三氧治疗对淋巴瘤患者T细胞亚群1

免费咨询电话：4006-828-820 网址：http://www.828820.com QQ群：141422077 三氧治疗对淋巴瘤患者 TTTT细胞亚群、NKNKNKNK细胞的影响 (1山西医科大学第二临床医学院血液科, 太原 030001; 2山西省肿瘤医院血 液科; *通讯作者) 摘要: 目的 探讨三氧联合化疗对淋巴瘤患者细胞免疫功能的影响。 方法 55例淋巴瘤患者随机分为单纯化疗组(n=30)和化疗加三氧组(n=25),治疗前后应 用流式细胞术测定患者的CD3,CD4,CD8,CD4/CD8和NK值,以30例正常人为对照 组。 结果 ①淋巴瘤患者 CD3+,CD4+,CD56+ (NK)细胞,CD++/CD8+比值低于 正常对照组,CD8+细胞高于正常对照组;②单纯化疗组各项免疫指标治疗前后无 明显变化;③化疗加三氧组治疗后与本组治疗前和单纯化疗组治疗后比较 ,CD4+ 细 胞 ,CD4+/CD8+ 比 值 明 显 升 高 (P<0.05),CD8+ 细 胞 明 显 降 低 (P<0.05),CD3+,CD56+ (NK)细胞无明显变化(P>0·05)。 结论 T 细胞亚群在淋 巴瘤患者中受到抑制,三氧治疗能提高淋巴瘤患者的细胞免疫功能,该方法是一种 低毒高效的生物反应调节剂。 关键词: 淋巴瘤; T 淋巴细胞亚群; 三氧; NK细胞; 免疫功能; 流式细胞 术 中图分类号: R730.51 文献标识码: A Effect of ozone therapy on T-lymphocyte subsets, NK cell in the patients with lymphoma LI Li, ZHANG Qiao-hua, HOU Shu-ling, et al(Dept of H ematology, Second Clinical Medical College, Shanxi Medical Universi-ty,Taiyuan 030001 ,China) Abstract: Objective To observe the effect of ozone therapy combined with chemotherapy on the cell immune function in patients with lymphoma. Methods Fifty-five patients with lymphoma were divided into two groups: chemotherapy group(A) and chemotherapy plus ozone therapy group(B).Flow cytometry and monoclonal antibodies were used to evaluate T-lymphocyte subsets, NK cell of peripheral blood in normal control group and treated groups(groups A,B). Results ①Compared with the controls,CD3+,CD4+,CD56+ (NK) cell and CD4+/CD8+ratio 免费咨询电话：4006-828-820 网址：http://www.828820.com QQ群：141422077 markedly reduced, while CD8+cell increased.②After treatment, the im- mune indexes in group A had no significant changes.③CD4+,CD4+/CD8+ratio significantly increased, but CD8+cell decreased ingroup B after treatment. There were no significant changes in CD3+, CD56+(NK)cell in group B after treatment. Conclusion The cell immune function is depressed in patients with lymphoma. The ozone therapy can significantly improve the cell immune func- tion of the patients with lymphoma. It is a highly efficient biological response regulator without side effect. Key words: lymphoma; T-lymphocyte subsets; ozone; NK cell; immune function; flow cytometry 淋巴瘤是一种免疫系统的恶性肿瘤,分为霍奇金病(HD)和非霍奇金淋巴瘤 (NHL)两大类。机体的免疫功能紊乱与淋巴瘤的发生、发展有密切的关系。已知 淋巴瘤患者 T、B 细胞免疫功能均明显受到抑制,T 细胞亚群的数量低于正常人且 亚群间平衡失调。免疫治疗在淋巴瘤治疗中的作用倍受关注。三氧是一种活性氧, 由三个氧原子组成。医用三氧是医用纯臭氧和纯氧气的混合物。研究明三氧通 过氧化、诱导产生活性氧簇,作为生物信使激活免疫活性细胞,生成多种免疫活性 因子,调节患者细胞免疫、体液免疫。本文采用流式细胞术淋巴瘤患者外周 血 T 淋巴细胞亚群和 NK细胞在三氧治疗前后的变化,并探讨三氧治疗淋巴瘤的 临床价值。 1 材料和方法 1.1 研究对象 1.1.1 观察组 选择55例淋巴瘤患者,均为2005-06~2006-06山西省肿瘤医院血液 科住院的初治患者,诊断均经淋巴结病理活检证实。按随机表将患者随机分为 A、 B 两组。A 组30例,为单纯化疗组,其中男19例,女11例;年龄7-83岁,中位年龄50岁; 霍奇金淋巴瘤4例,非霍奇金淋巴瘤26例,其中 B-NHL 19例,T-NHL 7例;Ⅰ-Ⅱ期17 例,Ⅲ-Ⅳ期13例。B 组25例,为化疗+三氧治疗组,其中男15例,女10例;年龄25-73岁, 中位年龄52岁;霍奇金淋巴瘤3例,非霍奇金淋巴瘤22例,其中B-NHL 17例,T-NHL 5 例;Ⅰ-Ⅱ期16例,Ⅲ-Ⅳ期9例。两组在年龄和性别上差异无显著性。全部病例均除 免费咨询电话：4006-828-820 网址：http://www.828820.com QQ群：141422077 外肝肾功能异常,以及合并其他恶性肿瘤和免疫性疾病。 1.1.2 正常对照组 30例,男17例,女13例,中位年龄50岁,均为本院健康体检者。 1.2 治疗 略 1.3 观察指标和实验方法 所有病例在治疗前后1周内采血检测外周血中 CD3+,CD4+,CD8+,CD56+细胞百分数和 CD4+/CD8+比值。采用直接免疫荧光标 记全血溶血法流式细胞仪检测。取 CD3-precp,CD4-FITC,CD8-PE,CD56-PE 荧光 标记的单克隆抗体(美国 BD公司生产)各20μl 分别加入100μl EDTA抗凝的外周血 进行三荧光(NK 细胞采用双荧光)染色,室温下避光孵育20 min,加10%溶血素(美 国 BD 公司生产)1 ml 溶解红细胞,室温下避光孵育10 min,1 200 r/min 离心5 min 取沉淀用 PBS洗细胞一次,流式细胞仪(美国 BD公司流式细胞仪 FACSORT)检测, 阳性细胞百分率减去非特定对照值。 1.4 统计学分析 数据均采用 SPSS11.0统计软件分析处理,计量资料以 x±s 表 示。主要检测指标均进行正态性和方差齐性检验(F 检验),两组间均数比较采用 t 检验,结果均以 P<0.05为有统计学意义。 2 结果 2.1 淋巴瘤患者外周血 T 细胞亚群、NK细胞治疗前与正常对照组的比较 肿瘤 组的 CD3+,CD4+,CD56+ (NK)细胞,CD4+/CD8+比值在治疗前较正常对照组降 低,CD8+细胞在治疗前较正常对照组升高(P<0.05),有统计学意义。 2.2 单纯化疗组(A 组)患者外周血 T 细胞亚群、NK细胞治疗前后比较 B比 T 细 胞亚群、NK细胞治疗后虽有变化,但前后比较 P>0.05,无统计学意义。 2.3 化疗+三氧组(B 组)患者外周血 T 细胞亚群、NK 细胞治疗前后比较 B 组 T 细胞亚群中 CD4+细胞、CD4+/CD8比值治疗后与治疗前相比明显升高,CD8+细胞 治疗后与治疗前相比明显降低(P<0.05),有显著统计学意义。CD3+,CD56+ (NK) 细胞治疗后虽有变化,但前后比较 P>0.05,无统计学意义。 2.4 A 组与 B 组患者外周血 T 血细胞亚群、NK细胞治疗后比较 B组 T 细胞 亚群中 CD4+细胞、CD4+/CD8+比值与 A 组相比明显升高,CD8+细胞与 A 组相比 明显降低(P<0.05),有显著统计学意义。CD3+细胞、CD56+ (NK)细胞 A、B 两组 比较 P>0.05,无统计学意义。 免费咨询电话：4006-828-820 网址：http://www.828820.com QQ群：141422077 表1 治疗组与正常对照组 T 细胞亚群、NK细胞含量比较 (xˉ±s) Tab 1Comparison of the T-lymphocyte subsets ,NK cell in two treated groups and control group (xˉ±s) 分组 n CD3+(%) CD4+ (%) CD8+ (%) CD4+/CD8+ CD56+ (%) A 组 30 治疗前 66.66±11.99* 28.73±9.53* 34.97±12.95* 1.14±0.82* 16.91±9.83* 治疗后 70.12±12.56 28.49±11.90 36.9±12.71 0.90±0.58 16.10±7.92 B 组 25 治疗前 67.12±12.81* 25.51±11.47* 39.29±13.66* 0.78±0.49* 12.97±5.73* 治疗后 68.27±7.69 34.84±9.68** 30.52±8.80** 1.22±0.52** 14.07±7.77 正常对照组 30 72.85±8.51 45.10±8.10 27.04±8.44 1.41±0.56 27.41±5.04 与正常对照组比较,*P<0.05;与 A 组治疗后比较,**P<0.05 3 讨论 机体依赖完整的免疫机制来有效地监视和排斥癌变细胞,因此绝大多数个体 不出现肿瘤。若癌变细胞因某些原因逃避免疫的监视排斥而增殖到一定程度时 , 肿瘤的发生便不可避免。肿瘤的发生、发展、复发率和存活期等都与机体的免疫 状态有密切关系。然而放、化疗对正常细胞和机体免疫功能的损伤作用也是不可 避免的,因此在肿瘤综合治疗中,免疫治疗成为提高肿瘤治愈率和预防复发的有效 方法[1]。淋巴瘤是免疫系统的恶性肿瘤,瘤细胞产生大量免疫抑制因子以及在淋 巴器官中异常增殖会抑制和破坏免疫功能,在对淋巴瘤患者化疗的同时应用免疫 调节剂,既可以提高患者的抗肿瘤能力又可以减轻化疗对机体免疫功能的损伤作 用。三氧又名臭氧是一种活性氧,通过氧化诱导产生活性氧簇发挥系统治疗作用, 使机体产生多种细胞因子[2-6],其中 IFN-γ、IL-2和 TNF-β增强细胞免疫应答,IL-4、 5和6增强体液免疫应答。目前国内报道三氧主要应用于乙肝的治疗[6-8],并取得 了一定疗效,用于肿瘤的治疗国内尚无相关报道。 本实验结果示淋巴瘤患者 CD3+, CD4+,CD56+ (NK)细胞百分数和 CD4+/CD8+比值明显降低,CD8+细胞百分数明显高于正常人,这与文献[9]报道的 淋巴瘤患者存在免疫功能主要是细胞免疫功能低下相一致。对于淋巴瘤患者化疗 免费咨询电话：4006-828-820 网址：http://www.828820.com QQ群：141422077 后免疫功能状态各家报道不一 ,有报道化疗进一步抑制了已经降低的免疫功能 [10],也有报道化疗提高了已经降低的免疫功能[11]。本研究发现一周期单纯化疗 后 CD3+, CD4+, CD8+, CD56+细胞百分数和 CD4+/CD8+比值无明显变化。其可 能原因为:①个体差异;②与化疗的剂量、周期和效果有关。血液系肿瘤患者在大 剂量化疗后,短期内其损伤的免疫功能未能恢复,化疗后获得 CR或接近 CR,各项 指标皆有好转,但并未达到正常水平[12]。 本组观察了25例三氧联合化疗的治疗效果,采用三氧联合化疗组(B 组)与单 纯化疗组(A 组)进行比较,结果示 B 组化疗后 CD4+细胞、CD4+/CD8+比值均明显 高于本组化疗前及A组化疗后水平,CD8+细胞明显低于本组化疗前及B组化疗后 水平,而 A组 CD4+细胞、CD8+细胞及 CD4+/CD8+比值化疗前后无明显变化,从 现有治疗观察三氧有明显提高淋巴瘤患者细胞免疫功能的作用。其原因为:三氧 通过氧化、诱导产生活性氧簇,作为生物信使诱导机体产生多种细胞因子,激活免 疫活性细胞,促进 T 细胞成熟、分化,上调免疫功能。 目前应用于临床的非特异性免疫制剂有很多种,主要是针对性地补充一种细 胞因子,均为外源性,副作用大。三氧是激发自身细胞生成多种内源性细胞因子而 发挥作用,副作用少。本组25例应用三氧后无特殊不良反应出现。本研究例数较 少,有待今后继续研究,进一步扩大样本和观察三氧对康复期患者的作用 ,以深入 探讨三氧的作用机制,为临床综合治疗淋巴瘤提供新的途径。此外,对于康复患者 也可以调节免疫功能,消灭残留病灶,从而预防肿瘤复发。 参考文献: [1] 陈 保 成 , 冀 学 斌 . 非 霍 奇 金 淋 巴 瘤 的 生 物 学 治 疗 [J]. 山 东 医 药,2005,45(10):524-525. [2] Bocci V, Paulesu L. Studies on the biological effects of ozone:1.Induction of interferon on human leukocytes [J].Haematologi -ca,1990,75(6):510-515. [3] Paulesu L, Luzzi L, Bocci V. Studies on the biological effects ofozone: Induction of tumor necrosis factor (TNF-alpha) on hu-man leucocytes[J].Lymphokine Cytokine Res,1991,5:409-412 免费咨询电话：4006-828-820 网址：http://www.828820.com QQ群：141422077 [4] Larini A, Bocci V. Effects of ozone on isolated peripheral bloodmononuclear cells[J].Toxicol In Vitro,2005,19(1):55-61. [5] BocciV. Ozone as a bioregulator : Pharmacology and toxicology ofozonetherapy today[J].J Biol Regul Homeost Agents,1996,10 (23):31-53. [6] 郭亚兵,周福元.医用臭氧治疗慢性乙型病毒性肝炎的初步认识 [J].第一军医 大学学报,2005,25(4):150-151. [7] 刘真真,杨尧,叶慧,等.臭氧治疗对慢性乙型肝炎16例临床疗效的初步评价[J]. 四川医学,2005,26(10):1088-1089. [8] 何晓峰 ,李彦豪 .三氧治疗 :历史、现状与未来 [J].中国介入影像与治疗 学,2005,2(5):389-389. [9] 赵成艳,马荣,王忠利,等.非霍奇金淋巴瘤患者 T 细胞亚群、NK细胞检测的临 床意义[J].中国免疫学杂志,2006,22(2):180-185. [10] 王文武,欧阳学农,张霞.迈普新联合化疗治疗恶性淋巴瘤的临床研究 [J].肿 瘤防治研究,2006,33(2):58-58. [11] 郑美芳.恶性淋巴瘤患者 NK 细胞活性及 T 细胞亚群的研究[J].肿瘤研究与 临床,2000,12(5):316-317. [12] 李新爱,王列样,麦羡霞,等.恶性血液系统肿瘤自体干细胞移植前后免疫功 能的变化[J].肿瘤研究与临床,2001,13(5):349-349.