落 ( ×10 000) ; C :子宫腔内细菌、分泌物、纤维素相互交织 ( ×6 400)   子宫内膜炎的诊断主要依据子宫分泌物中的嗜 中性粒细胞的数量[2 ] 。有人局部应用重组人 IL28 或 L TB4 直接诱发子宫内膜炎[ 3 ] ,但这没有病原体 的参与 ,与临床病例存在一定的差异。本试验应用 自山羊子宫内膜炎病例分离的大肠杆菌人工制作单 一感染的子宫内膜炎模型 ,对机体的影响和导致的 病理变化接近自然病例 ,有实际意义。 嗜中性粒细胞是具有非特异性和特异性免疫功 能的嗜菌性白细胞。当病原微生物入侵引起炎症 时 ,感染部位的血液学变化和趋化作用对嗜中性粒 细胞有吸引作用 ,这个趋化过程使嗜中性粒细胞在 化学梯度的作用下到达感染部位 ,然后 ,它们就会粘 附病原体并将其吞噬 ,被吞噬的病原体粘附于嗜中 性粒细胞细胞质内的空泡上而被消化清除[4 ] 。本试 验对颈静脉和子宫静脉白细胞总数比较得知 ,颈静 脉白细胞增幅明显于子宫静脉 ,表明有大量白细胞参 与子宫局部防御 ,使子宫回流血白细胞数减少。 小鼠的肥大细胞能产生 IL23、IL24、IL25、IL26 和 GM2CSF 等细胞因子 , 有广泛的免疫调节作 用[5 ] 。患有子宫内膜炎的妇女 ,其组织中 IL26 含量 较高[ 6 ] 。嗜酸性粒细胞也可释放炎症介质和消灭微 生物的化学物质 ,如过氧化物和溶菌酶等。两种细 胞还可释放能产生激肽的释放酶 ,激肽是一种较强 的血管活性物质 ,能增强血管渗透性 ,从而使血液中 Ig G与子宫组织的微生物抗原结合 ,呈现杀菌作用。 此外 ,两种细胞释放的炎症介质可导致子宫表层上 皮损伤 ,也使血清抗体容易到达宫腔[ 7 ] 。 参考文献 : [ 1 ]  (日)金子一幸. 贾全福 ,摘. 奶牛子宫内膜炎的诊断[J ] . 兽医 学文摘 , 1984 (2) :376. [ 2 ]  St rube K , Hühn R , Busch W , et al . The phagocytotic activity a test for t he valuation of t he topical defence situation during t he t herapy of endomet ritis especially after t he application of Uterofertil in cat tle[J ] . Dt sch Tiererztl Wochschr ,1991 , 98 : 2052244. [3 ]  Zerbe H , Schubert h H J , Engelke F , et al . Development and comparison of in vivo and in vit ro models for endomet ritis in cows and mares[J ] . Theriogenology ,2003 ,60 :2092223. [4 ]  浩洪龙 , 王林锋 , 牟瑞营 , 等. 奶牛产后子宫感染与子宫免疫 [J ] . 中国畜牧兽医 , 2006 , 33 (9) :40246. [ 5 ]  Cai T Q , Weston P G , L und L A B , et al . Association be2 tween neut rophil functions and periparturient disorders in cows [J ] . Am J Vet Res , 1994 , 55 : 934. [ 6 ]  Holly E R , Robert L H , Holley M D , et al . The association of interleukin 6 wit h clinical and laboratory parameters of acute pelvic inflammatory disease [J ] . American Journal Obstet rics and Gynecology , 1999 , 181 (4) :9402944. [ 7 ]  葛利江 , 田文儒 , 宣长和. 母牛子宫内膜炎的免疫调控 [J ] . 黑龙江畜牧兽医 , 2001 (9) : 31233. 93  Chinese Journal of Veterinary Medicine                     中国兽医杂志 2009 年 (第 45 卷)第 5 期
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