应用血浆检测乙肝两对半的研究

中国现代医药杂志2006年2月第8卷第2期 MMJC,Feb2006,Vol8,No.2 网址:www.zgxdyy.com 我国人群乙肝病毒的感染率较高[1]。乙肝两对 半是用血清作检测物进行检测[2],对于用血浆作乙 肝两对半的检测罕见报道。1999年1月至 2001年 7月应用血浆作检测物对乙肝两对半的工作进行研 究,现如下。 1 材料与 1.1样本 选择在我院住院已知 HBsAg、HBsAb、 HBeAg、HBeAb和 HBcAb阳性各 68份标本及日常 体检未知的人1568例同时抽到抗凝血和不抗凝血 3ml,年龄3～78岁,平均35岁。 1.2试剂 由上海华泰生物工程公司生产的乙型肝 炎两对半试剂。 1.3仪器 为芬兰 Wellwash生产 4MKZ洗板机和 MK3酶标仪。 1.4方法 1.4.1采用目前先进的ELISA方法,严格按操作 书操作,每次检测时经加临界值作质控。 1.4.2对照组:应用血清作检测物采用原方法检测乙 肝两对半。 1.4.3研究组:应用血浆作检测物采用原方法为研究 方法Ⅰ。在试剂的酶标记物中加入 10%吐温 50ul 后,应用血浆检测乙肝两对半为研究方法Ⅱ。 2 结果 2.1在已知乙肝两对半各项目68份阳性中,用原方 法检测乙肝两对半时,以血浆作检测物和以血清作 检测物发现,HBsAg、HBsAb、HBeAg的结果相同,而 HBsAg和 HBsAb的结果检出阳性的分别少 7例和 5例,为 89.70%和 91.17%,统计学分析有差异(P< 0.05)。但在试剂酶标记物中加入10%吐温50ul后作 乙肝两对半检测,血清与血浆中的乙肝 5个指示结 果基本相同,而HBeAb和HBcAb分别为 98.53%和 100%(P<0.05),见表1。 表1 乙肝5项阳性血浆和血清的结果 应用血浆检测乙肝两对半的研究 梁李枝 【摘要】 目的 研究和分析应用血浆检测乙肝两对半效果。方法 采用 ELISA方法,在试剂的酶标记物中加入10%吐 温 50ul后,检测血浆乙肝两对半。结果 血浆检测乙肝两对半不加入吐温的检出率和加吐温的检出率 HBsAg、HBsAb和 HBeAg这3项与血清相同,但酶标物加入 50ul10%吐温后检测血浆乙肝两对半较不加吐温的检出率 HBeAb和 HBcAb从 89.70%和91.17%提高到98.53%和100%,与血清的检出率基本相同。结论 应用血浆检测乙肝两对半是可行的。 【关键词】血清 血浆 乙型肝炎病毒 SearchofbloodplasmabeingusedtodetecthepatitisB LiangLizhi.People'shospitalofWuchuan,Guangdong524500 【Abstract】 Objective TosearchandanalysetheeffectofusingplasmatodetecthepatitisB.Methods ELISAmethod wasused.After50ul10%tweenbeingaddedtoenzymelabeledcompoundinthereagent,plasmahepatitisBweredetected.Re- sults PlasmawasusedtodetecthepatitisB,thedetectablerateoftweennotbeingaddedandbeingadded,thethreeitemsHB- sAg、HbsAbandHbeAgwerethesameasbloodserum.Butafter50ul10%tweenwasaddedtoenzymelabeledcompound,plas- mawasusedtodetecthepatitisBandthedetectablerateHBeAbandHbcAbincreasedfrom89.7%and91.17%to98.53%and 100%.Itwasthesameasbloodserumonthewhole.Conclusion BloodplasmabeingusedtodetecthepatitisBisfeasible. 【Keywords】 Bloodserum Bloodplasma HepatitisBvirus 作者单位:524500 广东省吴川市人民医院检验科 第一作者简介 梁李枝,主管检验师,毕业于海南医学专科 学校检验专业。从事临床医学检验 20余年,在临床生化、免 疫、体液和细胞形态学等方面取得优异业绩。 组别 n HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb 对照组 68 68 68 67 67 69 研究组 方法Ⅰ 68 68 67 66 61 62 方法Ⅱ 68 68 68 67 67 68 ·13· 中国现代医药杂志2006年2月第8卷第2期 MMJC,Feb2006,Vol8,No.2 网址:www.zgxdyy.com 2.2在日常体验中未作过乙肝两对半检测的 1568 人,以血浆和血清作检测物作乙肝两对半的检测时, 原方法(即方法Ⅰ)检测 HBeAb和 HBcAb血浆比血 清检出例数少8例和9例。而试剂加吐温后(即方法 Ⅱ)乙肝5个指标检出率高于方法Ⅰ,与对照值即用 血清检出率基本相同。见表2。 表2未知HBsAg阴、阳性的1568人的结果 用血浆作检测的乙肝两对半结果,以血清的结 果作对比与加吐温用血浆作检测的结果为HBsAg 99.6% (241/240),HBsAb 99.7% (990/993),HBeAg 98.7%(87/88),HBeAb90%(60/59),HBcAb97.9% (140/143),其检出率无差异(P>0.05)。 3 讨论 3.1在该探讨中得出的结果,按试剂说明书规定的 温育时间操作,用血清和血浆作检测乙肝两对半时, HBsAg、HBsAb和 HBcAb的 检 出 结 果 相 同 ,而 HbeAb和 HBcAb血清的检出各 68份阳性标本中, 较血浆的检出结果为高。未能检出 HBeAb和 HBcAb所用的血浆均是同一份血浆,我们对这几份 血浆作粘度检测,其粘度均大大高于常值[3],说明血 浆粘度可能对乙肝两对半的HbeAb和HBcAb的检 测有一定的影响。 3.2有关文献报道[4],血清与血浆作检测物检测乙肝 两对半,HbeAb和 HBcAb没有检出的 12例,S/值 均为0.928～0.762。当用本研究的方法用血浆检测结 果在酶标仪上检出这几例的2项结果。 3.3文献[4]报道所用的试剂为未有改正的旧试剂,在 操作时水溶的时间为60分钟,而本研究所用的试剂 为革新后目前推广的快捷方法,操作水溶 30分钟。 故本研究的结果中HbeAb和HBcAb在检测不加温 的结果低于文献,而此时把时间再延长一倍(即 60 分钟水溶),结果与文献报道相近。本研究在操作时 的试剂加入 10%吐温 50ul后的检出率与文献报道 相同,而时间又为30分钟。 3.4吐温是一种表面水化剂,能降低蛋白质表面的 水化力,增加抗原体的接触面,实际操作时在试剂的 酶标记物中加入10%吐温50ul后,使粘稠度较低的 抗原抗体充分结合,提高检出率。 3.5在日常工作中,常常有抗凝血作血常规、血气分 析等检查,而同时作乙肝检查的病人,可抽一份抗凝 血进行乙肝两对半和其他项目检查,这样给病人既 不带来痛苦,又给工作带来方便,提高工作次序。 参 考 文 献 1 骆抗生.乙型肝炎基础和临床.北京:人民卫生出版社,1997:143- 157 2 李景林主编.中华医学检验全书.北京:人民卫生出版社,1996: 404-406 3 单桂秋.溶血及脂浊样品对ELISA检测乙肝表面抗原的影响.电 临床检验杂志,1999,17(2):102-103 4 王景健.血浆和血清用作乙肝标志物检测标本的比较.广东医学, 1998,19(10):808 (收稿:2005-12-07 修回:2006-01-27) (本文编辑:宁复) 组别 n HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb 对照组 1568 241 990 87 60 143 研究组 方法Ⅱ 1568 240 993 88 59 140 为提高各医院心血管内科主任及业务骨干医师学习有 关新理论、新技术、新治疗方法,进行专业知识更新,按照卫 生部“做好卫生科教工作,加强卫生人才培养”的要求,中国 医师协会培训部与《中国现代医药杂志》编辑部定于 2006年 4月 21日至 28日在北京召开“2006全国心血管内科医学新 进展高级研修班”,学习期满,经考核合格者授予Ⅰ类医学继 续教育学分。 届时将邀请全国著名专家系统讲解:高血压、冠心病、瓣 膜病、心律失常、心肌梗死、血脂异常、肺栓塞、超声诊断、影 像学诊断等一系列心血管内科多发性疾病在国内外的新进 展新动态。通过全面系统的专培训,提高基层心血管 内科临床骨干医师的诊、治、防等综合水平。详情请登录《中 国现代医药杂志》网站,网址为www.zgxdyy.com。 关于举办“2006全国心血管内科医学新进展”高级研修班暨会议征文的通知 ·14·