2.2.1动物细胞培养和核移植技术

nullnull动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体回忆：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养, 植物体细胞杂交动物细胞培养基础一、动物细胞培养一、动物细胞培养1、概念： 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 null动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代 细胞部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代动物细胞培养不能 最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2、过程动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程1）用什么方法把组织分散成单个细胞？用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间2）这说明细胞间的物质成分主要是什么？蛋白质3）用胃蛋白酶处理可以吗？为什么？细胞膜的成分中也有蛋白质，用蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？4）培养时细胞的特性4）培养时细胞的特性细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上的现象， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。null5）如何界定原代培养和传代培养、细胞株和细胞系？遗传物质改变3、动物细胞培养条件：3、动物细胞培养条件：1、无菌、无毒的环境 （灭菌，添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5±0.5度 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2 （95%空气和5% CO2 ）保证细胞顺利的生长增殖杀死一些细菌，不伤害动物细胞null细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较4、动物细胞培养应用4、动物细胞培养应用大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 二、动物体细胞核移植技术:二、动物体细胞核移植技术: 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植（难度高）受体细胞：MⅡ期的 卵母细胞null细胞质细胞核细胞核移植多莉羊的培育过程null（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期去核的卵母细胞供体细胞注入去核卵母细胞受体细胞激活，完成减数分裂、发育胚胎移植nullP491、为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质几乎全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞核，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的细胞核去掉或将其破坏。2、10代以内的细胞一般能保持正常二倍体核型，为了保证供体细胞正常的遗传基础。3.不是。核外还有少量的DNA（线粒体DNA）null体细胞核移植技术的应用前景 畜牧业、医药卫生以及其他领域有着广泛应用前景 1、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种，增加动物 的存活数量 3、可作为生物反应器，生产医用蛋白 4、克隆动物细胞、组织、器官可作为移植的供体 5、了解胚胎发育及衰老过程、做疾病模型等体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题胚胎移植－动物幼体产出 概率＜10％ 克隆技术的各个环节有待进一步改进 克隆动物存在着健康问题 克隆动物的食品安全性问题存在争议 P50 思考与探究