第35卷第1期
1002006年1月
卫生研究
JOURNALOFHYGIENERESEARCH
Vol35 Nol
Jan.2006
文章编号:1000-8020(2006)01.0100-03
小鼠放射性免疫低下模型的研究
·实验研究·
李业鹏李燕傻韩春卉李玉伟赵熙 江涛钟凯张靖 陈延君计融
中国疾病顶防控制中心营养与食品安拿所,100021北京
摘要:目的保健食品功能性评价中放射性免疫低下模型建立的研究。方法采用30—349的健康雄
性昆明种小鼠90只,随机分成6个组,每组15只,包括3个照射姐和3个相应的时照姐。对照射组分剐以
3Gy、4Gr、5Gy剂量T射线一次性全身照射后,观察照射后3、7、14、2l天,小鼠细胞免疫(迟发型变态反应)、体
液免疫(血清溶血试验)、单桩巨噬细胞系统(鸡红细胞吞噬试验)、NK细胞活性试验等四个方面的变化情况。
结果与结论(1)一次性全身3Gy、4铆、5Gy照射后,在一定的时间范围内,小鼠的免疫系统处于免疫低下状
态。(2)不同免疫指标损伤开始恢复的时间不同。血清溶血素对辐射损伤最敏感且损伤恢复最慢,至辐照后
2l天尚未恢复,腹腔巨噬细胞对辐射损伤恢复最快,在辐照后7d即恢复井代偿性增强。(3)经3Gy、4Gy、5Gy
一次性奎身照射后3d,体重增长值、脏器指数、足趾肿胀度、血中半数溶血值、腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬指
数均赴于低下状态,可以建立教射性免疫低下模型,以评价保健食品的对辐射损待具有辅助保护功能、免疫
调节功能和减低放疗毒副作用的动物模型。(4)脾NK细胞活性指标不适于放射性免疫低下模型的建立。
关键词:抗辐射辐射损伤 免疫低下动物模型
中囤分类号:'1"5218R155.51 文献标识码:A
StudyOUimmunorepressivemicemodelbygammairradiation
LiYe—peng,LiYan—jun,HanChun-hui,LiYu-wei.etal
InstituteofNutritionandFoodSafety,ChineseCenterforDiseaseControlandPrevention,Beijing100021,China
Abstract:ObJectiveToestablishtheimmunorepresslvemicemodelbyirradiation.MemodsThe90Kumningmice
whichthewejghtisfrom30to349㈣treatedwith3Gy,4Gy,5Gygammairradiation.thedelayedallergylpsting,the
:beixlmbaemolysinleveltesting.thephagocytosingfunctionstestingandtheNKcellactivitytestingwe”peffomledat3th,
7th,14th,21thdaysafterirradiationrespectively.ResultsandConclusion(1)All3Gy,4Gy,5Gygammairradiation
CallcⅡu8emiceinununorepressivestateexcepttheNKcellactivity.(2)Thetimeofcomebackafterinadiationisdifferent
fromimmunityitemsTheserumhaemolysinlevelismostsensitivityinall,butitcomebackmostslowlyafterirradiation
ThephagocytosingfunctionscomebackmoBtmpidlyafterirradiation(3)Itsuggeststhattheirradiationimmunorepressive
nficemodelCarlheestabhslaedusingitinordertoevaluatetheenhaneeingimmunefunction.assistingirradiationhazard
protectionfunefionandalleviatingtoxicityfunctionofirradiationtreatraentandchemicaltreatment(4)theNKcellactivity
isnotsuitablytoimmunorespressivebygammairradiation.
Keywords:gan/mairradiation,JmmunorepressJve,themicemodel
《保健食品检验与评价程序和方法一1996)规定抗辐射的
保健食品必须能抵抗致死剂量的辐射“1。同时存在着辐射剂
量、评价指标、可操作性等多方面的问
”]。为了系统研究辐
射后小鼠免疫系统各项指标的变化情况,作者对不同的辐射
剂量一次性照射小鼠后,不同时间细胞免疫(迟发型变态反
应)、体液免疫(血清溶血试验)、单核巨噬细胞系统(鸡红细胞
吞噬试验)、NK细胞活性试验的变化情况进行了系统的研究。
1材料与方法
1.1实验动物
基金项目:卫生部保健食品专项基金
作者简介:李业鹏.女,医学硕士,副研究员
由中国人民解放军事医学科学院实验动物中心提供的
30—349昆明种雄性健康小鼠360只(京动许字99001)。
1.2实验动物分组
以动物体重随机分组。每次检测3Gy、4Gy、5Gy剂量组及
其相应对照组共6小组.每小组15只,共90只。分别于照射
后3、7、14和2l天4次进行免疫系统各项指标检测。
1.3照射方法
该研究选择一次性全身照射。照射仪器:”7cs源,90.516
R/min,照射时问分别为331rain、4.42min、552min.即相当于
3Gy、4Gy、5Gyu
1.4实验方法
根据《保健食品功能学评价程序和检测方法一1996)。在
照射后3、7、14和2l天.分4次进行脾脏指数测定、足趾肿胀
万方数据
第1期 李业鹏,等小鼠放射性免疫低下模型的研究 10l
度实验、血清溶血素实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞宴验、
脾NK细胞活性实验。
1.4.1腹腔免疫实验前4天给每只小鼠腹腔注射2000r/
min,lOmln离心后,2%压积羊血红细胞生理盐水溶液02ml。
1.4.2绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应——足趾肿
胀法。
1.4.3血清溶血素测定——半数溶血素实验。
1.4.4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)。
1.4.5b[K细胞活性实验(LOH法)。
1.4.6统计方法各照射组与其相应的对照组的原始数据
进行方差齐性检验,符合方差齐性的要求,用两组t检验方法
进行统计处理,方差不齐的,用两组t’检验方法进行统计。
2结果
2.1不同剂量照射后.不同时间小鼠体重的变化结果
裹1不同照射剂量不同时间各组小鼠体重增长
情况I进行指标检副前)
Table1 Theresult0fbodyweightIncreaseofmice
bydifferentirradiationlbeforetesting)(n=15。j±j)g
注:与0Gy比较(1)P<0.01,(2)P<00.5
由
1可见,以时问变化看,对照组和照射组的小鼠体重
增长值均随着时间的变化而逐渐增加。在照射后第3天各照
射组的体重增长值均为最低,21天时最高。
从照射剂量变化看.照射后3天、7天、14天的体重增长
值显著低于相应对照组(P<001或P
设计原则:损伤模型应为可逆转模型。既要达
到一定抗辐射剂量,使实验小鼠各种指标产生稳定的损伤模
型,又能在一定时间后,自行恢复。
本研究中采用全身一次性照射,考虑到一次性照射可以
避免照射次数过多导致的不可知因素的影响,仅受照射剂量、
照射方式、动物种类、大小、饲养条件等因索的影响,且关于一
次性照射动物模型对保健食品中使用的抗辐射成分的研究较
多。使用的昆明种30—349小鼠,是基于保健食品评价一般
给予受试物30天.小鼠的初始体重一般为18—229,考虑建立
免疫模型的时候,小鼠的平均体重应在329左右。本研究预
试验表明该昆明种雄性小鼠的LD。为5.8Gy,由于考虑该模
型应用于保健食品功能评价,需要试验周期在1个月以上,因
此照射剂量的设计采用了低于LD5。的照射剂量,选择了3Gy、
4Gy、5Gy作为本研究的照射剂量”1。
免疫系统是放射性损伤较敏感的组织之一,尤其在放射
性肿瘤治疗中,尽管放疗可以完全杀死肿瘤细胞,但辐射粒子
同时对免疫系统的损伤不容忽视,免疫增强剂的使用可以抵
抗放射性治疗过程中辐射粒子对机体的不良作用。其中迟发
型变态反应代表细胞免疫.血清溶血索水平代表体液免疫,巨
噬细胞吞噬系统代表非特异性免疫”J一。
本研究结果表明:3Gy、4Gy、5研的照射剂量可以造成小
鼠的免疫损伤.表现在照射后第3天,除脾中NK细胞活性
外,其他指标均显著低于相应的对照组(P<001或P<
O.05)。可以利用辐射手段建克免疫低下模型,以评价保健食
品的对辐射损伤具有辅助保护功能、免疫调节功能和减低放
疗毒副作用的动物模型“。建议细胞免疫及非特异性免疫系
统辐射模型条件为:昆明种30—349小鼠,一次性全身辐照剂
量为3Gy.照射后第3天进行检测。
本实验结果表明,小鼠的体液免疫系统对辐射损伤较敏
感。由于体液免疫的恢复需要B淋巴细胞及具有分泌抗体
能力的恢复A‘能体现,导致小鼠体液免疫系统的辐射损伤的
恢复需要较长的时间,恢复时间较长也不排除照射剂量过大,
适当降低剂量可能仍会观察到小鼠血清溶血索水平的辐射损
伤情况。建泌建讧体液免疫低F模型条件为,昆明种30—349
小鼠,一次性全身辐照剂量为3Gy.照射后第2l天,进行枪测。
本实验结果表明,脾中NK细胞的活性实验中要计算同
样脾细胞数中NK细胞活性结果受脾脏大小和细匏数的影响
较大。根据前面实验中在照射后3天和7天.小鼠的脾指数
明显降低,照射后14天,脾指数基奉恢复正常,可以看出,在
脾指数恢复正常的情况F,NK细胞活性处于低下状态。综上
所述,脾NK细胞活性不适合作为放射性免疫损伤的指标。
4参考文献
1卫生部法监司保健食品功能学评价程序和检测方法,J匕京:卫
生部法监司,199628
2倪方,计融,李业鹏.等保健食品抗辐射功能评价中存在的问题
及对策中国公共卫生.2003,19(7):811
3 KimSH.I艘SE.OhH.etal TheradlopmtHctiveeffeels甜Bu—Zhong-
Yi—Ol—Tang:aprescriptionoftraditionalChin咖mHlicineAmJChin
M甜,2002,30(1):127—137
4王多宁.田芙蓉.赵雁武,等PTC对2Gy全身照射小鼠辐射损伤
作用中华放射医学与防护杂志,200I.21(I):45146
5 f秉促,黄沙菲,程鲁榕,等植物多糖的抗辐射的防护研究中
华故射医学与防护杂志,1989,9(1):24-26
6徐战,李德远,刘嘉麟,等天然抗辐射物质研究与开发农牧产
品开发,1999(I):3-5
【2005—02-19收稿)
万方数据