犬膀胱内培植狗宝的技术研究

© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 犬õ膀õ胱õ内õ培õ植õ狗õ宝õ的õ技õ术õ研õ究 马卫明1, 王春敖1, 李永海1, 李建军2 (1. 山东农业大学动科院, 山东 泰安　271018; 　2. 佛山科学技术学院动物医学系, 广东 南海　528231) 中图分类号: R 282. 3[S865. 4 ]　文献标识码: B　文章编号: 052926005 (2001) 0120018202 　　狗宝是一种名贵动物性中药材, 始载于《本草纲 目》[1 ] , 近年来, 国内先后有人报道了人工培植狗宝 的试验[2, 3, 4 ] , 但只是报道了培植方法, 未对培植狗 宝期间犬的尿液、血液等进行系统研究。本研究通过 手术方法在犬的膀胱内植入核心异物, 配合致石性 饲料来培植狗宝, 并对犬的血液、尿液的生理生化指 标进行系统研究, 从而形成了一套培植狗宝的技术 操作规程, 并为人工培植狗宝提供了理论依据。 1　与方法 1. 1　实验动物　健康土种家犬 19 只, 年龄 3～ 7 岁, 体重 12～ 24 kg, 雌雄均有。术前 1 周驱虫, 禁食 24 h, 禁水 4～ 6 h。 1. 2　核心物、导尿管和致石性饲料　核心物由 0～ 1# 肠线与 3～ 4# 丝线剪成长约 1. 5～ 2. 0 cm 的线段 数根聚集而成, 中间用 3～ 4# 丝线打结固定, 保留长 约 20 cm 的线尾, 经 75% 酒精浸泡消毒备用。导尿 管内径 3 mm , 长 40 cm , 一端为蕈状。致石性饲料含 钙 0. 51% , 磷 1. 2% , 镁 0. 31% , 碳酸氢钠 0. 4%。 1. 3　手术方法　将犬仰卧保定, 用速眠新麻醉。术 部常规剃毛、消毒。母犬在耻骨前缘 3～ 4 cm 处沿腹 白线向前 8～ 10 cm 作切口, 公犬切口前端在包皮鞘 前的腹白线上, 然后向包皮鞘侧方延长到耻骨前缘。 沿切口部位切开皮肤和皮下组织, 暴露腹白线。术者 左手用有齿镊子夹持腹白线并向上提, 右手持手术 刀外向运刀经腹白线刺入腹腔内, 改用手术剪自小 切口向前、向后扩大切口, 显露膀胱。在膀胱体腹部 作一 1. 0～ 1. 5 cm 的小切口, 植入核心物。在膀胱体 背部插入导尿管。常规闭合腹腔切口, 术后饲喂致石 性饲料。 1. 4　血清、尿液测定　术前及术后第 3、15、45、75、 105、135 天分别空腹采集尿液和血液进行测定。血 液测定项目有: 红细胞、白细胞计数 (试管稀释法) , 血红蛋白含量 (沙利氏比色法) , 血清钙含量 (微量测 定法) , 血清磷含量 (磷钼酸法) , 血清尿素氮 (二乙酰2肟法)。尿液测定项目有: 物理性状观察, pH 值 (精 密pH 试纸法) , 尿沉渣 (显微镜法) , 尿蛋白定性试 验 (煮沸加热法) , 尿潜血 (联苯胺法) , 尿液钙、磷含 量 (测定方法同血清钙、磷测定)。 1. 5　狗宝形成的诊断　术后每天观察犬的采食饮 水情况, 排粪排尿情况。定期直肠内直检膀胱。术后 112 天, 对试验犬进行膀胱区的 X 线透视, 术后 146、178 天分别进行膀胱区的B 超检查。 1. 6　膀胱切开取石术　术式同 1. 3, 暴露膀胱后, 使膀胱游离, 将膀胱经牵引线拉至切口外, 切开膀 胱, 取出狗宝, 膀胱内再植入 1 个核心物后, 关闭膀 胱切口和腹部切口, 继续培植狗宝。用清水冲净狗宝 上附着的尿液和血凝块, 阴干后, 称重。 2　结果 2. 1　培植狗宝期间犬尿液性状的变化　试验犬在 术后第 15 天, 尿液开始由术前的浅黄、透明变为乳 白色浑浊, 以后逐渐出现褐色浑浊, 一直持续到实验 结束。术后第 15 天, 开始出现尿蛋白阳性及大量的 尿沉渣, 无机沉渣主要以磷酸铵镁为主, 还有少量的 磷酸钙、碳酸钙及草酸钙等, 有机沉渣主要由少量的 红细胞、肾上皮细胞、膀胱上皮细胞组成。术后 45 天, 尿潜血开始出现阳性 (从“+ ”到“+ + + ”)。 2. 2　尿液钙、磷、镁及 pH 值的变化　与术前相比, 术后尿钙降低, 尿磷及尿液 pH 值升高, 尿镁变化不 显著见表 1。 2. 3　血清无机离子、尿素氮及血常规变化见表 2。 表 1　尿液钙、磷、镁及 pH 的变化　 (X±SD ) 项　目 时间 (天) 0 15 45 75 105 135 Ca2+ (m gö100m l) 7. 74±0. 29 3. 69±0. 743 2. 16±0. 783 3 2. 79±0. 783 3 3. 59±1. 743 3 2. 13±0. 363 3 无机磷 (m gö100m l) 30. 91±7. 94 104. 76±13. 383 3 94. 44±2. 713 3 86. 47±10. 383 3 84. 99±18. 173 3 84. 44±5. 583 3 M g2+ (m gö100m l) 2. 16±0. 54 3. 63±0. 263 3. 86±0. 383 6. 11±0. 233 3 6. 34±0. 553 3 5. 34±0. 343 3 pH 值 6. 0±0. 3 6. 1±0. 1 7. 7±0. 53 3 7. 5±0. 53 3 6. 9±0. 43 3 7. 3±0. 53 3 　　注: 3 P< 0. 05　3 3 P< 0. 01 (下同) 收稿日期: 1999211215 81　　 实验观察 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中国兽医杂志 2001 年 (第 37 卷)第 1 期 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 表 2　血清无机离子、尿素氮及血常规的变化　 (X±SD ) 成　分 时间 (天) 0 15 45 75 105 135 Ca2+ (m gö100m l) 11. 39±0. 59 13. 53±0. 833 10. 77±0. 29 9. 65±0. 39 10. 47±0. 95 9. 35±0. 51 无机磷 (m gö100m l) 4. 79±0. 32 3. 96±0. 733 5. 26±0. 35 4. 13±0. 41 4. 37±0. 45 4. 29±0. 14 M g2+ (m gö100m l) 2. 06±0. 14 2. 53±0. 64 2. 49±0. 12 2. 13±0. 48 2. 17±0. 14 2. 12±0. 18 尿素氮 (m gö100m l) 20. 53±0. 61 20. 79±1. 95 30. 19±2. 88 32. 76±0. 523 3 4. 63±4. 183 3 42. 3±3. 753 3 RBC (106ömm 3) 7. 23±0. 37 6. 89±0. 40 6. 99±0. 38 6. 83±0. 40 6. 78±0. 41 6. 52±0. 37 WBC (103ömm 3) 9. 74±0. 51 9. 94±0. 69 9. 83±0. 70 10. 06±0. 74 10. 48±9. 23 10. 18±0. 88 H b (gö100m l) 15. 2±0. 6 14. 0±0. 6 14. 6±0. 3 13. 9±0. 5 13. 7±0. 4 14. 3±0. 8 2. 4　狗宝形成的确诊 2. 4. 1　术后犬的临床症状　大部分犬在术后 3 个 月表现出较为明显的临床症状, 当狗宝长到一定体 积时, 狗宝刺激膀胱粘膜出现尿频、排尿困难及终末 带血的症状, 排尿时间明显延长。 2. 4. 2　直肠内指检膀胱　检查者戴手套, 食指经肛 门插入直肠内, 另一只手在腹下向直肠方向推压膀 胱, 直肠内手指可感觉到圆形、卵圆形或不规则形状 的狗宝。该方法可靠、准确、简便。 2. 4. 3　膀胱区的X 线检查　术后 112 天, 对膀胱 区进行 X 线检查发现, 充盈的膀胱内出现阴影, 其 大小从 1×1 cm 2 至 4×4 cm 2。 2. 4. 4　膀胱区的B 超检查　术后 146、178 天分别对 犬的膀胱区进行B 超检查, 发现有强声团即结石的占 位回声图, 呈现出密集的光点, 融合成卵圆形、椭圆形 的白色灰阶区或不甚匀质、边缘模糊不清的图象。 2. 4. 5　狗宝的物理性状　试验犬的膀胱内均有狗 宝生成, 行膀胱切开术取出。狗宝围绕在核心物上, 呈颗粒状散在于膀胱内或呈卵圆形游离于膀胱内, 重量 20～ 49. 5g 不等。阴干后的狗宝呈圆形、卵圆形 或不规则形状, 白色、坚硬、断面呈同心圆状结构, 表 面光滑或粗糙。 3　讨论 3. 1　饲料钙、磷比例失调对狗宝形成的影响　钙、 磷比例失调可影响血清钙磷比率。血清钙、磷平衡直 接影响尿液盐类浓度, 而血清钙磷的平衡机制是由 甲状旁腺与甲状腺滤泡旁细胞, 配合维生素D 的代 谢共同完成的[5 ]。甲状旁腺产生的甲状旁腺素 (PTH ) , 其纯效应是增加血清钙, 降低血清磷及增 高肾脏尿磷的排泄。甲状腺旁细胞分泌的降钙素 (CT ) 是对高钙血症反应而产生的。PTH 和 CT 互 相协同, 对血钙浓度进行精细的调节。维生素D 在 体内可羟化为 1. 25—二羟胆钙化醇 (维生素D 3) , 它 能提高肠粘膜对钙的吸收。当给犬饲喂低钙高磷饲 料时, 可继发营养性甲状旁腺机能亢进, 血清中 PTH 浓度增高, 导致尿钙减少, 尿磷、尿镁增加 (表 1)。当尿液中的磷、镁升高, 达到饱和程度时, 在碱性 环境下即可形成磷酸铵镁结石[6 ]。 3. 2　尿液碱化对狗宝形成的影响　在饲料中添加 碳酸氢钠, 碱化饲料, 饲喂犬后亦可碱化其尿液, 促 进磷酸铵镁、磷酸钙的形成。肾小管尿液中形成的磷 酸铵镁, 受尿液动力的影响, 大部分随尿液下行到膀 胱[7 ]。本研究表明, 尿液无机沉渣以磷酸铵镁为主。 3. 3　核心的形成为狗宝晶体的附着提供了框架　 尿液结石的无机晶体随尿液下行到膀胱后, 附着在 植入的核心物成病理状态下由肾上皮、血凝块、纤维 蛋白等有机物构成的核心物周围, 结石晶体层层附 着, 最后形成较大结石[8 ]。通过手术在膀胱内植入丝 线和肠线做成的核心异物, 术中产生的纤维蛋白、血 凝块等包绕在核心物的周围, 进一步吸附结石晶体 而凝结为一种实体。结石初步形成后, 刺激膀胱粘 膜, 引起粘膜的炎性渗出与出血, 炎性渗出物附着在 结石外面又可构成新的核心, 供盐类结晶附着, 使结 石具有层状结构。 由此可见, 膀胱内植入核心物, 饲喂钙磷平衡失 调的碱性饲料以及手术中产生的炎性渗出物, 均为 狗宝形成不可缺少的条件。 参考文献: [ 1 ]　李时珍. 本草纲目[M ]. 北京: 人民卫生出版社, 1982. 2082. [ 2 ]　侯顺利. 狗宝的人工培植技术[J ]. 农业科技通讯, 1992, (6) : 24. [ 3 ]　赵喜伦. 人工培植狗宝试验研究 [ J ]. 中药材, 1992, 15 (5) : 11- 12. [ 4 ]　刘正阳, 李寿辉, 刘大斌. 人工培植狗宝试验研究初报 [ J ]. 中药材, 1998, 19 (12) : 32- 33. [ 5 ]　王小龙. 兽医临床病理学[M ]. 北京: 中国农业出版社, 1993. 122- 126. [ 6 ]　M cln toch G H. U ro lith ia sis in A nim als [J ]. A ustralian V eteri2 nary Journal, 1978, 7: 267- 271. [ 7 ]　胡仁昭, 张咏棠, 曾 进. 尿流动力对尿路结石形成的作用 [J ]. 中华实验外科杂志, 1993, 10 (21) : 72. [ 8 ]　沈绍基. 肾结石形成过程中肾病理和超微结构的变化 [ J ]. 中华泌尿外科杂志, 1986, 7 (1) : 10. 91中国兽医杂志 2001 年 (第 37 卷)第 1 期　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 实验观察