中国医药工业 杂志 Chinese Journal Of Pharmaceuticals 2002,33(11)
文章编号 :1001—8255(2002)11-0560—02
喉舒宁片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的 HPLC测定
宋粉云, 毋福海, 梁汉明, 张育强
(广东药学院,广东广州 510224)
摘要:建立 了测定喉舒宁片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量的 HPLC
。色谱柱为 Diamonsil C-e柱.甲醇一
水(70:30)为流 动相 ,流速 1.0ml/min,检测波长 225nm,柱温为室温 。穿心莲 内酯 、脱 水穿心莲 内酯 的平均 回收率
分别为 97.0 、94.6 ,RSD分 别为 1.2 、0.8
关键 词 :喉舒 宁片 ;穿心莲内酯 ;脱水穿心莲 内酯 ;反 相高效液相 色谱 ;测定
中图分类号 :TQ460、7 2;0657.7 2 文献标识码 :A
喉舒宁 片是 由穿心莲 、白花蛇舌 草和山芝麻 3
味中药经提取加工制成的片剂,具有清热解毒、散结
止痛的功效。临床用于治疗急、慢性咽喉炎及急性扁
桃体炎、声带息肉、疮疖肿毒等。该产品现行标准(中
华人民共 和国卫生部药 品标准 )只收载 了常
性
测定 。有文献报道用薄层扫描法l_1 测定喉舒 宁片中
齐墩果酸的含量,但该制剂中穿心莲内酯(1)、脱水
穿心莲内酯(2)的含量测定未见文献报道。为进一步
评价喉舒宁片的质量 ,本文建立 了喉舒宁片中 1和
2含量测定 的反相高效液相色谱法 ,该法具有 分离
效果好、灵敏、准确等优点,可用于该产品的质量控
制。
1 仪器与试药
Lc一10AT型高效液相色谱仪(日本岛津),SPD一10AT
型紫外一可 见检测器 (日本岛津 ),大连依 利特色谱工 作站 (大
连 化 学物 理研 究所 )。1、2对 照 品(中国药 品生 物制 品检 定
所 ),中性氧化铝 (层析用,2O0~300目),喉舒宁片(广东药
学 院 附 属 制 药 厂 ,规 格 0.5g/片 ,批 号 2000801、2000802、
2000803、20001002、20001006)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Diamonsil Cl8柱(250×4.6mm,5 m,
迪马公 司);流动相 :甲醇一水 (70:30),流速:1.0ml/
min;检测波长 :225nm;柱温 :室温。
2.2 溶液的制备
供试 品溶液 :取本品 20片,精密称定 ,研 细,精
密称取约 2g,置具塞锥形瓶 中,加甲醇 50ml,密塞 ,
浸 泡 过 夜 ,超 声 20rain,滤 过 。精 密 量 取 续 滤 液
20ml,上中性氧化铝柱 (4g),以 甲醇 20ml洗脱 ,洗
收稿 日期 :2002—04—17
作者简介:宋粉云(1965),女,讲师,从事药物
的教学和研
究 。
Tel(Fax):020—34074551
E—mail:fuhaiwu@ 163.net
脱液蒸 干,残渣加 甲醇溶 解,转移 至 25ml量瓶 中,
加甲醇定容,摇匀,用 0.45 m微孑L滤膜滤过,即得。
阴性样品溶液 :同法制备不含穿心莲的阴性样
品溶液 。
对照品溶液 :精 密称取 1对 照品 10mg、2对照
品 16mg置于 100ml量瓶中,加甲醇溶解并定容,作
为 1和 2的标准贮备液 。分别吸取一定量的标准贮
备液用 甲醇稀释成 1浓度 为 10、2O、30、40、50、60、
70及 80p.g/ml和 2浓度为 16、32、48、64、80、96、112
及 128>g/ml的对照品溶液。
2.3 系统适用性试验
分别取对照品溶液(1 40p.g/ml、2 64/~g/m1)、供
试品溶液和阴性对照溶液 10 1注入色谱仪,按上述
色谱条件,记录色谱图(图 1)。1、2和样品中其他组
分可基线分离,1与其相邻色谱峰的分离度大于
1.5;理论 板数分别 以 1、2计算 ,应 不低于 4000和
5300;1、2的拖尾 因子分别为 1.04、1.O1,保 留时间
约为 4.8和 8.7min;阴性样 品不干扰样品测定 。
2.4 线性试验
分别 吸取“2.2”项下 不 同浓 度 的对 照 品溶液
10 1,进样测定 ,每个浓度测定 3次以上 。以峰面积
对浓度(C,~g/m1)进行线性 回归 ,得回归方程为 :
l:A一 8076.05C+ 849.29,r= 0.9999;
2:A一 6021.01C一 12602.86,r一 0.9995。
明 1在 10~80p.g/ml、2在 16~128>g/ml范
围内线性关系 良好 。
2.5 精密度、重现性与稳定性试验
精密吸取 1、2浓度分别为 40、64~g/ml的对照
品溶液 10>1,连续进样 5次 ,1、2峰面积 的 RSD 分
别为 1.3 、0.9 。
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中国医药工业杂 志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2002,
0.0 I 5 3.0 4 5 6.0 7 5 9.0 0.0 I 5 3.0 4 5
t/mill
A B
6.0 7.5 9.0 0.0 I.5 3.0 4_5 6.0 7.5 9.0
ti m ill t/mill
C
图 1 样 品的 HPLC图谱
A:供试品 ,B:对照 品,c:阴性 对照品
1— 1;2— 2
取 同一批号(批号 2000801)样品 6份,按“2.2”
项下方法制得供试 品溶液 ,测定 ,1、2含量 的 RSD
分别为 1.4 、2.0 ,表明该法重现性较好 。
取供试品溶液 (批号 2000801),分别在 0、1、2、
4、6和 8h进样 10td,记录色谱 图,结果峰面积的
RSD 为 1.9 。可见供试品溶液在 8h内稳定。
2.6 加样回收率试验
精 密 称 取 已 知 含 量 的 同 一 批 样 品 (批 号
2000801)lg,共 5份,加入对照品适量 ,按“2.2”项下
制成供试品溶液,各取 10td进样,记录色谱图,计算
回收率,得 1和 2的平均 回收率分别为 97.0%和
94.6 ,RSD分别为 1.2%和 0.8 。
2.7 样品测定
分别精密吸取对照品溶液(1 40t~g/ml、2 64/~g/
m1)与供试品溶液 10td,注入液相色谱仪,按上述色
谱条件测定,记录色谱图,按外标法以峰面积计算样
品中 1和 2的含量 ,结果见表 1。
表 1 样品测定结果 (mg/片 ,n一3)
批号 1 RSD( )
0.42 1.8
0.41 1.6
0.50 2.7
0.37 2.0
0.38 1.4
2(mg/片)
0.88
0.80
0.86
0.88
0.90
R5D( )
2.0
0.8
1.7
1.0
1.6
3 讨论
实验中曾参照 2000年中国药典中穿心莲、穿心
莲 片的提取方法直接用 乙醇、甲醇浸泡,超声提取样
品,但杂质过多,污染色谱柱,且 1、2与其他物质无
法分离。后参考文献l_2 的提取方法提取 、测定 ,结果
表 明是否用正 己烷萃取无差异 ,因此选择 了本文的
提取方法 。本法分离效果好、灵敏、准确 ,可用于该产
品的内在质量控制 。
参考文献 :
[1] 傅 军,邓 红,钟兆键,等.喉舒宁质量标准初步研究
_J].中药材,1997,20(6):306—307.
[2] 董海荣,鲁 静.穿心莲及消炎利胆片中内酯类成分的
含量测定_J].中成药,1999,21(1):11—13.
Determination of Andr0graph0lide and 1 4~Deoxy一1 1,1 2一
didehydr0andr0graph0lide in H oushuning Tablets by RP—HPLC
SoNG Fen—Yun, WU Fu—Hai, LIANG Han—Ming, ZHANG Yu—Qiang
(Guangdong College of Pharmacy,Guangzhou 510224)
ABSTRACT:A RP—HPLC method for the determination of andrographolide and 1 4-deoxy一1 1,1 2-dide—
hydroandrographolide in H oushuning tablets was established.A Diamonsil Cl8 column was used,with the
mobile phase of methanol—water(70:30).The flowing rate was 1.Oml/min,and the detection wavelength
was 225nm. The average recoveries of andrographolide and 14一deoxy一1 1,1 2-didehydroandrographolide
were 97.0 (RSD 1.2 )and 94.6 (RSD 0.8 ),respectively.
Key W ords:H oushuning tablets;andrographolide; 1 4一deoxy一1 1,1 2-didehydroandrographolide;RP—
HPLC:determination
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