活血通络止痛膏治疗急性软组织损伤的研究

国际中医中药杂志2011年10月第33卷第10期IntJTradChinMed．0ct2011．、b1．33．No．10活血通络止痛膏治疗急性软组织损伤的研究王黎明谭庆远张岩邱冠军曲洪雪张伟东·893··实验研究·【摘要】目的观察活血通络止痛膏治疗软组织损伤的疗效及皮肤给药的安全性。方法以扶他林乳膏为对照组，以外损伤指数为指标，结合病理切片观察活血通络止痛膏对家兔软组织损伤的疗效。采用新西兰大白兔进行动物实验，观察活血通络止痛膏的皮肤急毒性、刺激性、过敏性反应。结果活血通络止痛膏可减少新西兰大白兔软组织损伤局部水肿及炎细胞渗出，促进血肿和瘀斑的吸收，外表损伤指数观察比较，A组[肿胀(0．32±0．35)分、淤斑(0．29±0．27)分]明显优于B组[肿胀(0．58±0．42)分、淤斑(0．91±0．34)分]<O．05)。A、B组的病理过程明显缩短，与C组比较差异均有统计学意义(P均<0．05)。嗜中性粒细胞浸润密度测定，A、B组与C组比较差异均有统计学意义(P均<0．05)，但A、B两组比较差异无统计学意义(尸>0．05)。结论活血通络止痛膏对急性软组织损伤有效，安全性较高。【关键词】软组织损伤；活血通络止痛膏ExperimentalstudyonthecurativeeffectofHuoxue-Tonglu0-ZhitongointmenttreatingacutesoftissueinjuryWANGLi-ming；ⅣQing-yuan,ZHANGYan,OmGuan-jun,QUHong-xue,ZHANGWei—dong．"DepartmentofTraumatology,YaitaiHospitalofTraditionalChineseMedicine,Yantai264000,ChinaCorrespondingauthor：WANGLi—ming,Email：dg120506@163．com[Abstract]ObjectiveToobservethecurativeeffectofHuoxue--Tongluo·-Zhitongointmenttreatingsofttissueinjury,andthesafetyofapplicationonskin．MethodsThetreatmentgroupwastreatedwithHuoxue-Tongluo—Zhitongointment．whilethecomparisongroupwastreatedwithV_0ta1illPil1．Acutetoxicityexperiment,irritantexperimentandhypersensitivityexperimentofskinwereperformedonNewZealandwhiterabbits．ResultsHuoxue-Tongluo-Zhitongointmentdecreasedlocaledemaandleukocyteeffusion，acceleratethere-absorptionofhematomas．Oninjurysignsindex，groupA[(O．32±0．35)，(0．29±0．27)]wasbetterthangroupB[(0．58±0．42)，(0．91±0．34)](P<0．05)．ThepathologicalprocessingroupAandBwasobviouslyreducedthangroupC(P<0．05)．Intheneutrophilinfiltrationdensitymeasuring：comparedwithgroupC，groupAandBbothshowedsignificantdifference<O．05)．buttherewasnosignificantdifferencebetweengroupAandB(P>O．05)．ConclusionHuoxue-Tongluo-Zhitongointmentperformedwellonthetreatmentofsoftissueinjury,withnotoxicity,irritation，andhypersensitivityofskin，aswellashighsafetyofadministration．【Keywords】SoftissueinjHI'y；Huoxue．Tongluo．Zhitongointment活血通络止痛膏是我院自制外用药，具有活血化瘀止痛、温经通络之功效，临床治疗软组织损伤应用多年疗效显著。本文观察活血通络止痛膏对软组织损伤的疗效，并通过皮肤刺激性实验及急毒实验观察其安全性，现将结果如下。1材料与方法1．1对新西兰兔软组织损伤的疗效试验DOh10．3760／cma．j．issn．1673-4246．2011．10．009作者单位：264000山东省烟台市中医医院骨伤科(王黎明、谭庆远、邱冠军、曲洪雪、张伟东)，病理科(张岩)通信作者：王黎明，Email：dg120506@163．Born1．1．1实验动物：健康新西兰大白兔40只，体重(2±0．5)kg，雌雄兼用，购自安丘市绿洲兔业有限公司种兔厂(许可证号：G080710)。1．1．2试验用药：活血通络止痛膏主要成分为威灵仙、冰片、大黄、红花、乳香、没药等，由烟台市中医医院制剂中心提供。1．1-3造模及分组方法：将20只新西兰大白兔按照体重大小顺序依次编号，应用随机数字表法随机分为治疗组(A组)、对照组(B组)、空白组(C组)各6只，雌雄各半。其余2只新西兰大白兔中1只为正常组，未造模及用药，正常肌肉组织切片；另1只为造模(损伤模型组)但不用任何国际中医中药杂志2011年10月第33卷第1O期IntJTradChinMed．Oct2011．v01．33．No．10药物，造模后第1天处死，制作病理切片。造模方法参照锤击造模法⋯，剪去兔的右腿根部内侧毛，涂以8％硫化钠脱毛剂，使兔子侧卧于兔盒中，右侧在下固定，将长60cm、直径2．7cm内壁光滑的硬塑料管下口垂直对准剪去毛的部位，将重100g、直径2．5cm的砝码置于塑料管上口，稳定后让砝码自由落下，打在兔子大腿内侧根部肌肉丰厚处，连续打击l5次，可见被打击部位皮肤出现细小出血点，为急性软组织损伤造模成功。1．1，4饲养及给药方法：造模成功后的新西兰大白兔在同一条件下(室温19~24℃，相对湿度约40％)用普通饲料喂养，自由饮水。造模后30min开始给药。A组：以打击部位为中心，均匀涂抹活血通络止痛膏，3次／d，3g／次。B组：以打击部位为中心，均匀涂抹扶他林乳膏，3次／d，3次。C组：外敷无药基质(丝素膏)，方法同A组。三组敷药后覆盖透气薄膜，并用透气胶带、绷带固定包扎，均给药14d。1．1．5标本处理：造模后第3、7、l4天用注射空气法快速处死大白兔，每次每组各处死2只。切开兔受打击部位皮肤，分离皮下组织，剪取损伤中心部位的肌组织。正常组取相同部位组织。1．1．6观察指标：(1)外表损伤指数：造模后的评分，①肿胀标准：肌肉肿胀明显，淤斑直径≥2．8cm者为3分；中等肿胀，淤斑直径≥1．9cm、<2．8cm者为2分；稍有肿胀，淤斑直径≥0．8cm、<1．8cm者为1分；无肿胀，淤斑直径<0．8cm者为0分。②皮下淤血标准：多量、块状、色紫暗、色深者为3分；中量片状、暗红、色浅者为2分；少量点状淤斑者为1分；色泽正常为0分。观察伤肢肿胀和淤斑情况，并作记录，外表损伤指数评分。(2)病理切片：各组于造模后分别于第3、7、14天以注射空气法快速处死治疗用家兔1只，完整截下造模大腿，置于10％甲醛溶液内固定3d，然后切取造模部组织样本(包括皮肤、皮下组织、肌肉等)，经脱水等处理后，石蜡包埋切片，HE染色备片供观察，观察项目：①创伤局部皮下组织、肌肉组织和创伤性无菌性炎症反应等病理表现；②嗜中性粒细胞计数。1．2皮肤刺激实验。。健康新西兰大白兔8只，体重2．0～2．5，雌雄各半，应用随机数字表法分成两组各4只。第1组为完整皮肤组，第2组为破损皮肤组(用针尖划破皮肤，以出血为度)。采用同体左右自身对照法。于给药前24h，将新西兰大白兔背部脊柱两侧毛用8％硫化钠溶液脱去，范围左右各约为50cm2。均以左侧作为对照，涂抹基质(丝素膏)1g；右侧涂通络活血止痛膏1g。以灭菌医用纱布两层覆盖后再用纸胶带固定。24h后，用温水除去残留的受试物，分别于去除受实物后l、24、48和72h肉眼观察涂抹部位有无红斑、水肿等。结果按刺激反应评分n206①红斑：无红斑为0分；勉强可见为1分；明显红斑为2分；中到重度红斑为3分；紫色红斑并伴有焦痂为4分。②水肿：无水肿为0分；勉强可见为1分；皮肤隆起轮廓清楚斑为2分；水肿隆起11TIII1并范围扩大为3分。最后处死动物，取涂敷药物部位的皮肤做病理组织学切片。1_3皮肤急性毒性实验取健康新西兰大白兔12只按照随机数字表法随机分为3组各4只。第l组为空白对照组，第2组为完整皮肤给药组，第3组为破损皮肤给药组(用针尖划破皮肤，以出血为度)。于给药前24h，将新西兰大白兔背部脊椎两侧毛用8％硫化钠溶液脱去，面积共约150cm2。治疗时脱毛区给药组涂抹通络活血止痛膏8g，对照组脱毛区涂抹涂基质(丝素膏)作为对照，然后用一层油纸及医用灭菌纱布二层覆盖，再以无刺激胶布封闭、固定，动物分笼饲养。所有动物给受试物24h后，用温开水洗去残留的受试物，在去除受试物后1h、24h、48h、72h至第7d，观察并记录动物的体重、皮肤、毛发、眼和黏膜、呼吸、循环、中枢神经系统、四肢活动等变化，若死亡则进行尸检并肉眼观察。当有肉眼可见病变时，则需进行病理组织学检查。1．4统计学方法国际中医中药杂志2011年10月第33卷第10期IntJTradChinMed．Oct2011．Vo1．33。No．10表1各组新西兰大白兔不同观察时间软组织损伤指数评分比较(±S)注：与C组比较，<0．05：与B组比较，<O．05表2各组新西兰大白兔不同观察时间病灶中嗜中性粒细胞浸润密度比较[个／油镜视野，(±S)]注：与C组比较，<0．05；与B组比较，治疗后第1、3、7、14天，bP>0．052_2皮肤刺激实验结果在观察期间，所有动物正常生长，毛色光亮，行为活动、饮水、饮食及大小便均正常，口、鼻、耳等处无异常分泌物，在各个观察时段涂抹部位均无明显红斑和水肿出现，两组动物其刺激评分均为0分。活血通络止痛膏与基质对正常皮肤和损伤皮肤的平均反应值均无明显差别，提示本品对家兔完整皮肤、破损皮肤用药均无明显刺激性反应。2．3皮肤急性毒性实验结果观察期内各组动物的摄食、粪便、皮毛、皮肤黏膜、呼吸、中枢神经系统、四肢活动均未见异常反应，未出现全身毒性反应，无一例死亡。3讨论中医学认为，筋脉损伤后导致血离经脉而瘀滞不通，不通则痛。因而在治疗时必须活血散瘀。中药外用可在创伤局部维持相对稳定的血药浓度，起到活血止痛、散瘀消肿作用。活血通络止痛膏是我院在大量临床实践的基础上的中药膏剂，以威灵仙、红花、乳香等为主药，具有活血化瘀、通经活络作用。诸药合用，可改善受伤部位微循环灌注，降低毛细血管通透性，消除创伤性炎症而达到消肿、止痛的目的。上述结果中，应用活血通络止痛膏、扶他林乳膏后均可改善微循环、促进瘀血的吸收，对软组织损伤后肿胀的恢复作用明显。活血通络止痛膏组大白兔在组织切片早期可见嗜中性粒细胞浸润密度较低，局部炎症水肿消散迅速，提示局部炎症反应被抑制；在后期局部可见小血管增多，纤维母细胞增生活跃，损伤组织修复快，创伤局部的愈合质量较好。与扶他林乳膏组比较，活血通络止痛膏在活血化瘀、消肿止痛方面有一定优势，抑制炎症反应方面两者无明显差异。另外，皮肤刺激实验、急毒性实验、皮肤致敏实验均提示活血通络止痛膏未引起新西兰大白兔的皮肤过敏或皮炎，表明其安全性较高。当然本实验也存在不足，如所选择的实验方法较简单，不能阐明抗炎镇痛作用的具体机制，还需要进一步观察对损伤组织修复的组织细胞学等。综上所述，活血通络止痛膏具有消炎、止痛、消肿作用，符合中医采用活血化瘀、消肿止痛的治疗原则用于治疗软组织损伤，且安全、低毒，不失为治疗软组织损伤的较好的外用药。参考文献[1]邱桐，朱换平，练维娟，等．踝舒对急性软组织损伤PGE2影响的治疗研究．中医正骨，2004，16(1)：15．16．[2]王萧枫，张鸿振，刘焕兴，等．伤科II号膏药对急性筋伤兔模作用的实验研究．中医正骨，2007，19(11)：3[3]中华人民共和国卫生部药政管理局．新药研究指南(药学、药理学、毒理学)．1994，205，206，204．[4]程春生，张耘，李春游，等．中药熏洗法治疗急性软组织损伤的实验研究．中医正骨，2005，17(11)：12-13．(收稿日期：2011-01—12)(本文编辑：高荣慧)