盐酸二甲双胍肠溶片的药动学及生物等效性研究[1]

© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net ·1552 · China Pharmacy 2009 Vol120 No 120 中国药房 2009 年第 20 卷第 20 期盐酸二甲双胍肠溶片是双胍类口服降糖药。本试验对昆山培力药品有限公司生产的二甲双胍肠溶片进行药动学研究 ,并以中美上海施贵宝制药有限公司生产的二甲双胍肠溶片作为参比制剂进行人体相对生物利用度的测定 ,从而作出生物等效性评价。1 材料111 仪器高效液相色谱仪 ,包括 2690 溶剂管理系统、996PDA 检测器、Millenium2000 数据处理系统 (美国 Waters 公司) 。112 试药受试制剂 :盐酸二甲双胍肠溶片 (昆山培力药品有限公司 ,规格 :每片 015 g ;批号 : 0702018) ;参比制剂 :盐酸二甲双胍肠溶片 (中美上海施贵宝制药有限公司 ,规格 :每片 015 g ,批号 :0612062) ; 内标 : 苯乙双胍标准品 (中国药品生物制品检定所 ,批号 :0611071 ,含量 : 9515 %) 。乙腈为色谱纯 ,正己烷、乙醚为分析纯。 2 方法与结果211 受试者选择26 名男性健康志愿者 , 年龄 (1811 ±119) a , 体质量(6910 ±713) kg。受试者均通过健康体格检查 ,包括心电图、血压、尿常规、肝肾功能等均正常 ;且在试验前 2 周内和试验期间禁服其它药物。所有受试者均签署知情同意书 ,且试验经青岛市儿童医院医学伦理委员会批准。212 试验设计按自身对照交叉试验设计。受试者随机分 2 组 ,试验当日晨空腹用 200 mL 温水送服 110 g 受试制剂或参比制剂 ,4 h 后统一进食低脂标准餐。清洗期 1 周后 ,2 组交叉进行。试验中禁烟、酒及含咖啡因的饮料。213 生物样本采集受试者肘静脉处埋入留置针 ( IN S YTE - W20 GA ,1125 IN , 美国产) , 分别于给药前 0 h 及给药后 01167、0125、01333、015、01667、1、115、2、3、4、5、6 h 时抽取静脉血 410 mL ,离心分离出血清 ,置聚丙烯塑料试管中于 —20 ℃保存 ,备测。214 样品处理* 主管药师。研究方向 : 临床药学。电话 : 0532 - 82672860。E -mail :jin9820 @sina . com 盐酸二甲双胍肠溶片的药动学及生物等效性研究 高 洁 1 * , 曲素新 2(11青岛市市南区八大峡社区卫生服务中心 , 青岛市 266002 ; 21 青岛市儿童医院 , 青岛市 266002) 中图分类号 R96911 文献标识码 A 文章编号 1001- 0408 (2009) 20 - 1552- 02 摘 要 目的 :研究盐酸二甲双胍肠溶片的药动学和相对生物利用度 ,验证国产与进口盐酸二甲双胍肠溶片的生物等效性。方法 : 采用高效液相色谱法测定 26 名健康男性志愿者自身交叉单剂量口服国产与进口盐酸二甲双胍肠溶片 1 000 mg 后的经 - 时血药 浓度 ,计算主要药动学参数以及国产制剂的相对生物利用度。结果 :国产与进口盐酸二甲双胍肠溶片的药 - 时曲线符合一室模型 , 其主要药动学参数 : Cm ax 分别为 (8419 ±1614) 、(8415 ±1318)μg ·L - 1 , t m ax 分别为 (0167 ±0107) 、(0177 ±0108) h , t 1/ 2 ke 分别为 (1190 ±0117) 、(1179 ±0119) h , AU C0 ～t 分别为 (16119 ±1618) 、(15712 ±1917) μg ·h ·L - 1 , AU C0 ～ ∞分别为 (17917 ±1812) 、 (17314 ±1912) μg ·h ·L - 1。国产相对于进口盐酸二甲双胍肠溶片的生物利用度为 ( 10910 ±712) %。结论 :国产与进口盐酸二甲双 胍肠溶片生物等效。 关键词 盐酸二甲双胍肠溶片 ;高效液相色谱法 ;药动学 ;生物等效性 Pharmacokinet ics and Bioequivalence of Metf ormin Hydrochloride Enteric - coated Tablets GAO J ie (Qingdao Badaxia Sout h Dist rict Communit y Healt h Service Center , Qingdao 266002 , China) QU Su- xin (Qingdao Municipal Children’ s Hospital , Qingdao 266002 , China) ABSTRACT OBJ EC T IV E : To st udy t he p harmacokinetics and relative bioavailability of metformin hydrochloride enteric - coated tablet s and validate t he bioequivalence between t he domestic and t he imported metformin hydrochloride enteric - coated tablet s1 M E THODS : An oral single dose (1 000 mg) of domestic or imported metformin hydrochloride enteric - coated tablet s was given to 26 healt hy volunteers in a randomized crossover st udy1 The time - concent rations of metformin hydrochloride were determined by HPL C1 The p harmacokinetic parameters as well as relative bioavailability of t he domestic tablet s were comput2 ed1 R ESUL TS : The concent ration - time curves of t he two kinds of metformin hydrochloride enteric - coated tablet s were in line wit h one - compart ment model1 The main p harmacokinetic parameters of t he domestic vs1 t he imported metformin hy2 drochloride enteric - coated tablet s were as follows : Cm ax (8419 ±1614)μg ·L - 1 vs1(8415 ±1318)μg ·L - 1 ; t m ax (0167 ±0107) h vs1(0177 ±0108) h ; t 1/ 2 Ke (1190 ±0117) h vs1(1179 ±0119) h ; AU C0 ～t (16119 ±1618) μg ·h ·L - 1 vs1(15712 ±1917) μg ·h · L - 1 ; AU C0 ～ ∞(17917 ±1812)μg ·h ·L - 1 vs1 (17314 ±1912)μg ·h ·L - 11 The relative bioavailability of t he domestic enteric - coated tablet s was (10910 ±712) % as against t he imported enteric - coated tablet s1 CONCL U SION : The two kinds of tablet s were bioequivalent 1 KEY WO RDS Metformin hydrochloride enteric - coated tablet ; HPL C ; Pharmacokinetics ; Bioequivalence © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 中国药房 2009 年第 20 卷第 20 期 China Pharmacy 2009 Vol120 No 120 ·1553 · 取血清 950μL ,加入内标溶液 (1175 mg ·L - 1 苯乙双胍的 乙腈溶液) 50μL ,涡旋振荡 30 s ,加入提取液 (正乙烷 ∶乙醚 = 1 ∶1) 4 mL ,涡旋振荡 2 min , 3 500 r ·min - 1 离心 10 min ,移 出有机层 ,在 40 ℃水浴中氮气吹干 ,残渣用乙腈 100μL 复溶 后取 20μL 进样。整个操作过程均应在严格避光条件下进 行。 215 色谱条件 [1 ] 色谱柱 : Supercosil C18 (250 mm ×416 mm , 5μm) ; 流动 相 :乙腈 - 水 (65 ∶35) ;流速 : 111 mL ·min - 1 ;紫外检测波长 : 238 nm ;柱温 :30 ℃;内标 :苯乙双胍。在本试验条件下 ,血清中 二甲双胍与内标苯乙双胍分离良好 ,不受血清中内源性物质的 干扰。二甲双胍与内标苯乙双胍的保留时间分别为 5180、7150 min。色谱见图 1。 216 标准曲线的绘制 取空白血清 ,准确加入二甲双胍肠溶片标准液使其浓度分 别为 215、5、10、20、40、80、120、250μg ·L - 1 ,各取 950μL 依 “214”项下方法处理。以二甲双胍峰面积与内标峰面积的比值 ( Y ) 对二甲双胍浓度 ( X ) 进行线性回归 , 得回归方程为 Y = 01474 8X + 721413 3 ( r = 01999 , n = 8) 。结果 ,二甲双胍线性 范围为 1010 ～12010μg ·L - 1。最低检测限为 1125μg ·L - 1。 217 方法回收率及精密度试验 取空白血清 , 准确加入二甲双胍肠溶片标准液 , 配成血清 浓度分别为 10、40、120μg ·L - 1 的低、中、高 3 种浓度的样品 , 各取 950μL 依“214”项下方法处理 ,每种浓度日内平行测定 5 次 ,并隔日测定 1 次 ,共 5 d ,分别计算相对回收率和日内、日间 RS D 及绝对回收率 ,结果见表 1。 表 1 精密度及回收率试验结果 ( n = 5) Tab 1 Results of prec ision and recovery tests ( n = 5) 浓度 /μg ·L - 1 日内精密度 日间精密度 相对回收 率/ % 绝对回收 率/ %测得浓度/μg ·L - 1 RS D / % 测得浓度 /μg ·L - 1 RS D / % 10 918 ±0170 8125 916 ±0190 9156 9613 ±212 9014 ±411 40 3918 ±1112 2190 3915 ±1143 3170 9916 ±218 9512 ±416 120 12517 ±3189 4110 12719 ±3120 3140 10512 ±217 9513 ±314 218 数据处理 试验数据采用 3p 97程序进行药动学参数计算 , AU C用梯 形法计算 , Cm ax 、tm ax 为实测值。消除半衰期 ( t1/ 2 ke) 用末端相 的血药浓度对数与时间进行回归、求算 , 再用公式 t1/ 2 = 01693/ t 1/ 2ke ,求出 t 1/ 2。以参比制剂的曲线下面积 AU C0 ～t 为 标准 ,计算受试制剂的相对生物利用度 ,并对 AU C0 ～t 、Cm ax 的 对数转换值进行方差分析和双单侧 t 检验 , 按 80 %～125 % (AU C) 和 70 %～143 % ( Cm ax) 为判定标准 ,考察两制剂是否具 生物等效性。 219 药动学参数 26 名受试者口服国产及进口二甲双胍肠溶片各 1 000 mg 后的平均药 - 时曲线见图 2 ; 2 种片剂的主要药动学参数见表 2。国产二甲双胍肠溶片的平均相对生物利用度为 ( 10910 ± 712) %。Cm ax、AU C0 ～1经对数转换后进行方差分析表明 , 两制 剂在处方间及周期间差异均无显著性 ( P > 0105) ; 在α= 0105 水平上进行双单侧 t 检验表明 ,其检验结果 t 1、t 2 均大于 t 1 — 0105 (22) = 11717 ,故接受两制剂生物等效的假设。Cm ax 、AU C0 ～t 的 90 %置信区间分别为 9416 %～9916 % , 10515 %～10812 % , 按 照生物等效性判定标准 , 即认为国产制剂和进口制剂生物等 效。 3 讨论 本文建立的测定二甲双胍肠溶片血药浓度的高效液相色 谱法 , 考核得出的回收率和日内、日间精密度均符合临床血药 浓度检测的要求。 因二甲双胍肠溶片见光极易分解 ,故样本测定时均应在避 光条件下快速进行。试验结果表明 ,国产与进口二甲双胍肠溶 片具有生物等效性 , 而肠溶片能明显减少其胃肠道的刺激 [2 ] , 并可在餐前 30 min 服用 ,使餐后血糖高峰同步 ,这更有利于降 低糖尿病患者的血糖 ,从而提高治疗效果。 参考文献 [ 1 ] 刘 京 ,申竹芳 ,谢明智 1 HPL C 法测定二甲双胍肠溶片 剂的人体药代动力学及其生物利用度 [J ] 1 中国临床药 理学杂志 ,1999 ,10 (3) :265 1 [ 2 ] 胡绍文 ,郭瑞林 1 实用糖尿病学 [ M ]1 第 5 版 1 北京 :人 民军医出版社 ,2000 :126 1 (收稿日期 :2009- 03- 25 修回日期 :2009- 04- 25) 表 2 26 名受试者单剂量口服 1 000mg 国产与进口盐酸二 甲双胍后的主要药动学参数( x ±s) Tab 2 Ma in pharmacokinet ic parameters of metf ormin hydrochloride in 26 health volunteers af ter oral adminis2 trat ion of single dose( 1 000 mg) of domest ic or imported metf ormin hydrochloride enteric - coated tablets ( x ±s) 药动学参数 国产二甲双胍肠溶片 进口二甲双胍肠溶片 Cm a x /μg ·L - 1 8419 ±1614 8415 ±1318 t m a x / h 0167 ±0107 0177 ±0108 AUC0 ～t /μg ·h ·L - 1 16119 ±1618 15712 ±1917 AUC0 ～ ∞/μg ·h ·L - 1 17917 ±1812 17314 ±1912 t 1/ 2ke/ h 1190 ±0117 1179 ±0119图 1 高效液相色谱A1 空白血清 ;B1 空白血清 + 二甲双胍标准品 ; C1 服药后血浆样品 ;11二甲双胍 ;21 苯乙双胍Fig 1 HPLCA1 blank serum ; B1 blank serum + standard metformin ; C1 serumsample af ter medication ; 11 metformin ; 21 p henformin 图 2 26 名受试者单剂量口服 1 000mg 国产与进口盐酸二甲双胍肠溶片后的平均药 - 时曲线Fig 2 Mean serum concentrat ion - t ime curves of met2f ormin hydrochloride in 26 health volunteers af ter oral ad2ministrat ion of single dose ( 1 000 mg) of domest ic or im2ported metf ormin hydrochloride enteric - coated tablets