山楂不同炮制品对胃肠平滑肌收缩的影响研究

立了蒙药阿给中鞣质类成分的含量测定方法 ,并对 蒙药阿给炮制前后的鞣质含量进行测定 ,实验 结果表明 :炮制工艺对阿给中鞣质的含量有明显的 影响。炮 制 前 , 阿 给 生 药 中 鞣 质 的 含 量 为 012716% , 经 高 温 炒 炭 后 , 含 量 明 显 降 低 至 010885%。这与炮制过程中某些鞣质类成分受热分 解有关。 312　实验采用磷钼钨酸作为显色剂 ,如前期冷却 放置后变为绿色 ,可加溴 012 mL,然后煮沸除去多 余的溴即可。本测定采用 29%的碳酸钠溶液进行 定容 ,而该溶液已近饱和 ,若有固体析出时应适当加 热使其充分溶解。又因为鞣质易于氧化 ,故应当在 避光条件下进行测定。 313　实验采用室温浸提过夜提取鞣质 ,在磷钼钨 酸与多酚类物质的显色反应进行到 90～120 m in 时 ,于 760 nm波长处 ,分别测定供试品溶液中的总 酚和不被吸附的酚量的光密度 ,用曲线法求得 鞣质含量。实验数据重现性好 ,加样回收率高 ,相对 偏差小 ,故该法适用于阿给药材中鞣质含量的测定。 314　通过对干酪素用量的考察 ,发现随着干酪素 用量的增加不被吸收的多酚含量逐渐减少 ,当达到 016 g时 ,不被吸附的多酚吸附完全 ,从而确定干酪 素的用量为 016 g。315　阿给资源丰富 ,具有止血、凉血、祛瘀的功效 ,极具开发潜力。因此 ,对蒙药阿给及其炮制品中的鞣质类成分进行定量分析 ,可作为蒙药阿给生药及其炮制品质量控制的手段之一。实验对阿给炮制前后鞣质含量进行了分析与测定 ,分析说明炭药止血作用可能不仅与鞣质有关。还可能与炮制前后化学成分的比例改变有关。炮制对阿给中其它化学成分变化的影响 ,本课题组正在进一步研究。本文研究结果为制定阿给生药及炮制品的质量控制标准提供了依据。 参 考 文 献[ 1 ] 内蒙古卫生厅 1内蒙古蒙药材标准 [M ]1赤峰 :内蒙古科技出版社 , 1987: 22411[ 2 ] 马毓泉 1内蒙古植物志 (第四卷 ) [M ]1呼和浩特 :内蒙古人民出版社 , 1992: 6041[ 3 ] 白清云 1中国医学百科全书 2蒙医学 (蒙古文 ) [M ]1 1赤峰 :内蒙古科学技术出版社 , 1986: 8711[ 4 ] 占布拉道尔吉 1无误蒙药鉴 [M ]1呼和浩特 :内蒙古人民出版 , 1988: 2001[ 5 ] 崔箭 ,张婉 ,唐丽 ,等 1蒙药阿给制炭工艺的实验研究[ J ]1时珍国医国药 , 2008, 19 (11) : 2587225881 山楂不同炮制品对胃肠平滑肌收缩的影响研究 张三印 ,周艳霞 ,孙改侠 ,黄学思 ,吴纯洁 (成都中医药大学 ,四川 成都 611730) 　　摘要 　目的 :通过对大鼠和家兔离体胃肠实验 ,了解山楂不同炮制品对离体胃肠平滑肌收缩的影响。方法 :通 过大鼠胃底平滑肌及家兔十二指肠和回肠平滑肌的离体实验 ,研究山楂不同炮制品作用下平滑肌的振幅变化。结 果 :各组对大鼠胃底平滑肌张力均有明显影响 ( P < 0101或 P < 0105) ,炒黄山楂组作用为佳 ;各组均增加家兔十二 指肠平滑肌振幅且均有统计学意义 ( P < 0105) ,山楂炭组作用为佳 ;各组均增加家兔回肠平滑肌振幅且有统计学意 义 ( P < 0105) ,其中焦山楂组作用最佳。结论 :各山楂炮制品对离体胃肠肌条均有促进收缩作用 ,且山楂炮制后作 用强于生山楂 ,各山楂炮制品明显增高胃肠平滑肌的振幅 ,对收缩频率影响不大。 关键词 　大鼠 ;家兔 ;胃肠平滑肌 ;离体实验 中图分类号 : R28311　　文献标识码 : A　　文章编号 : 100124454 (2009) 1021519204 收稿日期 : 2009201209 基金项目 :国家“十一五”科技支撑 (2006BA I09B00) 作者简介 :张三印 (19762) ,男 ,副教授 ,博士 ,研究方向 :中药药理 ; Tel: 028261800225, E2mail: tcmzsy@1261com。　　山楂味酸、甘 ,性微温 ,有消食化积、行气散瘀的作用 ,是治疗食积、腹胀、产后血瘀的常用药。山楂内含有多种有机酸 ,过多的有机酸会对胃产生一定的刺激性 ,炮制后可使有机酸含量显著降低〔1〕。本实验通过对生山楂及经过不同炮制方法得到的炒黄 山楂、焦山楂、山楂炭的一系列实验研究 ,以期阐释生山楂及山楂各种炮制品作用的异同 ,为临床用药与开发新药提供依据。1　材料与仪器111　实验动物 　家兔 ,体质量 2 kg左右 ; SD大鼠 , ·9151·Journal of Chinese MedicinalMaterials　　第 32卷第 10期 2009年 10月 体质量 180～200 g,均由成都中医药大学实验动物 中心提供 ,检疫后备用。 112　实验药物 　生山楂、炒黄山楂、焦山楂与山楂 炭药液 ,生药浓度为 1 g/mL,由成都中医药大学中 试中心提供。胃复安 , 5 mg/片 (江苏平光制药有限 责任公司 ,生产日期 : 2007 /5 /16 ) ,硫酸阿托品 (芜 湖康奇制药有限公司 ,批号 : 070427) ,西沙比利胶 囊 (山西三晋药业有限公司 ,批号 : 070601)。 113　实验仪器　离体恒温水浴系统 ,张力换能器等。 2　方法 211　对大鼠离体胃底平滑肌的影响 　按离体大鼠 胃底条试验方法 ,将禁食 48 h的雄性 SD大鼠脱颈 椎处死 ,迅速打开腹腔 ,取胃 ,在预冷的克 2亨氏液中 清洗干净胃内容物 ,取胃底 ,沿胃小弯剪开胃腔 ,铺 开 ,用剪刀沿环行肌方向将胃底交叉剪开 2～3道切 口 ,使之形成较长的胃条 ,剪取 115～2 cm的肌条一 段。将胃底肌条一端固定在恒温水浴槽独立内管底 部的玻璃弯钩上 ,可通入混合气体 ,另一端固定在张 力传感器上 ,恒温水浴槽内温度为 37 ℃,使独立内 管的温度保持在 37 ℃,持续通入 95%O2 和 5% CO2 的混合气体。肌条在 1 g的前负荷下温浴 ,每 20 m in更换一次新鲜的克氏液 (37 ℃) , 1 h左右 ,待肌 条的自发活动平稳后在加入药物。内管容量为 20 mL,经预实验后确定给药浓度为 0125 mL药液 /10 mL。波形平衡后即为正常情况下胃底环形肌舒缩 波形。加药后波形稳定时为加药后胃底肌条舒缩波 形 ,下次给药前用 37 ℃克氏冲液洗胃条多次 ,待肌 条的活动平稳后再加入另一种药物。依次描记各药 对胃底环形肌舒缩波形的影响〔2〕。 212　对家兔离体十二指肠和回肠肌的影响 　将家 兔敲晕处死 ,取十二指肠与回肠 ,找到所需部位按离 体标本实验法制备家兔离体空肠标本。在预冷的台 氏液中清洗干净肠内容物 ,剪去肠管周围的脂肪和 结缔组织等。悬挂十二指肠与回肠肌条 ,在 2 g的 前负荷下温浴平衡 ,每 20 m in换一次营养液 ,平衡 1 h,给药 ,按“211”项下方法 ,描记正常及各山楂组作 用曲线。 213　统计学方法 　用 SPSS1115统计软件进行方 差分析。 3　结果 　 不同山楂制品对大鼠胃底和家兔离体十二指肠 及空肠平滑肌舒缩情况见表 1,图 1～图 3。 　　表 1 不同炮制山楂对大鼠胃底和家兔离体十二指肠和回肠平滑肌舒缩情况 ( …x ±s, n = 8 ) 组别 给药量 / ( g /mL) 胃底平滑肌振幅 / g 十二指肠平滑肌振幅 / g 回肠平滑肌振幅 / g 空白组 0　　 1190 ±0117 2153 ±0120 2125 ±0122 生山楂组 01025 2176 ±01223 3108 ±01403 3140 ±01343 炒山楂组 01025 3111 ±013733 3170 ±01353 3103 ±01423 焦山楂组 01025 2167 ±015633 3162 ±01423 3156 ±01453 山楂炭组 01025 2178 ±01473 3178 ±01393 3112 ±01393 　　注 :与空白组比较 , 3 P < 0105, 33 P < 0101 图 1　不同炮制山楂对大鼠胃底平滑肌张力的影响 ·0251· Journal of Chinese MedicinalMaterials　　第 32卷第 10期 2009年 10月 图 2　不同炮制山楂对家兔十二指肠平滑肌张力的影响 图 3　不同炮制山楂对家兔回肠平滑肌张力的影响 　　各组对胃底平滑肌张力均有明显影响 ( P < 0101或 P < 0105) ,炒黄山楂组作用为佳 ;各组均使 十二指肠平滑肌振幅增加且具有统计学意义 ( P < 0105) ,山楂炭组作用为佳 ;各组均使回肠平滑肌振 幅增加 ,且有统计学意义 ( P < 0105) ,其中焦山楂组 作用最佳。由图 1～图 3可以看出 ,各山楂炮制品明显增高胃肠平滑肌的振幅 ,对振动频率影响不大。4　讨论山楂内含有多种有机酸 ,对胃肠运动有极大的促进作用 ,过多的有机酸会对胃产生一定的刺激性 , ·1251·Journal of Chinese MedicinalMaterials　　第 32卷第 10期 2009年 10月 炮制后可使有机酸含量显著降低〔1〕。山楂中的有 机酸类成分有助于消化、抑菌等功能 ,对热不稳定 , 加热后含量降低 ,且随温度的升高 ,有机酸含量降低 越多〔1〕。当加热至 140℃以上时 ,有机酸含量显著 降低 ,至加热至 220℃时 ,下降幅度达到 48%〔3〕。 由实验结果可以看出 ,生山楂及各种山楂炮制 品对离体胃肠平滑肌的舒缩活动均有明显促进作 用 ,且炮制后的山楂的作用均优于生山楂 ,且炒黄山 楂最强作用于大鼠胃底平滑肌 ,山楂炭最强作用于 家兔十二指肠平滑肌 ,焦山楂最强作用于家兔回肠 平滑肌 ,可能与不同的有效成分或其降解产物作用 于不同部位的不同受体有关。本实验结果不同于文 献报道的生山楂作用最大〔3〕,但与在体实验结果 (另文报道 )相一致 ,发生机理尚不清楚 ,需进一步 研究。 参 考 文 献 [ 1 ] 毛淑杰 ,李铁林 1炮制对山楂中总黄酮及总有机酸的影 响 [ J ]1中国中药杂志 , 1989, (9) : 202211 [ 2 ] 杨颖丽 ,郑天珍 ,瞿颂义 ,等 1青皮和陈皮对大鼠小肠纵 行肌条运动的影响 [ J ]1兰州大学学报 (自然科学版 ) , 2001, (5) : 942971 [ 3 ] 陈青莲 ,彭浩 ,艾卫涛 1不同烘制温度对山楂有机酸含 量及胃肠推动功能的影响 [ J ] 1湖北中医学院学报 , 2000, 2 (1) : 462471 HPLC测定黄芩生品及不同炮制品中 三种黄酮类成分的含量 宋 　健 ,张小伟 ,郑 　莉 ,石俊英 3 (山东中医药大学 ,山东 济南 250355) 　　摘要 　目的 :比较黄芩生品及不同炮制品中三种黄酮类成分的含量差异。方法 :采用 HPLC反相 C18色谱柱 (416 mm ×250 mm, 5μm) ,以 H2O2MEOH2H3 PO4 溶剂系统梯度洗脱 ,检测波长为 276 nm。结果 :黄芩生品及不同 炮制品中三种黄酮类成分的含量存在明显差异。结论 :不同炮制品中黄芩苷和黄芩苷元含量不同 ,为临床用药提 供科学的依据。 关键词 　黄芩 ;炮制方法 ; HPLC;黄酮类 中图分类号 : R28313　　文献标识码 : A　　文章编号 : 100124454 (2009) 1021522203 收稿日期 : 2008212219 基金项目 :山东省重大科技专项 (2006GG1109078) 作者简介 :宋健 (19762) ,男 ,讲师 ,研究方向 :中药学。3 通讯作者 :石俊英 , Tel: 0531287818785, E2mail: sjy5012@1261com。　　黄芩为唇形科植物黄芩 Scu tellaria ba ica lensisGeorgi的干燥根 ,是一味常用中药 ,性味苦寒。黄芩始载于《神农本草经 》,具有清热燥湿、泻火解毒、凉血止血、除热安胎等功效〔1〕。黄芩中含有多种黄酮类成分 ,主要有黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素〔2〕等。临床主要以不同炮制规格的饮片入药。黄芩的炮制方法很多 ,有清蒸黄芩、冷浸黄芩、煮黄芩、炒黄芩、酒炒黄芩和黄芩炒炭等〔3〕,不同炮制品中黄芩苷含量存在差异〔4〕。本实验以黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素 3种成分为指标 ,采用 HPLC法分别测定生黄芩及不同炮制品中 3种成分的含量 ,旨在全面地评价黄芩生品及不同炮制品中黄酮类成分的变化 ,以期为临床用药提供科学的依据。1　仪器、试药与材料 111　仪器 　Agilent 1200 高效液色谱仪 ; AgilentDAD检测器 : Agilent Chem station工作站 (美国安捷伦科技公司 ) ; FW 80型高速万能粉碎机 (天津泰斯特仪器有限公司 ) ; SHZ2Ⅲ型循环水真空泵 (上海亚荣生化仪器厂 ) ;电热恒温水浴锅 (上海医疗器械五厂 )。112　试药 　黄芩苷对照品 (批号 1107152200514)、黄芩素 (批号 1115952200402 )、汉黄芩素 (批号15142200202) ,对照品均购自中国药品生物制品检定所 ;色谱纯甲醇 (天津市科密欧化学试剂开发中心 ) ,其余试剂为分析纯。113　材料11311 　生黄芩 :取原药材 ,除去杂质 ,洗净 ,采用自然干燥 (避免暴晒 )或 60 ℃以下烘干。 ·2251· Journal of Chinese MedicinalMaterials　　第 32卷第 10期 2009年 10月