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香菇多糖的提取

2019-02-25 3页 doc 16KB 73阅读

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香菇多糖的提取香菇多糖的提取 原理 从菌丝体中,利用它在酒精和水,及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌丝体抽提、浓缩、离心,取上清液脱色透析,透析液再浓缩、离心,最后用溶液沉淀、洗涤干燥而成。 无论何种提取法,其主要步骤基本相同: 预处理→浸提(多糖与细胞分离)→过滤→浓缩→醇析→干燥→粗多糖 2.1 热水浸提法 这是最早采用的一种传统方法:香菇多糖溶于水,热水浸提时,香菇组织细胞膨胀破裂,多糖成分浸出。 热水浸提香菇多糖,浸提时的料液比、温度、时间、pH、醇析时的乙醇添加倍数及提取次数是影响多糖得率的主要因素。 对料液比而言,若加水太...
香菇多糖的提取
香菇多糖的提取 原理 从菌丝体中,利用它在酒精和水,及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌丝体抽提、浓缩、离心,取上清液脱色透析,透析液再浓缩、离心,最后用溶液沉淀、洗涤干燥而成。 无论何种提取法,其主要步骤基本相同: 预处理→浸提(多糖与细胞分离)→过滤→浓缩→醇析→干燥→粗多糖 2.1 热水浸提法 这是最早采用的一种传统方法:香菇多糖溶于水,热水浸提时,香菇组织细胞膨胀破裂,多糖成分浸出。 热水浸提香菇多糖,浸提时的料液比、温度、时间、pH、醇析时的乙醇添加倍数及提取次数是影响多糖得率的主要因素。 对料液比而言,若加水太少,提取不彻底;加水太多,容易降低提取液的固形物含量,不利于以后的分离,且加重了工业生产中的后续工艺,一般为1:20左右。对温度来说,随着提取温度的升高,粗多糖得率逐渐升高,在80% 一95%时达到高峰,再提高温度时,粗多糖得率升高趋势趋于平缓,考虑到高温会破坏多糖的结构,影响其生物活性,同时高温提取对工业化生产的设备更严格。所以,提取温度一般以80℃ 一95℃为宜。 随着提取时间的延长,粗多糖得率逐渐增加,0.5h一3h之间趋势明显,继续延长提取时间,多糖得率加趋势逐渐趋于平缓,一般浸提时间为8h一12h。 热水浸提时的pH为自然pH值,大约在6—8之间。 而对醇析时提取液的乙醇浓度来说,随着其逐渐升高,多糖得率亦逐渐增加,但乙醇浓度达到75%后再继续添加乙醇,对粗多糖得率的影响不大,所以提取液的乙醇浓度最好不超过75% 。 当然,提取次数对多糖得率也有一定的影响,多糖得率随着提取次数的增加而增加,但提取次数超过2次后,多糖得率增加缓慢,趋于平缓。我们通常可以确定2次提取为比较适宜的提取次数 [5] 总的来说,热水浸提法的最佳提取条件由具体的实验环境而定,一般可根据正交实验确定。应注意几点:(1)浸提过程必须充分,这是前提。(2)浸提后过滤时应尽量趁热过滤,否则温度降低,物质问的黏度增大,过滤时间增长。(3)浓缩过程受仪器影响较大。一般旋转蒸发仪是一种较好的浓缩装置。 制作曲线 采用苯酚——硫酸法,以葡萄糖果为标准物 称取苯酚固体6g,用适量蒸馏水溶解,有100ml的容量瓶定容,倒出,放置于冰箱中避光贮存。 准确称葡萄糖20mg,于500ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8ml,各加蒸馏水至2.0ml;然后假如6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,静置10min后,于490nm测吸光度,以2.0ml蒸馏水按同样显色操作作为空白,横坐标为多糖体积,纵坐标为吸光度值,得标准曲线。 1葡萄糖标准液的标准曲线  葡萄糖标准液用量 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 吸光度 0.054 0.061 0.067 1.083 0.107 0.130 0.135 0.178                   根据表1的数据,用最小二乘法线性回归方程,可以求出标准曲线的方程:Y=2.15922619A+0.006869047 式中Y:浓度,g/L;A:吸光度。 香菇多糖的含量测定 精确称取香菇粗多糖5mg,加少量热蒸馏水溶解后,冷却、移至100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,精确吸取1.0ml(相当于40ug左右的多糖)按上述步骤操作,测吸光度,根据标准曲线方程式,计算多糖含量。
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