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辅助孵出

2011-07-14 31页 ppt 2MB 33阅读

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辅助孵出null辅助孵出技术在ART的应用探讨辅助孵出技术在ART的应用探讨蔡令波null影响胚胎植入的三个主要因素: 1. 胚胎质量 2.子宫内膜质量 3. 影响孵出的一些因素,尤其是体外培养引起的透明带硬化. Cohen J, Hum Reprod,1992;7:685–691 Gott AL,Hum Reprod 1990;5:104–108 ...
辅助孵出
null辅助孵出技术在ART的应用探讨辅助孵出技术在ART的应用探讨蔡令波null影响胚胎植入的三个主要因素: 1. 胚胎质量 2.子宫内膜质量 3. 影响孵出的一些因素,尤其是体外培养引起的透明带硬化. Cohen J, Hum Reprod,1992;7:685–691 Gott AL,Hum Reprod 1990;5:104–108 Edwards RG,J. In Vitro Fert Embryo Transf 1984;1:3–23 Yaron Y Fertil Steril 1994;62:225–232 De Felici M, Gamete Res1982;6:107–113null 辅助孵化的的宗旨是促进发育中胚胎的孵化和植入能力。是通过对透明带的化学、激光或机械的削弱,使胚胎更易从透明带中孵出,从而达到提高种植率的作用。null透明带是由大量独特的糖蛋白构成,形成一个柔软的外层和一个较坚实的内层,透明带在人卵的厚度约为15μm。 透明带的厚度不仅可以影响精子穿透,也可影响植入率,由于卵母细胞的先天原因,或因为延长胚胎培养条件也可致使透明带过厚,致密或变硬,胚胎将不能孵化。 Cohen J Fertil Steril 1989:51:820-827 Gabrielsen A Hum Reprod. 2001:16:2166~2170 Letterie GS, Hum Reprod Rev 1997:8:116-125透明带在卵子发生和早期胚胎发育中的作用透明带在卵子发生和早期胚胎发育中的作用1. 透明带作为屏障保护卵子和早期胚胎着床前不受抗原的影响。 2. 透明带表面有精子结合的受体,在受精过程中非常重要。 3.透明带在精子与卵膜融合后改变结构,阻止多个精子穿透。 4. 透明带维持胚胎的三维结构和完整性。null 要使植入顺利发生,透明带必须变薄且最终溶解。而正常体外受精胚胎仅有30%可发生正常孵化。研究认为,透明带过厚或透明带蛋白分解素的减少可能影响胚胎孵化。 Schiewe , Fertil Steril, 1995;63:288-294; Cohen J, J In vitro Fert Embryo Transfer 1991,8:179-190nullnullJacques Cohen在1992年首次提出在人类胚胎实施辅助孵化,即用人工方法在透明带上开孔,提高体外胚胎培养孵出率,得到较高的着床率和妊娠率。 Cohen J, Hum Reprod, 1992;7:685-691null辅助孵化可能通过以下机制改善胚胎植入率, 1.辅助孵化可从增厚和局部异常的透明带中挽救分裂的胚胎; 2.辅助孵化可促进发育中的胚胎更早地植入,增加了子宫内膜和胚胎发育的同步性; 3.辅助孵化减少了胚胎经历孵化所需的能力需求,对胚胎随后的生长发育有利。 Schoolcraft, Fertil Steril, 1994:62:551-554。辅助孵出方法辅助孵出方法机械切割 Tyrode酸性溶液 激光打孔 辅助孵化的时间:选择第三天可移植的胚胎,辅助孵化后胚胎继续培养1-2小时,或培养至第五天,进行胚胎移植。 辅助孵化透明带孔洞的大小辅助孵化透明带孔洞的大小孔洞的大小十分关键。 开口过小可导致发育中的胚泡突出,从而造成卡陷、退化甚至死亡。还可增加单卵双胎的发生率。 开口过大,转移胚胎过程中容易造成将卵裂球挤出,并造成胚胎内在损伤。null辅助孵出临床适应征辅助孵出临床适应征辅助孵出指征辅助孵出指征高龄、d3基础FSH升高, 透明带异常(过厚,颜色异常等) 前次IVF失败史 冷冻胚胎、IVM胚胎 胚胎碎片较多。反复失败患者反复失败患者透明带部分AH, 胚胎着床率和临床妊娠率要高于全部AH。尤其是对于38岁以下反复失败患者。 Ghobara, Reprod Biomed Online. 2006 Aug;13(2):261-7 对于反复失败患者,前次为优质胚胎组行AH后的效果要好 Grace J et al. J Obstet Gynaecol. 2007 Jan;27(1):56-60 对于反复着床失败患者,qLZT-AH可以提高胚胎着床率 Petersen CG, Reprod Biomed Online. 2005 Feb;10(2):224-9 AH可以提高妊娠率,尤其是对于有失败史和年龄大的患者,但是对于“take-home-baby rate”的影响需要进一步确定。 Edi-Osagie E,. Hum Reprod 2003;18:1828 –35. Assisted hatching increases the pregnancy, implantation, and ongoing pregnancy rates significantly in patients with a poor prognosis undergoing IVF or ICSI, particularly those with repeated failures. Sallam J Assist Reprod Genet 2003;20:332– 42. 高龄高龄AH不能提高37岁以上妇女的IVF结局 Frydman N Hum Reprod. 2006 Aug;21(8):2131-5. AH可以提高ICSI周期的胚胎着床率,尤其对于35岁以上的女性。对于AH是否提高抱孩回家率(take-home-baby rate)需要更大样本进行研究。在本研究中,AH没有影响到出生婴儿的染色体异常率。 Ma S Fertil Steril. 2006 Apr;85(4):895-900 高龄高龄对于高龄妇女(>40岁),辅助孵出可以显著提高临床妊娠率和胚胎着床率。 WILLIAM B., J o f Assisted ReprodGenetics, 1995,12(9):581-584 对于38岁以上患者,AH不能提高ICSI成功率。但这一结论仅仅适用于在四个不同地方打孔法。 Claudia G. Petersen,J of Assisted Reprod Genetics, 2002,19(11)512-516冻胚解冻冻胚解冻支持:孵出孵出可以提高胚胎着床率 1. AH可显著提高胚胎着床率,妊娠率 Balaban B, Hum Reprod. 2006 Aug;2(8):2136-40  Gabrielsen,Hum Reprod 2004 19, 10. 2258–2262, Check , Clin Exp Obstet Gynecol 2000 27,89-91, Tao J J Assist Reprod Genet 1997 14,128-130, Cohen, Fertil Steril 1999 72(suppl)s5 不支持:激光辅助孵出不能提高胚胎着床率,AH不应成为常规。 EH Ng, Hum Reprod 2005.20(4): 979–985, Primi MP, Hum Reprod 19,2325–2333. 2004 Edirisinghe WR J Assist Reprod Genet 16,294–301. 1999 Ng EH,等, A randomized double-blind controlled study of the efficacy of laser-assisted hatching on implantation and pregnancy rates of frozen-thawed embryo transfer at the cleavage stage. Hum Reprod Vol.20, No.4 pp. 979–985, 2005 Ng EH,等, A randomized double-blind controlled study of the efficacy of laser-assisted hatching on implantation and pregnancy rates of frozen-thawed embryo transfer at the cleavage stage. Hum Reprod Vol.20, No.4 pp. 979–985, 2005 nullA European multicentre prospective randomized study to assess the use of assisted hatching with a diode laser and the benefit of an immunosuppressive/antibiotic treatment in different patient populations Human Reproduction Vol.20, No.4 pp. 979–985, 2005A European multicentre prospective randomized study to assess the use of assisted hatching with a diode laser and the benefit of an immunosuppressive/antibiotic treatment in different patient populations Human Reproduction Vol.20, No.4 pp. 979–985, 2005Group I: 冷冻复苏胚胎移植 Group II:有冷冻移植失败2次 Group III: (age .37 years old or FSH .10 UI/l) Group IV: 反复失败。 结论:研究并没有明确证实各组患者需要AH,虽然反复失败患者妊娠率和胚胎植入率有提高,但是否行AH需要认真分析前几次失败胚胎质量。在临床上应认真考虑考虑各种因素,如患者年龄,失败次数,胚胎质量,ZP厚度,但应牢记:AH对胚胎没有损伤,单卵双胎率没有增加,胚胎植入率没有削弱(只要实施了immunosuppressive/antibiotic处理)。常规患者常规患者对于较好预后的患者(年龄<39,FSH,E2水平正常,无IVF-ET失败史,胚胎质量优),激光AH不能改善临床结局, Sagoskin, M. Fertil Steril 2007;87:283–7. 对于子宫内膜异位症患者,AH不能提高ART结局。 Nadir Ciray H Hum Reprod. 2005 Sep;20(9):2546-9. nullAH对于36岁以下患者尤其可以提高临床妊娠率和胚胎着床率,对于反复失败患者也有效。因此,作者认为,如果<36岁患者全部常规行AH,可以显著提高临床结局。 J. Ali,Journal of Assisted Reproduction and Genetics,2003,20(5)1:77-181 对于37岁以下、没有失败史的患者,AH对ICSI成功率没有影响 BARUFFI, Journal of Assisted Reproduction and Genetics, 2000,17( 10)557-560 nullAssisted hatching on assisted conception (IVF & ICSI). Seif MM,等 Cochrane Database Syst Rev. 2006 Jan 25;(1):CD001894 目的:研究AH对辅助生殖结局的影响以及副作用(多胎和流产) 方法:Cochrane (1 June 2005), MEDLINE (1996 to June 2003), EMBASE (1980 to June 2005) 文献选择:随机比较AH 与未行 AH 组,比较临床妊娠率和种植率 结果: AH组和对照组活产率和流产率没有差异。多胎率AH组高于对照组。没有充足的数据说明AH对单卵双胎,胚胎损伤,先天和染色体异常,体外囊胚发育的影响。 总结:尽管可以显著提高临床妊娠率,但是没有充足的证据说明AH对活产率的影响,因此目前没有证据推荐使用AH。 辅助孵出安全性辅助孵出安全性134个应用激光辅助孵出技术出生的婴儿,先天畸形和染色体异常率没有增加。Kanyo K, Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2003;110: 176–80. 62个应用激光AH出生的婴儿,在先天畸形和染色体异常方面没有增加。Primi M, et al. Hum Reprod 2004;19:2325–33. 最近的研究报道,应用激光AH有25例健康婴儿出生,与应用酸孵出和不进行辅助孵出组相比,先天畸形率没有增加。Susan E.et al Fertility and Sterility. 2007, 6, 1450-1457 2004年12月美国FDA允许激光打孔仪应用于临床治疗。 目前激光系统使用的是一种1.48um二极管激光光束,在动物研究中不存在热或致突变作用。 Germond,etal, Fertil Steril,1995;64:604-611 Malter et al. RBM Oline, 2001:3:117-123 辅助孵出与单卵双胎辅助孵出与单卵双胎在正常妊娠,单卵双胎的发生率为0.42% 在IVF,单卵双胎发生率为1.88%。 Alikani M, Hum Reprod 2003;18:1937–1943 Schachter等研究认为常规IVF与IVF/ICSI+AH的单卵双胎率没有差异(0.72%VS0.86%). Elizur等也认为,透明带操作并不增加IVF单卵双胎的发生率。 Schachter Hum Reprod 2001;16:1264–12693. Elizur SE, Fertil Steril 2004;80:462–463 Schieve 等研究发现IVF+AH后单卵双胎发生率提高一倍。 Schieve et al. Fertil Steril 2000;74:288–294 AH的单卵发生率的增高与操作技术有关。nullnullnullnullnull
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