HPLC法测定喉舒宁片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

· 276· 表2 益肝凉茶中栀子苷含量测定结果 (n=3) 3讨论 本品方中含有 8味药材，成分较为复杂，多含有 萜类化合物、皂苷、黄酮、糖类等成分，对色谱结果 有一定的干扰。故采用大孔吸附树脂，用 50％乙醇 洗脱，既可有效地去除糖及水溶性黄酮等杂质的干 药新药与临床药理2004年7旦箜 查箜 扰，又可富集制剂中栀子苷成分，即可达到纯化样品 的目的。制得样品溶液使被测成分栀子苷能得到很好 分离，保留时间也与对照品一致，阴性对照溶液亦无 干扰 (图 1)。本文建立了益肝凉茶中栀子苷含量测 定方法，实验结果表明，本法便捷，灵敏、准确，重 现性好，可用于控制该药品的质量。 参考文献： [1 J刘燕平，吕高荣，鲁静 ．栀子中环烯醚萜苷类成分的 HPLC法含 量测定[J】．中国中药杂志 ，1993，18(5)：298． 【2】国家药典委员会 ．中华人民共和国药典 2000版一部[S】．北京：化 学工业出版社，2000．附录 38． HPLC法测定喉舒宁片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量 屠万倩，翟乙娟，刘 杰 (河南省中医药研究院，郑州 450004) 摘要：目的 建立喉舒宁片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法。方法 采用HPLC法，c。 柱，甲醇一 0．1％磷酸溶液(50：50)为流动相，检测波长为 225nm。结果 平均回收率为99．44％，RSD为 2．24％。结论 该方 法简便准确，重现性好，可用于喉舒宁片的质量控制。 关键词：喉舒宁片；穿心莲内酯；脱水穿心莲内酯；高效液相色谱法；含量测定 中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：1003—9783(2004)04—0276—02 喉舒宁片系 《卫生部药品 ·中药成方制剂》收 载品种，由穿心莲、白花蛇舌草和山芝麻 3味中药组成， 具有清热解毒，散结止痛的功效，用于急、慢性咽喉炎、 急性扁桃体炎、声带息肉、声带小结，并可用于头颈部肿 瘤在放射治疗期间的辅助治疗。本文采用高效液相色谱法 测定本品中的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量。 l仪器与试药 日本岛津 10Avp高效液相色谱仪 (LC一10ATvp双 泵 ，SPD—M10 Avp二极管阵列检测器 ，SIL一10ADvp 自动进样器，CTO一10Avp柱温箱)。喉舒宁片由天津 药业集团新郑股份有限公 司提供 ，批号为 021103、 021105、 021 107； 穿 心 莲 内 酯 对 照 品 (0797— 200106)、脱水穿心莲内酯对照品 (0854—200204)均 由中国药品生物制品检定所提供。甲醇为色谱纯，其他 试剂均为分析纯。 2方法与结果 2．1色谱条件 Hypersil ODS填料色谱柱 (4 6×250 mm，5 m)，柱温 40℃；进样量 5 L，流动相：甲醇 一 0 1％磷酸溶液 (50：50)，流速 ：1．0 mL／min；检 测波长：225 nm；理论塔板数按穿心莲内酯峰计算应不 低于 2000。按此色谱条件测定 ，穿心莲内酯和脱水穿 心莲内酯的保留时间分别为 6．5 min和 16．0 min。 2．2对照品溶液的制备 精密称取穿心莲内酯、脱水穿 心莲内酯对照品各适量，加甲醇制成每 lmL中含穿心莲内 酯70 脱水穿心莲内酯 30 g的溶液，摇匀，即得。 2．3供试品溶液的制备 取重量差异项下本品 10片， 除去包衣，精密称定，研细，取 0．7 g，精密称定，精 密加入甲醇 100 mL，称定重量，浸泡 30 rain，超声处 理 30 rain，放冷 ，再称定重量，用甲醇补足减失的重 量，摇匀，滤过 ，取续滤液作为供试品溶液。 2．4阴性对照试验 按处方比例制成缺穿心莲阴性对照 药，照 2．3项方法制备缺穿心莲阴性对照溶液，精密吸取 溶液 5 L，测定，结果阴性对照液在穿心莲内酯和脱水 穿心莲内酯对照品相同保留时问位置上未见有吸收峰，说 明无干扰，见图 1。 收稿 日期：2004—02—21 作者简介：屠万倩(1970一)，女，助理研究员，主要从事中药制剂及质量标准研究。Tel：0371—6331718，Email：lixia632@sohu．com。 维普资讯 http://www.cqvip.com 中药新药与临床药理2004年7月第15卷第4期 c。 2 I I r I J l J t／n1jn a．对照品 b．供试品 c．阴性对照 图 1 喉舒宁片 HPLC图谱 2．5线性关系考察 精密吸取穿心莲内酯对照品、脱 水穿心莲内酯对照品混合溶液 (穿心莲内酯对照品、脱 水穿心莲 内酯对 照品浓度分别 为 0．03171 mg／mL、 0．01734 mg／mL)5，10，15，20，25 L，分别注入液 相色谱仪，按上述条件测定穿心莲内酯 、脱水穿心莲内 酯吸收峰峰面积，分别以穿心莲内酯 、脱水穿心莲内酯 峰面积积分值为横坐标 (X)，以进样量为纵坐标 (Y)，进行 回归处理 ，结果穿心莲内酯线性范围为 0．15855～0．79275 g，回归方程为 Y=4．2844×10。X 一 7．05306×10～，r=0．99998；脱水穿心莲 内酯线性 范围为0．0867—0．4335 g，回归方程为 Y=6．51358× 10。。X一2．89246×10～ ．r=0．9997。 2．6稳定性试验 取同一供试品溶液．分别在0，1， 2，4，6，8 h进样测定，其中穿心莲内酯平均峰面积为 758597，RSD=0．81％；脱水穿心莲内酯平均峰面积 213741，RSD=1．65％。结果表明 8 h内穿心莲内酯和 脱水穿心莲内酯基本稳定。 2．7精密度试验 精密吸取同一供试品溶液5 L，重复 进样 5次，测定穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的峰面积， 结果穿心莲内酯平均峰面积为 776484，RSD=0．73％； 脱水穿心莲内酯平均峰面积为220631，RSD=1．43％。 2．8重复性试验 取样品 (样品批号021103)5份， 按拟定的含量测定方法，重复平行测定，穿心莲内酯平 均含量为 2．412 rag／片，RSD=1．58％ ；脱水穿心莲内 酯平均含量为 1．185 rag／片，RSD=1．42％。 2．9回收率试验 精密称取已知含量的样品0．35 g， 分别精密加入穿心莲内酯对照品约 3．5 mg、脱水穿心 莲内酯对照品约 1．5 mg，按供试液制备方法操作，定 容于 100 mL量瓶中，制成加样供试液。吸取加样供试 液 5 ，注入液相色谱仪，按上述方法测定加样供试 液中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯含量，分别计算回收 率，结果平均回收率分别为98．97％、100．57％，RSD 值分别为 2．50％、2．43％，见表 1，2。 表 1 穿心莲内酯加样回收率试验结果 品含量／mg N~ ／mg测得量／mg回收率／％ 平均回收率／％ RSD／％ 3．49 3．49 3．51 3．51 3．5O 3．51 3．50 3．67 3．66 3．60 3．70 3．4l 7 09 7．12 7．14 6．95 7．1O 6．92 · 277 · 表2 脱水穿心莲内酯加样回收率试验结果 2．1O样品测定 取 3批样品，除去包衣 ，精密称 定，研细，取 0．7 g，精密称定，按上述方法操作， 制备供试液，测定结果见表 3。 表3 每片样品中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定结果 (n=5) 3讨论 喉舒宁片系 《卫生部药品标准 ·中药成方制 剂》收载品种，原标准中未制定含量测定方法，为 更好地控制本品内在质量，我们建立了方中主要药 物穿心莲中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测 定方法。 《中国药典》2000年版一部收载穿心莲含量测 定方法采用了薄层扫描法⋯，有关文献也报道了采 用薄层扫描法或高效液相色谱法对成方制剂中穿心 莲进行含量测定 】，但未见文献报道采用高效液 相色谱法对中药制剂中的穿心莲内酯和脱水穿心莲 内酯同时进行测定。本文中选定的方法能同时测定 上述 2种成分，方法简便，便于操作，重现性 、回 收率 良好。 试验中曾比较了多种流动相，如甲醇 一水 (45： 55)、甲醇 一水(50：50)、甲醇 一水(55：45)等，采用 本文所述流动相，即甲醇 一0．1％磷酸溶液(50：50)，分 离效果最佳。 参考文献： 【1】国家药典委员会 ．中华人民共和国药典 2000年版一部【s】．北京： 化学工业出版社，2000．220． [2】伏宝香，叶桥．新雪丹颗粒中脱水穿心莲内酯的含量测定[J】．中药 材．1999．22(7)：360—361． [3】王海龙，赵庆华，赵玉．双波长薄层扫描法测定消炎利胆片中穿心 莲内酯的含量 【J】．解放军药学学报，2000，16(4)：217—219． [4】马廷升．HPLC法测定消炎利胆片中脱水穿心莲内酯的含量[J】．西 北药学杂志，2002，17(2)：53—54． O 5 2 7 9 8 9 如 ∞ 呱 吡 维普资讯 http://www.cqvip.com