红曲抗炎作用的实验研究

璺!也!!!!!!翌!!!!盟!!旦婴g!!!!!!!!!：!!堕!：； ，’’’’’’。’’’、 2实验研究： ～‘I‘lI。Itl‘， 红曲抗炎作用的实验研究 生围堑垫塑查!!堕堡笙!!鲞箜!塑 王炎焱1，赵征‘，黄烽1，任建平2 (1解放军总医院风湿科，北京100853；2军事医学科学院放射医学研究所，北京100850) [摘要] 目的：研究红曲的抗炎作用。方法：急性抗炎模型采用巴豆油致小鼠耳肿胀模型和角叉菜胶致大鼠 足肿胀模型，慢性抗炎模型采用棉球植入小鼠腹腔致肉芽肿模型。以布洛芬作阳性对照，并设洛伐他汀高、低剂量 组。比较红曲与洛伐他汀的抗炎作用。结果：红曲对巴豆油致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀和棉球致小鼠 腹腔肉芽肿均有显著的抑制作用，与洛伐他汀的抗炎作用湘近。结论：红曲具有显著的抗炎作用。 [关键词] 红曲；抗炎作用；洛伐他汀 [中图分类号]R285．5；R289．5[文献标识码】A [文章编号]1003—3734(2006)02一0096—03 Anti-innammatOryefI．ectsofredyeastrice WANGYan．yan1，ZHA0Zheng1，HUANGFeng1，RENJian．ping 2 (1三)epor￡，nenfQ厂R^eM，no￡DZogy，C^ineseP—乙415酱ner口z舶每pi￡口Z，曰e玎ing100853，C危ino；2hsfi￡u￡e 妒Rodio￡ion^扎dicine，Acode，孔y矿^fiZi≠o，yMedic口ZJsciences，Be巧i，增100850，C^ino) [Abstract]objective：Toevaluateanti—inflammatoryef艳ctsofredyeastrice．Methods：A— cuteinnammatoryreactionmodelsemployingcrotonoilasinnammagentoinducemouseearedema andcarrageenanasinnammagentoinduceratpawswelling，andachronicinnammatoryreaction modelplacingcottonsintoabdominalcaVityofratstoinducegranulomaweresetuptotestanti-in— nammatoIyactiVityofredyeastrice．Ibuprofbnand10VastatinwereusedasthepositiVecontr01．Re- sults：Redyeastriceshowedsignificantinhibitionsofinnammatoryactivitiesina11modelsandasim— ilarinhibitionofinflammatoryeffectsaslovastatin．Conclusion：Redyeastriceisefbctiveagainst inflammation． [Keywords]redyeastrice；anti—innammatoryeffect；10vastatin 红曲是我国的传统发酵产品，长期应用于食品着 色及作为药用。《本草纲目》记载红曲营养丰富、无 毒无害，具有健脾消食、活血化淤的特殊功效，历来被 视为安全性高的食品补充剂。1979年，日本远藤章 从红曲发酵液中发现并分离得到了一系列可显著抑 制体内胆固醇合成的活性物质Monacolin类化合物， 其中以Monac01inK的活性最为显著。该类化合物的 结构与化学合成药洛伐他汀相同⋯。最近的研究表 明，他汀类药物不但具有降脂作用，而且具有免疫调 节活性，可减少某些免疫炎症分子的表达和分泌。因 此我们对红曲抗炎作用进行研究，现报道如下。 材料与方法 1 药品、试剂、仪器与实验动物 红曲(血脂康胶囊)，北大维信生物科技有限公 一96一 司，批号：040302，每粒0．3g，相当于含洛伐他汀 5mg；布洛芬：湖北百科亨迪药业有限公司，批号： 020201；洛伐他汀片(商品名洛之达)，浙江瑞邦药 业有限公司，批号：03040。冰醋酸(HAc)：北京化工 厂生产，以生理氯化钠溶液(Ns)配制成0．6％的醋 酸溶液；角叉菜胶：北京西中化工厂，批号000803。 游标卡尺：上海分析仪器厂；BP310型电子天平：德 国；打孑L器(自制)。昆明种小鼠，雌雄各半，体重 (20±2)g；SD大鼠，雄性，体重(160±20)g，均由军 事医学科学院动物室提供。 2给药剂量 红曲药量根据临床应用剂量，按体表面积转 换为实验动物应用的中剂量，大剂量为中剂量加 倍，小剂量为中剂量减半；洛伐他汀药量根据临床 应用剂量，按体表面积转换为实验动物应用的小 万方数据 竖!!!!!!!!!竺!!!!型!!望!!g!!!!!!!!!：!!型!：! 剂量，大剂量为小剂量加倍；布洛芬药量根据临床 应用剂量，按体表面积转换为实验动物应用的 剂量旧1。 3 方法 3．1 红曲对巴豆油致小鼠耳肿胀的影响"1 70只 小鼠，随机分为7组，Ns对照组(20mL·kg‘1)、布洛 芬阳性对照组(40mg·kg。1)、红曲高、中、低剂量组 (300，150，75mg·kg。)和洛伐他汀高、低剂量组 (5．2，2．、6mg·kg叫)。各组动物培给药，qd，共5d。 于末次给药后，于右耳两面涂刺激剂0．01mL[巴豆 油．乙醇．吡啶．乙醚(1：10：20：69，体积比)]，左耳不 做处理。4h后动物颈椎脱臼致死，沿耳廓基线剪下 两耳，用8mm直径打孑L器分别在同一部位打下圆 耳片，称重。右耳片减去左耳片的重量即为肿胀度， 并计算抑制率(％)。 抑制率／％=Ns组肿胀度一用药组肿胀度／Ns组肿 胀度×100 3．2红曲对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响H。56 只大鼠，随机分为7组，Ns对照组(10mL·kg。)、布 洛芬阳性对照组(30mg·kg叫)、红曲高、中、低剂量 组(200，100，50mg·kg叫)和洛伐他汀高、低剂量组 (3．6，1。8mg·kg。)。各组动物均ig给药，qd，共 5d。于末次给药1h后在每只大鼠右后肢皮下注射 1％角叉菜胶混悬液0．1mL致炎，并分别在致炎后 O，3，6，24h用游标卡尺测右足肿胀度(足肿胀度= 致炎后足周径一致炎前足周径)，按下式计算抑制 率(％)。 抑制率／％=Ns组足肿胀度一用药组足肿胀度／Ns 组足肿胀度×100 3．3 红曲对小鼠棉球肉芽肿形成的影响∞1 70 只小鼠，随机分为7组，每组10只。动物分组和给 药剂量同3．1项。各组动物腹腔注射戊巴比妥钠 麻醉，无菌操作于小鼠腹腔植入棉球(每个高压灭 主垦堑堑盘查!!塑笙星!i鲞箜!塑 菌后，60℃烤箱烘干，重15mg)，然后各组动物分 别ig给药，连续5d。d6处死小鼠，取出棉球，剥离 肉芽组织，置70℃烤箱烤至恒重。肉芽肿干重= 植入棉球肉芽肿重量一植入棉球重量。各给药组 与NS组进行比较，按照下式计算肉芽肿形成抑 制率。 抑制率／％=[Ns组棉球肉芽肿重量(mg)一用药组 棉球肉芽肿重量(mg)]／Ns组棉球肉芽肿重量 (mg)×100 4数据处理 实验数据以露±s，表示，用sPssll．5统计，数据 统计有效性采用f检验和方差分析。 ’ 结 果 1 红曲对巴豆油致小鼠耳肿胀的影响 红曲高、中、低剂量组的小鼠耳肿胀度较Ns组 显著降低(P0．05)，结 果见表2。 表2红曲对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 3红曲对小鼠棉球肉芽肿形成的影响 红曲高、中、低剂量组的肉芽肿干重明显低于 Ns组(P<0．01)，也显著低于阳性对照布洛芬组 (P<0．05)，和洛伐他汀高剂量组比较有差异(P< 一97— 万方数据 鱼!i!!堕!!!翌!!堕堕!!旦翌g!!!!!：!!!：!!塑!：1 0．05)。红曲对小鼠棉球肉芽肿形成的影响结果见 表3。 表3红曲对小鼠棉球肉芽肿形成的影响 讨 论 红曲中的Monacolin类化合物是一类天然的 HMG．CoA还原酶抑制剂。化学合成药洛伐他汀为 内酯式MonacolinK，需在体内水解成相应的酸式而 发挥药效，由于需要消耗体内的羟基酯酶，长期使用 会增加肝肾负担。天然红曲中的Monac01inK多为 酸式，其空间结构与体内HMG．coA更为接近，无需 水解，直接发挥抑制体内胆固醇合成的作用，其活性 较内酯式高约1倍¨1。以往对红曲抑制胆固醇合 成降血脂和心血管和肾脏保护作用方面研究很多。 近年随着对他汀类药物的药理作用的深入研究发现 他汀类可减少某些免疫炎症分子的表达和分泌，如 诱导型一氧化氮合酶(iNOs)，TNF一0【，IFN-1， MMP-9和McP．1等，他汀类药物具有较强的抗炎作 用。卜9|。红曲与洛伐他汀的化学结构相同，因此我 们对红曲的抗炎作用进行研究。 本实验选择急性炎症的动物模型为巴豆油致小 鼠耳肿胀模型、角叉菜胶致大鼠足肿胀模型，慢性炎 症模型为棉球致小鼠腹腔肉芽肿模型。各组药物的 选择根据临床应用剂量，按体表面积转换为实验动 物应用的剂量。本实验结果显示，红曲、洛伐他汀和 布洛芬对巴豆油致小鼠耳肿胀模型、角叉菜胶致大 鼠足肿胀模型、棉球致小鼠腹腔肉芽肿形成均有显 著的抑制作用。表明红曲对急性和慢性炎症均有较 中国新药杂志2006年第15卷第2期 强的抗炎作用，和洛伐他汀作用相近，强于布洛芬， 而且应用小剂量即可达到较理想的抗炎效果。但红 曲是否像他汀类药物一样具有免疫调节活性，尚需 进一步实验证实。 [作者简介] 王炎焱(1972一)，女，硕士研究生，主要从事 中西医结合治疗风湿病的研究。联系电话：(010)66936651， E—majl：wangyanyanl990@yahoo．com．cno [通讯作者] 黄烽(1964一)，男，教授，主要从事常见风湿 与免疫性疾病。联系电话：(010)66939849，E-mail：fhuang@ 301hospital．com．cn。 [ 参考 文 献 ] [1]宓鹤鸣，宋洪涛，陈磊，等．红曲中降血脂活性成分的研究 [J]．中草药，1999，30(3)：72． [2]王润玲，刘印忠，高建华，等．布洛芬精氨酸盐解热镇痛及抗 炎作用的研究[J]．中国药师，1999，2(1)：8—10． [3]徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学[M]．北京：人民卫生 出版社，1993：593—594． [4]陈奇．中药药理研究方法学[M]．北京：人民卫生出版社， 1993：364—365． [5]徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学[M]．北京：人民卫生 出版社，1993：659—722． [6]ENDOA。ThediscoveryaIlddeyelopment。fHMG—coAreducta8e inhibitor[J]．，三咖idR档，1992，33(11)：1569一1579． [7]PAHANK，sHEIKHFG，NAMBOODIRIAM，眦口z．Lovastatin andphenylacet8teinhibitthejnductionofnitricoxidesynt】laseand cytokinesin阻tprimaryastmcytes，microglia，andmacroPhages [J]．，cz讥hⅢf，1997，100(15)：267l一2679． [8]Y0ussEFs，sTuVEO，PATARROYOJc，e￡口z．neHMG·coA肛 ductaseinhibitor，atorvastatin，pmmotesaT}12biasandreverse8pa- ralysisincentralneⅣou88ystemautoimmunedisease[J]．Ⅳnt“M， 2002，420(6911)：78—84． [9]AKTAs0，wAIczIEss，sMORODcHENK0A，以口f．Treat— mentofrel8psingparalysisinexperimentaleneephalomyeliti8by targetingThlcellsthro“ghatorvastatin[J]．，E印^如d，2003，197 (6)：725—733． 编辑：朱振家／接受日期：2005一05—3l ★美国FDA已就Novartis公司的Exjade药物的安全性发出疑问。这种可帮助接受输血患者除去体内过量铁质的药物被 发现可能造成某些人的肝和肾功能损伤。FDA针对这一问题正在请教医学专家以确定是否批准该药的上市。另一个问题是 该药能否被长期安全使用。在有800例患者参加的临床试验中，有500例服用该药。大多数患者服用该药约1年左右，有些 服用达3年以上。FDA说约1／3的患者出现血清肌酐升高的现象，但大部分升高值仍然在正常范围内。约2．6％的患者由于 出现皮疹、头痛、胃肠道问题而停止服用该药。 一98— 万方数据 红曲抗炎作用的实验研究 作者： 王炎焱， 赵征， 黄烽， 任建平， WANG Yan-yan， ZHAO Zheng， HUANG Feng， REN Jian-ping 作者单位： 王炎焱,赵征,黄烽,WANG Yan-yan,ZHAO Zheng,HUANG Feng(解放军总医院风湿科,北京 ,100853)， 任建平,REN Jian-ping(军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850) 刊名： 中国新药杂志 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF NEW DRUGS 年，卷(期)： 2006,15(2) 被引用次数： 4次 参考文献(9条) 1.宓鹤鸣.宋洪涛.陈磊 红曲中降血脂活性成分的研究[期刊论文]-中草药 1999(03) 2.王润玲.刘印忠.高建华 布洛芬精氨酸盐解热镇痛及抗炎作用的研究[期刊论文]-中国药师 1999(01) 3.徐叔云.卞如濂.陈修 药理实验方法学 1993 4.陈奇 中药药理研究方法学 1993 5.徐叔云.卞如濂.陈修 药理实验方法学 1993 6.ENDO A The discovery and development of HMG-CoA reductase inhibitor 1992(11) 7.PAHAN K.SHEIKH FG.NAMBOODIRI AM Lovastatin and phenylacetate inhibit the induction of nitric oxide synthase and cytokines in rat primary astrocytes,microglia,and macrophages 1997(15) 8.YOUSSEF S.STUVE O.PATARROYO JC The HMG-CoA reductase inhibitor,atorvastatin,promotes a Th2 bias and reverses paralysis in central nervous system autoimmune disease 2002(6911) 9.AKTAS O.WAICZIES S.SMORODCHENKO A Treatment of relapsing paralysis in experimental encephalomyelitis by targeting Th1 cells through atorvastatin[外文期刊] 2003(06) 引证文献(4条) 1.王炎焱.ZHAO Zheng.王莉莎.HUANG Feng 红曲对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎作用及机制探讨[期刊论文]-中国 新药杂志 2008(14) 2.王炎焱.赵征.黄烽.任建平 红曲对大鼠角叉菜胶背部气囊炎症组织中肿瘤坏死因子-α表达的影响[期刊论文]-中 华风湿病学杂志 2008(1) 3.李小峰 重视类风湿关节炎发病机制及治疗的研究进展[期刊论文]-中华风湿病学杂志 2008(1) 4.王炎焱.赵征.黄烽.任建平 红曲抗炎机制研究[期刊论文]-中国药物与临床 2006(5) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgxyzz200602005.aspx