胰酶配方

对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin) 配方：100ml PBS,0.25g胰酶 步骤：1先配 100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于 1000ml蒸馏水) 2 称胰酶 0.25g 3 加入 PBS中，低速搅拌 〈4h冰浴中,或者 4℃过夜 低速搅拌 0.5h冰浴中 4 调 PH7.4 5 仍在冰浴中 6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完 tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫， 酶就变性了。低温，防止酶失活 对难消化的细胞：在上述配方中，加入 0.02g的 EDTA(0.02%) tip:因为 EDTA可以络合 Ca2+，增加消化效力