机能实验学实验设计—丁酸和谷氨酸对小鼠胃肠运动的影响的比较

丁酸和谷氨酸对小鼠胃肠运动的影响的比较 丁酸和谷氨酸对小鼠胃肠运动的影响的比较 【实验目的】 酸奶是日常生活中常见的促进消化的食物。现探究除了乳酸菌之外酸奶中其他成分对对胃肠运动的影响。酸奶与其他食物显著的区别是酸奶中含有大量的短链脂肪酸和氨基酸，所以探究短链脂肪酸和氨基酸对胃肠运动的影响。以丁酸作为短链脂肪酸的代表，以谷氨酸作为氨基酸的代表。 【实验原理】 用胃残留率反映胃排空的速度以此来衡量胃的运动，用小肠推进率来衡量小肠的运动。 实验中采用炭末推进法，将炭末混进给小鼠灌胃的营养性半固体糊中，可以清晰的量出食物在小肠中的推进距离，将幽门和贲门结扎取出胃可以得出残留在胃中的食物的量。方法简易易于操作。 【实验器材和药品】 常规哺乳类手术器械，硬质灌胃管，3%丁酸，3%谷氨酸，羧甲基纤维素钠，奶粉，糖，淀粉，活性炭末，蒸馏水。 【实验对象】 小鼠 【实验步骤和方法】 1.营养性半固糊的制备。取5 g羧甲基纤维素钠，溶于120 ml蒸馏水中，分别加入8 g奶粉，4 g糖，4 g 淀粉和1 g活性炭末，搅拌均匀。配制成150 ml，约150 g的黑色半固体糊状物。冰箱冷藏，用时恢复至室温。 2.取小鼠30只，雌雄各半，体重18-22g，实验前禁食12-16h，自由饮水。 3.实验动物标记。用棉签蘸取3%-5%苦味酸（黄色）溶液涂于其中10只腰背部（5雌5雄），用2%硝酸银（咖啡色）溶液标记10只（5雌5雄），用0.5%中品红（红色）标记剩下10只，黄色代表丁酸组，红色代表谷氨酸组，咖啡色代表对照组。 4.半固体药物灌胃。取各组小鼠，每只灌胃给予半固体糊0.8ml每只。灌胃方法：左手捏持或者抓住动物的头，颈部皮肤，使动物腹部朝向术者，右手将连接注射器的硬质灌胃管由口角处插入口腔，用灌胃管将动物的头部稍向后压迫，使口腔与食管成一条直线。将灌胃管由上腭轻轻插入食管，插入深度约为3cm。插入时应注意动物的反应，如插入顺利，动物安静，呼吸正常，可注入药物，如动物挣扎剧烈或插入有阻力，应拔出胃管重插。 5.20min后，丁酸组灌3%丁酸0.5 ml，谷氨酸组灌3%谷氨酸0.5 ml。对照组灌蒸馏水0.5 ml。 6. 40min后脱颈处死。处死的小鼠腹腔剖开，将幽门和贲门结扎取出胃，用滤纸拭干称重。然后沿胃大弯剪开为体，洗去胃内容物拭干称净重。计算胃残留率(%)=［(胃全重－胃净重)/半固体糊重］×100%。 7. 将自盲肠处取出的肠，不加牵引铺平于白纸上，分别量取自幽门括约肌至炭糊最前端及至盲肠的距离。计算小肠推进率(%)=炭糊移动距离/幽盲全长 ×100%。 8.计算并完成下表。 表1：丁酸组 号数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均 胃残留率 小肠推进率 表2：谷氨酸组 号数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均 胃残留率 小肠推进率 表3：对照组 号数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均 胃残留率 小肠推进率 【观察项目】 将丁酸组谷氨酸组和对照组的平均胃残留率和小肠推进率进行比较。 【预期结果及分析】 1.​ 结果1：丁酸组的平均胃残留率明显小于对照组，小肠推进率明显大于对照组。 分析：丁酸能刺激胃体胃底化学机械感受器通过迷走—迷走反射和内在神经丛刺激胃腺分泌胃液。丁酸可以直接作用于G细胞，促进胃泌素释放而引起胃液分泌。丁酸在小肠内能刺激小肠粘膜分泌胃泌素，胆囊收缩素，肠泌酸素，它们能刺激胃腺分泌胃液。胃酸可以促进胃体和胃窦的收缩促进胃排空。胃泌素和缩胆囊素可以促进小肠运动。 2. 结果2：谷氨酸组的平均胃残留率明显小于对照组，小肠推进率明显大于对照组。 分析：谷氨酸能刺激胃体胃底化学机械感受器通过迷走—迷走反射和内在神经丛刺激胃腺分泌胃液。谷氨酸可以直接作用于G细胞，促进胃泌素释放而引起胃液分泌。谷氨酸在小肠内能刺激小肠粘膜分泌胃泌素，胆囊收缩素，肠泌酸素，它们能刺激胃腺分泌胃液。胃酸可以促进胃体和胃窦的收缩促进胃排空。胃泌素和缩胆囊素可以促进小肠运动。 3. 结果3：谷氨酸组的平均胃残留率小于丁酸组，小肠推进率大于丁酸组。 分析：食物中的化学成分可以直接作用于G细胞，促进胃泌素释放而引起胃液分泌。谷氨酸作为蛋白质消化产物的一种起作用远大于丁酸。谷氨酸在对胃体胃底化学感受器的刺激上也大于丁酸。 【实验结论】 酸奶中异于其它食品的成分氨基酸和短链脂肪酸对胃肠运动有显著的促进作用。 【参考文献】 1.张媛，王建，王琼，龚雪，付勇，黄连与附子对小鼠胃肠运动的影响，中国论文下载中心  2. 酸奶营养成分表，中国食品产业网 3.胡还忠，医学机能实验教程（第二版） 4.朱大年，生理学（第七版）