高效液相色谱法测定四磨汤口服液中柚皮苷的含量

�� ! ∀耐# ∃% & ∀#∋∀ ∋( ∀ ) ∗+, − . /0 112, 30 ( ∀ − 445 高效液相色谱法测定四磨汤 口服液中袖皮普的含量 刘 戎, , 运 委, 6� , 湖北省黄石市中医院 , � 7689 4 : − , 湖北省黄石市药品检验所 , � 74689 9 【摘 要」 目的 建立测定四磨汤 口服液中抽皮普含量的方法 。 方法 采用高效液相色讲法 , 色语柱为 !;<∀ 招�� =∗+ # > 2? , 流动相为甲醉一水6�≅ ? Α � 9 , 流速为4 , Α ΒΧ · 而( 一 , , 柱温为室温 ,检浏波长为 −−Α (Β 。 结果 抽皮普 4 , �−4 − Δ � , −4 − 4 叱 范围内与峰面积积分值线性关系良好6Ε 二 4 , 55 5 . 9 , 平均加样回收率为 �44 , Α4 Φ 6( 二 Α9 沂7 刀 二 − , ≅ Φ 。 结论 该方法灵敏 、快速、准确 , 可作为四磨汤 口服液质童控制的方 法。 〔关键词」 四磨汤 口服液 : 抽皮普 : 色谱法 , 高效液相 Γ中图分类号 � Η− . , + : Η5 −≅ , − Γ文献码」 Ι Γ文章编号ϑ �68 只折. � 6−46 刃94Α 增刁�� 刁− 四磨汤口服液是由木香 、积壳 、乌药 、槟榔四味中药经一定 工艺制成的复方制剂 , 具有顺气降逆 、消积镇痛之功效。 为检 测该药质量 , 笔者借鉴高效液相色谱6!1Χ>9法测定抽皮昔的 方法 Γ ‘一 �〕,建立高效液相色谱法测定四磨汤口服液中主药之一 积壳的有效成分袖皮昔的含量 。 � 仪器与试药 � , � 仪器 优一�4 Ι 高效液相色谱仪 , 包括 Κ2) Δ Λ 2/ 检测器 6日本岛津公司9 : Ι=− .7 电子天平6瑞士梅特勒托利多仪器有 限公司9。 Μ� 4� 大孔吸附树脂6天津骨胶厂 9。 � , − 试药 抽皮昔对照品6中国药品生物制品检定所 , 批号 ? ++ 4’≅ −− Δ− 44 �44 9 : 四磨汤口服液6湖南中达鹜马制药有限公司 , 批号 ?−44 ≅ �44 . 9 : 甲醇6色谱纯 9 ,水为重蒸馏水。 − 方法与结果 − , � 色语条件 色谱柱 二!解招 �� =∗ +# >2 ? 6�74 ((( Ν , Α Ο , 7 阿9 :流动相 ? 甲醇一水6�≅ ? Α� 9 :流速 ? 4 , Α ΒΧ · 而(Δ+ :检测波 长 ? −− Α ( Β :柱温 ?室温 。 − , − 对照品溶液制备 精密称取抽皮昔对照品 巧 , 4− Β Π 置 7 4 ΒΧ 量瓶中 ,加甲醇适量 , 超声波溶解 ,加甲醇稀释至刻度 ,搅 匀 ,使成浓度为。, � 叱 , ΒΧ 一 ‘的溶液作为对照品溶液 。 − , � 供试品溶液的制备 精密量取四磨汤 口服液 �4 ΒΧ , 置 Μ� 4� 大孔吸附树脂柱6内径 − Θ Β , 树脂高度 �4 。Β 9上 , 以水 −689 Β Χ洗脱 ,弃去水洗液 ,再用 ≅4 Φ 乙醇 �74 ΒΧ 洗脱 , 收集洗 脱液置水浴上蒸干 ,残渣加甲醇使溶解 , 移至 74 ΒΧ 量瓶中 ,加 甲醇稀释至刻度 ,摇匀 :再精密量取 Ρ ΒΧ 置 −7 ΒΧ 量瓶中, 加 甲醇稀释至刻度 ,摇匀 , 滤过 ,作供试品溶液。 − , 阴性样品溶液的制备 按处方量称取除积壳外的其余几 味药, 依制剂工艺制备成阴性药品溶液 ,按 “− , � ”项下方法制备 成阴性样品溶液 。 − , 7 空白干扰试验 分别精密吸取对照品溶液 、供试品溶液 及阴性样品溶液各 �4 汕 ,在上述色谱条件下进行分析 ,色 谱图 ,结果阴性样品溶液对袖皮昔的测定无干扰 , 而且抽皮昔 Γ收稿日期ϑ −689 .扬一�− 〔作者简介ϑ 刘 戎 6�5 Α� 一 9 ,女 , 湖北人 , 主管药师 , 从事中草药 成分研究工作 。 电话 ? 64 9� � .≅ − 45 �Α ≅ ≅ 。 〔通讯作者 ϑ 运 委 6�57Α 一 9 , 女 , 主管药师。 电话 ? 4� ≅ Δ Α − . �7 �5 , Σ 一Β 山+? ;0( Τ ∀ ∋+ + + Υ � Α � , ∀ ∗ Β 。 与其他组分分离良好 ,方法可行。 − , ‘ 线性 关 系考察 精密吸取袖皮昔对照 品储备液 64 , �44 ΒΠ · ΒΧ ” 9用甲醇稀释成 �− , 4− , �Α , 47 ,印 , 4. , . , �� , �4 . , �. , �−4 , −4 哪 · ΒΧ 一 ‘的系列溶液 , 各取 �4 卜Χ 进样 , 记录色 谱图。 线性回归方程为 ς 二 − 7. � .−Α , � 8 Ω − 7 ≅ 5 , − , Ε Ξ 4 , 555 . 6( Ξ Α9 。 表明进样量在 4 , �−4 − 一 � , −4 − 4 此 范围内与 峰面积线性关系良好 。 − , ≅ 精密度试验 取质量浓度为印 , 4. 此 · ΒΧ 一, 的对照品溶 液 �4 泌 注人液相色谱仪 ,在同一条件下重复进样 Α 次 。 结果 袖皮昔峰面积积分值的月7刀为 � , ≅ Φ ,表明精密度良好。 − , . 回收率试验 分别取6�− , 4− 陀 · ΒΧ ” 9抽皮昔对照品储 备液 4 , ≅4 , � , 74 , � , 74 ΒΧ 分别置蒸发皿中 , 自然挥干后 , 各加人 已知抽皮昔浓度6≅54 此 · Β+, , , 9的供试品 �4 , 。毗 ,超声使残 渣溶液后 ,再将溶液定量移人 Μ� 4� 大孔树脂柱上 , 按“ − , � ”项 下方法制备供试品溶液 ,依法同时平行测定 − 份 ,结果见表 � 。 表 � 抽皮普加样回收率试验结果 ( 二 Α 加人量Ψ 样品含量Ψ 测得量Ψ 回收率Ψ Φ 平均回收 率Ψ Φ 尺边Ψ Φ �−Α7547 4744−44�5.5.5555一�Α,‘,二 4 吐�一月,月峙弓�,‘矛 !∀#一 乙 ∃∃飞�% &产 ∃飞� 砚∋二∀∋盆∀∋二心∋几 鳖() ∗+ (( ∃ ,, %+ ∋ − .∗ ∋ − .∃ + + % % ./ / . ∋ ( ∃以∗∃) 加加,∗ )�.∋0∋.飞�内」 , ∋ , 德定性试验 取同一供试品溶液 ,分别放置 , , , ∃ , ( , 1 2 , 在各时间点精密吸取 . 泌 注人液相色谱仪中测定 。 结果峰 面积的人)刀 3/ ∋ ) 4 5 # 3 ) 6 , 表明供试品溶液在 1 2 内非常稳 定 ,完全能够满足一个工作日分析工作的需要 。 , ∋ . 样品含黄测定 精密量取四磨汤 口服液 . ∋ 7 8 照 “, ∋ ∗ ”项下制备供试品溶液 , 分别取供试品溶液与对照品溶液 各. 卜8 , 注人液相色谱仪 , 测定峰面积 , 按外标法计算含量。 结果见表 , 。 ∗ 讨论 本品在 ,, ( 和 , +∗ # 7 波长处有吸收峰 , 均可作为最大检测 波长 ,但在 ,,( #7 波长处 ,采用甲醇一水5 ∗− 9 (∗ 6作为流动相能 使抽皮昔与其他组分达到基线分离 ,故将 ,,( # 7 作为最大检测 波长。 医药导报 −689 5 年 Α 月第 −. 卷增刊 ��7 表 − 样品含, 测定结果 含量Ψ 双义万样品批号 吐一, 9 −689 ≅ �689 . 4 , ≅≅ � , � −689 ≅ �4 � � 4 , ≅ . � , Α −689 ≅ � ��4 4 , ≅ Α � , −689 ≅ �−4 . 4 , ≅ � , − −侧刀 �− �− 4 , ≅ . � , − 袖皮昔为黄酮昔类选用 ≅4 Φ 乙醇溶液洗脱 , 加样回收率实 验表明 ?≅ 4 Φ 乙醇溶液 �74 Β Χ能将袖皮昔完全洗脱 , 柱中无残 留。 该法操作较为简单 ,精密度高 ,重复性好 , 可作为控制该制 剂质量的方法之一。 【44 �ϑ �4 , � .≅ 4Ψ ”#Ζ , −68 刃 , 4Α 增 , 44 Α 〔参考文献ϑ 【+ϑ 梁远园 , 冯 彪 , 等, !1Χ> 法浏定权实药材中橙皮昔与袖皮昔的 含量 Γ 3ϑ , 中药祈药与临床药理 , , −峨洲拓 , �≅ 65 9 ? � 7 5 一 � Α � , 【−〕 黄爱华 , 陈海丰 , 不同规格积实中抽皮昔的含量考察【3ϑ , 中药断 药与临床药理 , −仪犯 , �5 6− 9 ? ��4 一 �� � , 【� ϑ 袁蔼芝 , 王敏娟 , 高效液相色谱法测定清润滋阴液中抽皮昔的含 量Γ 3ϑ , 中成药 , � 55 ≅ , �5 6− 9 ? � � , 高效液相色谱法测定安宫牛黄散桅子昔的含量 雷小光‘ , 陈 荣− , 凌建国− ,何成章‘,钟小斌, 6� , 广西医科大学第一附属医院 , 南宁 7� 689 − � :− , 广西医科大学制药厂 , 南宁 7� 689 − � 9 【摘 要〕 目的 建立高效液相色语 6!1优 9法测定安宫牛黄散 中桅子普的含量。 方法 采用 [ Ε∗ Β ∴Ρ ∋+ >2, 柱 6−7 4 Ο Ν , Α Ο , 7 阿9 , 甲醉刁 , 4− Β∗ + · Χ ,碑酸二氮钾溶液6�4 ? ≅4 9为流动相 ,检浏波长为 − 4 (Β 。 结果 桅子普 浓度线性范围为 4 , . 一 �− , 4 此 · ΒΧ 一‘ , 峰面积与药物浓度之间存在良好的线性关系6: 二 4 , 555 . 9 , 精密度实验 日内 Η /刀落 � , .Α Φ , 日间 月7。‘ � , 5 .Φ , 平均回收率为 �44 , −. Φ 。 结论 所建立的 !卫Χ> 法专属性强 、操作简便 、结果准确 , 能 够准确快速浏定安宫牛黄散中桅子普的含童 , 可用于安宫牛黄散的质量控制 。 〔关健词〕 安宫牛黄散 : 色讲法 , 高效液相 :桅子普 :含童浏定 Γ中圈分类号 ϑ Η− .Α 田, −≅ , − Γ文献标识码ϑ Ι %文章编号 ϑ +以”价7 �6−以拍9肠增刁 �� 7孤 安宫牛黄散源自清代吴鞠通《温病条辨》, 由牛黄 、秦香、水 牛角浓缩粉、黄连、黄芬 、桅子 、朱砂 、珍珠、冰片、雄黄 、郁金等药 味组成 。 安宫牛黄丸以牛黄和秦香为君 , 牛黄味苦 、甘 , 性凉, 气 味芳香 ,具有清心 ,豁痰 、开窍 、凉肝 , 息风解毒的功能 :秦香所具 有的芳香走窜之性为诸多开窍药之首 ,与牛黄相配合 ,突出了安 宫牛黄丸清热解毒 ,芳香开窍的特点。 方中水牛角浓缩粉 、黄连、 黄荃、桅子为臣药 ,辅助君药 ,加强清热泄火 ,凉血解毒的功能 ,突 出本方清热解毒,镇惊开窍的主要功能 。 安宫牛黄丸以朱砂、珍 珠、冰片、雄黄、郁金为佐药 ,扶佐君药加强镇心 、定惊 、安神之功。 临床上多用于热病高热烦躁 ,神晕澹语 ,卒中昏迷及脑炎、脑膜 炎、中毒性脑病 、脑出血、败血症等〔’,]ϑ 。 方中主药成分桅子有泻 火除烦 、清热利尿 、凉血解毒等功效 , 主要成分为桅子昔 ,但关于 安宫牛黄散的质量标准 , 6中华人民共和国药典》−689 7 年版仅对 胆酸、庸香酮等进行质量控制 ,但未对桅子昔含量进行控制 Γ−」。 笔者对本实验中旨在建立一种安全 、可靠 、便捷的安宫牛黄散的 桅子昔含量测定方法 ,并对所建立的高效液相色谱6!ΕΧ>9法进 行 , 为对安宫牛黄散的质量标准研究提供新依据。 � 仪器与试药 � , � 仪器 日本岛津 /⊥∋ Β∴ #Ρ 0 高效液相色谱仪 6Ρ1 Μ 一�4 Ι 紫 〔收稿日期� − 44 .扬伪 〔作者简介〕 雷小光 6�5Α � 一 9 , 男 , 陕西澄城人 , 主管药师 , 硕士 , 从事药物制剂研究及药物经济学教研工作。 电话 ? 64 9 �� 74≅ ≅ �� 5 �4 , Σ Δ Β 山+ ? +∀议夕仪犯 Υ �Α � , Ο 。 外检测器9 : ΙΣ_ 689 一/ 电子天平 6瑞士 &Σ ⎯⎯ΧΣΗ 公司 9 : [α Δ Ρ∗∗ β 超声波清洗器6昆山市超声波清洗器有限公司 9。 � , − 药品与试剂 桅子昔对照品6中国生物制品检定所 , 批 号 ? ( ∴≅ 5 Δ− 加�44 9 :安宫牛黄散6三普药业股份有限公司 ,批号 −68 ;≅ 4Α �4 , −689 ≅ 4Α �− , −以;≅ 4Α � 9 : 甲醇6色谱纯 , 天津市科密欧化 学试剂开发中心9 :磷酸二氢钾6分析纯 , 成都东金化学试剂有 限公司9 :其他试剂均为分析纯 。 − 方法与结果 − , � 供试液的制备 − , � , � 对照品溶液的制备 精密称取桅子昔对照品适量 , 置 +∗∗ ΒΧ 量瓶中, 加甲醇溶解并定容至刻度 , 摇匀 ,制成浓度为 �− 阿 · ΒΧ 一的对照品溶液 。 − , � , − 安宫牛黄散处方组成与制备方法 安宫牛黄散处方组 成包括水牛角浓缩粉 − 44 5 ,察香 、冰片各 −7 5 ,珍珠 74 5 , 牛黄 、 朱砂、雄黄 、黄连 、黄荃 、桅子 、郁金各 �44 5 。 分别将珍珠水飞或 粉碎成极细粉 , 朱砂 、雄黄分别水飞成极细粉 :黄连 、黄荃 、桅 子 、郁金香粉碎成细粉 :将牛黄 、水牛角浓缩粉 、庸香 、冰片研 细 ,与上述粉末配研 ,过筛 ,混匀 , 即得 。 − , � , � 供试 品溶液 的制备 取安宫牛黄散适量 , 研磨 , 取 − , 4 5 ,精密称定 ,置于 74 ΒΧ 量瓶中 ,加甲醇 74 ΒΧ , 称重 。 超声 �4 而 (放至室温过滤 , 取续滤液 Ρ ΒΧ 置于蒸发皿中 ,水浴蒸干 , 残渣用甲醇 一水6+ ? +9 溶解并通过氧化铝柱67 5 9 , 洗脱液收集 于 −7 Β Χ 量瓶至刻度 , 进样前用孔径 4 , 7 卜Β 微孔滤膜滤