HBV-DNA荧光定量基因检测流程表(ABI7300)

HBV-DNA荧光定量基因检测流程 实验日期： ABI7300保存文件名：D:\DATA\ 试剂准备区（1区） ①实验前：□打开通风设备 □温度 ℃ □相对湿度 % ②试剂： 试剂厂家：________________________ 批号：　　　　　　　 本次实验所需试剂量： 　 　人份，其中标本量： 份，对照： 份，室内质控： 份，阳性梯度参考品： 份。试剂存量： 人份 ③试剂配置： □　按基因扩增实验室标准操作程序配制1%的有效氯消毒液 毫升； □ 其它； ④实验后： □填写记录　 □冰箱的常规维护 □清洁地面 □用1%的有效氯消毒液、75%酒精消毒实验台面、打开移动紫外线灯照射60分钟，累计照射时间 小时。 □打开紫外灯照射60分钟，累计照射时间 小时。 □处理废弃物 □关闭通风设备 标本处理区（2区） ①实验前：□打开通风设备 □温度 ℃ □相对湿度 % ②室内质控物来源及浓度：来源： ______________ 质控浓度：_________拷贝/毫升 ③定量阳性参考品浓度： □104 □105 □106 □107 ④核酸提取： 在生物安全柜中：取待测血清 份、阳性室内质控品、阴性对照各100ul至1.5ml离心管中加等量浓缩液混匀后离心10分钟→除去上清液，向离心管中加入30ulDNA提取液混匀→100℃干浴10分钟→12000rpm离心5分钟； 在工作台面：向 个PCR反应管中分别加入处理过的样本、阳性室内质控品、阴性对照和阳性梯度参考品各2ul，盖紧管盖，6000rpm离心10秒。 ⑤实验后： □填写记录　 □冰箱的常规维护 □加样器的常规维护 □清洁地面　 □离心机的常规维护，累计使用时间 小时 分钟。　 □干式恒温器的常规维护，累计使用时间 小时 分钟。 □生物安全柜的常规维护，累计使用时间 小时 分钟。 □用1%的有效氯消毒液、75%酒精消毒实验台面、打开紫外线车照射60分钟，累计照射时间 小时。 □打开紫外灯照射60分钟，累计照射时间 小时。 □处理废弃物 □关闭通风设备 扩增分析区（3区） ①实验前：□打开通风设备 □温度 ℃ □相对湿度 % ②打开电脑，进入WINXP系统，打开仪器电源，打开ABI7300软件 ③扩增分析： □按标准操作程序设置样本信息、设定扩增参数________________________，40个循环 □将PCR反应管置于扩增仪上相应位置，扩增时间 1 小时 20 分，累计扩增时间 小时 分钟。 仪器状态：□正常 □不正常 ④测试所得参数值： Y轴截距： 斜率： 相关系数： 室内质控结果： 拷贝/毫升 结果是否在控： □是 □否 □填写室内质控记录、描质控图 实验结果失控原因及处理：（失控判断标准见标准操作程序中的室内质控程序） ⑤实验后： □填写记录 □电脑的常规维护 □ABI7300的常规维护 □清洁地面　 □用1%的有效氯消毒液、75%酒精消毒实验台面、打开紫外线车照射60分钟，累计照射时间 小时。　 □打开紫外灯照射60分钟，累计照射时间 小时。 □处理废弃物 □关闭通风设备 操作者： 审核者： 日期：