甲氨蝶呤纯化工艺的改进

中国医药工业杂志 Chinese fourn~[of Pharmaccutieals 199(I，2l(12) 甲氨蝶呤纯化的改进 IMPR0YED pURIFICATION 0F METH0TREXATE 周 蓓 颜秩兴 林培 宁 (上海第 二制药厂，上 海eo0ogq) zHOu Bei，YAN Qiu-Xing，LIN Pei-Ning (Shanghai 2,to 12 Pharmaoeutiaal Factor>, Shah舯ai gooose,) · S 甲氨蝶呤(MTx)是 目前临床上常用的广谱抗肿瘤药，尤其是近十几年来，以高剂量 MTX 加四氢叶酸钙(HD-MTX-CF)治疗骨肉瘤等取得 良效，因而要求高纯度的 MTX 产品。美国 药典xx版规定 MTX含量应在 04簿以上，我国目前的工艺生产的MTX，含量只达到 85％。 据文献报道 一，MTX 的纯化可先在 pH 6形成其锌盐析 出，然后在 pH 1．5时，生成其盐酸盐， 再形成钠盐，用丙酮冲析，可得到高纯度的 MTX 我们试验该纯化方法，发现收率大为降低。 经研究改进，通过一次形成盐酸盐和一次形成钠盐，再用硫酸调节 pH析出成品，可将 MTX 含量从 85弼提高到 94两以上 精制收率为 77％。如以盐酸代替硫酸调 pH，虽同样得到成品， 但色泽容易变黄。 同时，我们试用含量为 87．9％的 MTX通过DEAE纤维素分离 ，以NH。HCOs缓冲洛 液进行梯度洗脱，制得含量接近 1oo％的高纯度MTX，作为按美国药典 XXI版规定进行MTX 含量分析的品。实验中发现，MTX在碱性溶液中不稳定，如 DEAE粒度过细，则 MTx 在碱性溶液中停留时间过长；如 DEAE粒度过粗，则分离效果不好；最后确定了舍适的DEAE 纤维素粒度、装柱量和进样量之比，通过一次层析，即可得合格的高纯度 MTX。 实 验 部 分 1．MTX 的 纯 化! 将 MTX 60g加入含水 1480ml的烧杯中，用氨水调至 pH 9，过滤，滤液用盐酸调至 pH 1．5，使盐酸盐析出。过滤，将滤饼加水溶解后用氢氧化钠水洛液调至 pH 9，加入适赞的丙 酮，直到有绪晶析出。过滤，滤饼加水 2000 ml，用硫酸调至 pH 4，搅拌 1 h，过滤，得黄色 MTX 固体，以P。O 减压干燥 ，得量 46 g，精制率 76．7 ，含量为 96．3为(HPLC归一化法)， 2．MTX 标 准品 制 备： 将DEAE纤维素先用酸碱处理，然后洗至 中性，装柱以 0．1 mol／L NH4HCO,缓冲液通 过。将含量 87．9绚 的bITX500nag漆 于 缓冲 液，上 柱，然 后 用 O．1 mol／L和 0．4mol／L NH,rI∞ 。缓冲液进行梯度洗脱，并自动收集，每管约 10 ml，按 紫外吸收光谱检澳I结果，合并 ll(k-~130各瓶，低温干燥，用 H2sO 调至 pH 4，析出淡黄色 MTX 55mg，和芬兰Famor~N 进 口标准品对照，测得其含量接近 1OO％(HPLC归一化法)。 E t Gallelli JF：J Pharra Sci 1967．56：38 参 考 文 献 r 1 1 US I983 蚰74987；(c^ 1083．95：216006c [1●89年 12月 29习收稿] 维普资讯 http://www.cqvip.com