GB 26405-2011 食品添加剂 叶黄素

GBGBGBGB 26405-2011 食品安全国家 食品添加剂 叶黄素 2011-03-15 发布 2011-05-15 实施 中华人民共和国国家标准 中华人民共和国卫生部 发布 1 食品安全国家标准 食品添加剂 叶黄素 1 范围 本标准适用于以万寿菊（Tagetes erecta L.）油树脂为原料，经皂化、提取精制而成的食品添加 剂叶黄素。商品化的叶黄素产品可含有用于标准化等目的的食用植物油、糊精、抗氧化剂等辅料。 2 分子式、结构式和相对分子质量 2.1 分子式 C40H56O2 2.2 结构式 2.3 相对分子质量 568.88（按 2007年国际相对原子质量） 3 技术要求 3.1 感官要求：应符合表 1 的规定。 表 1 感官要求 项 目 要 求 检验方法 色泽 桔黄色至桔红色 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然 光线下，观察其色泽和状态。组织状态 粉末 3.2 理化指标：应符合表 2 的规定。 表 2 理化指标 项 目 指 标 检验方法 总类胡萝卜素，w/% ≥ 80.0 附录 A中 A.3 叶黄素，w/% ≥ 70.0 附录 A中 A.4 玉米黄质，w/% ≤ 9.0 附录 A中 A.4 干燥减量，w/% ≤ 1.0 GB 5009.3减压干燥法 灰分，w/% ≤ 1.0 GB 5009.4 正己烷/（mg/kg） ≤ 50 附录 A中 A.5 铅（Pb）/（mg/kg） ≤ 3 GB 5009.12 总砷（以 As 计）/（mg/kg） ≤ 3 GB/T 5009.11 ????? www.bzfxw.com ???? 2 附 录 A 检验方法 A.1 一般规定 本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682—2008中规定的三 级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均 按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指 水溶液。 A.2 鉴别试验 A.2.1 不溶于水，极微溶于正己烷，溶于乙醇和氯仿。 A.2.2 在测定总类胡萝卜素含量试验中，试样液在446nm附近有最大吸收。 A.2.3 在测定叶黄素含量试验中，试样液在液相色谱图中的主峰保留时间应与标准溶液中叶黄素的 保留时间相同。 A.3 总类胡萝卜素的测定 A.3.1 试剂和材料 A.3.1.1 溶剂：正己烷、丙酮、甲苯和无水乙醇的混合物(10∶7∶7∶6)。 A.3.1.2 无水乙醇。 A.3.2 仪器和设备 紫外-可见分光光度计。 A.3.3 分析步骤 准确称取 0.03g试样，精确至 0.000 1 g，用 A.3.1.1溶剂溶解，转移至 100 mL容量瓶中，加 A.3.1.1 溶剂定容至刻度，摇匀。取此试样液 1mL 于 100mL 容量瓶中，使用无水乙醇定容至刻度，置于 1 cm 比色皿中，以无水乙醇做空白对照，用紫外-可见分光光度计在 446nm±1nm 处的最大吸收波长处测 定吸光度。（吸光度应控制在 0.3~0.7之间，否则应调整试样液浓度，再重新测定吸光度。） A.3.4 结果计算 总类胡萝卜素含量以总类胡萝卜素的质量分数 w0计，数值以%表示，按公式（A.1）计算： 2550 1 0 ×= c A w …………………………（A.1） 式中： A——实际测定试样液的吸光度； c——被测试样液的浓度的数值，单位为克每毫升（g/mL）； 2550——1%试样液在无水乙醇中波长 446nm处的吸收系数。 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对 差值不大于算术平均值的 1.5 %，计算结果保留小数点后一位有效数字。 A.4 叶黄素和玉米黄质的测定 A.4.1 试剂和材料 A.4.1.1 正己烷：色谱纯。 A.4.1.2 乙酸乙酯：色谱纯。 A.4.1.3 叶黄素标准品：已知纯度。 3 A.4.1.4 玉米黄质标准品：已知纯度。 A.4.2 仪器和设备 高效液相色谱仪（检测器波长为 446nm）。 A.4.3 参考色谱条件 A.4.3.1 色谱柱：硅胶柱，4.6mm×250mm，粒度3µm；或其他等效的色谱柱。 A.4.3.2 流动相：按正己烷∶乙酸乙酯=70∶30（体积比）配制，混合均匀后，用0.45μm滤膜过滤， 超声脱气后备用。 A.4.3.3 柱温：室温。 A.4.3.4 流动相流速: 1.5 mL/min。 A.4.3.5 进样量：10 μL。 A.4.4 分析步骤 A.4.4.1 标准溶液的制备 分别称取约 0.01g叶黄素和玉米黄质标准品，精确至 0.000 1g，用流动相溶解，移入一个 50mL 容量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀备用。 A.4.4.2 试样液的制备 称取 0.025g~0.027g试样，精确至 0.000 1g，用流动相溶解，移入一个 100mL 容量瓶中，加流动 相定容至刻度，摇匀备用。 A.4.4.3 测定 在 A.4.3参考色谱条件下，对叶黄素和玉米黄质的标准溶液进行测定，色谱图。要求以叶黄 素峰计，理论板数至少为 5000，主峰与异构体峰的分离度至少为 1.5。 在 A.4.3参考色谱条件下，对试样液进行测定，根据标准品的保留时间定性，记录色谱图。重复 实验两次，分别得到叶黄素和玉米黄质的平均峰面积值。 A.4.5 结果计算 叶黄素含量以叶黄素的质量分数 w1计，数值以%表示，按公式（A.2）计算： 101 Pww ×= ……………………………………（A.2） 玉米黄质含量以玉米黄质的质量分数 w2计，数值以%表示，按公式（A.3）计算： 202 Pww ×= ……………………………………（A.3） 式中： w 0 ——按照本标准 A.3测定的总类胡萝卜素的质量分数，数值以%表示； P 1 ——叶黄素的峰面积百分比； P 2 ——玉米黄质的峰面积百分比。 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对 差值不大于算术平均值的 2 %，计算结果保留小数点后一位有效数字。 A.5 正己烷的测定 A.5.1 仪器和设备 气相色谱仪，带氢火焰离子检测器（FID）和顶空进样器。 A.5.2 参考色谱条件 A.5.2.1 色谱柱：DB-624毛细管柱，30m×0.53mm，膜厚3.0µm；或其他等效的色谱柱。 A.5.2.2 载气：氦气或氮气。 A.5.2.3 载气流量：3.0 mL/min。 ????? www.bzfxw.com ???? 4 A.5.2.4 进样口温度：220℃。 A.5.2.5 柱温：40℃，保持3min，以3.5℃/min升至65℃，再以20℃／min升至220℃，保持5 min。 A.5.2.6 检测器温度：235℃。 A.5.2.7 进样体积：1mL定量环。 A.5.2.8 分流比：3∶1。 A.5.3 顶空条件 A.5.3.1 顶空瓶温：80℃。 A.5.3.2 定量环温度：85℃。 A.5.3.3 传输线温度：100℃。 A.5.3.4 顶空瓶平衡时间：40.0min。 A.5.3.5 气相循环时间：30.0min。 A.5.3.6 加压时间：0.2min。 A.5.3.7 定量环填充时间：0.2min。 A.5.3.8 定量环平衡时间：0.05min。 A.5.3.9 进样时间：1.0min。 A.5.3.10 顶空瓶压力：95.15kPa。 A.5.4 分析步骤 A.5.4.1 对照液制备 精密吸取1.5µL正己烷于100mL容量瓶，用二甲基甲酰胺（DMF）稀释至刻度，摇匀，吸取25.0 mL 至50 mL容量瓶，用DMF定容，此为对照液（该对照液中正己烷浓度为0.00495mg/mL）。 灵敏度溶液配制：吸取对照液1.0 mL于10 mL容量瓶，用DMF定容，摇匀（灵敏度溶液中正己烷 浓度为0.000495 mg/mL）。 A.5.4.2 试样液制备 精密称取约300mg试样，置于10mL顶空瓶，加3.0mL DMF稀释，摇匀。 A.5.4.3 系统适应性要求 取上述A.5.4.1对照液3.0mL于10mL顶空瓶，连续进6针，主峰理论板数应不小于5000，峰面积RSD 应不大于10.0%，灵敏度溶液中主峰信噪比应不小于3。 A.5.5 结果计算 用外标法计算样品中的正己烷，正己烷的残留量以正己烷的质量分数w3计，数值以毫克每千克 （mg/kg）表示，按公式（A.4）计算： 6 3 10×× × = XR RX CA CA w ………………………………（A.4） 式中： A X ——试样液中正己烷的峰面积的数值； C R ——对照液中正己烷的浓度的数值，单位为毫克每毫升（mg/mL）； A R ——对照液中正己烷的峰面积的数值； C X ——试样液的浓度的数值，单位为毫克每毫升（mg/mL）。 ___________________________