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免疫SOP免疫54乙肝前S1抗原的检测

2018-09-06 2页 doc 25KB 7阅读

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免疫SOP免疫54乙肝前S1抗原的检测 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号: DGCPH-IMN-SOP-01-54 乙肝前S1抗原的检测 版序:2005-1 页码:第1 页,共2 页 前言:    乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗料上。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面起有十分重要作用。   乙肝病毒前S1抗原酶免测定试剂盒的正式推向临床以及近两年在北京、四川、浙江、河南、深圳、海南等近百家医...
免疫SOP免疫54乙肝前S1抗原的检测
东莞常平医院 免疫实验室 文件编号: DGCPH-IMN-SOP-01-54 乙肝前S1抗原的检测 版序:2005-1 页码:第1 页,共2 页 前言:    乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗料上。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面起有十分重要作用。   乙肝病毒前S1抗原酶免测定试剂盒的正式推向临床以及近两年在北京、四川、浙江、河南、深圳、海南等近百家医院与乙肝“两对半”检测的联合应用,充分显示了该试剂在病毒性乙型肝炎的临床诊断,指导治疗等方面的重要价值。前S1抗原(Pre-S1Ag)检测是对乙肝“两对半”尤其是e抗原和HBV-DNA测定的重要补充和加强。   前S1抗原与HBV-DNA检出率两者符合,前S1抗原仅在HBV-DNA阳性血清中检出。前S1蛋白随HBeAg消失而消失,且与阴转时间呈正相关,这样,前S1抗原可作为病毒清除与病毒转阴的指标。前S1抗原阳性的乙型肝炎患者传播乙型肝炎病毒比前S1抗原阴性和无症状HbsAg携带者的危险性更大,因而说明前S1抗原可反映乙型肝炎病毒复制和传染性的指标。如果前S1抗原持续阳性,指示AHB向慢性转变。比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、和HBsAg阳性的患者血清中前S1蛋白,前S1抗原阴转愈早,AHB患者的疗程愈短,预后也愈好。说明前S1抗原及其抗体的检测是急性乙型肝炎的临床诊断,疗效观察和判数据预后的良好指标。 前S1抗原的检测   由上海阿尔法生物技术有限公司生产的乙型肝炎病毒前S1抗原酶免诊断试剂盒采用ELISA双抗体夹心法,测定前S1抗原肽,最低检测浓度为0.1ug/L。    检测原理   采用双抗体夹心ELISA法,用抗-PreS1和抗HBs作为固相化抗体和酶标抗体,如果标本中存在乙肝病毒PreS1抗原,则形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,加入TMB底物产生显色反应,反之则无显色反应。适用于血浆和血清类标本。 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号: DGCPH-IMN-SOP-01-54 乙肝前S1抗原的检测 版序:2005-1 页码:第2 页,共2 页 试剂盒组成   微孔板、阴性对照、阳性对照、酶结合物、显色液A、显色液B、终止液、洗涤液。   操作步骤   1.反应孔内加入待测标本50ul,设阴、阳性对照各2孔,每孔加入阴、阳性对照各50ul,并设空白对照1孔,置37℃孵育30min。   2.洗板   3.每孔加入酶结合物1滴或50ul(空白对照孔除外),置37℃孵育30min。   4.洗板   5.加入显色液A、B各一滴,充分混匀后,置37℃孵育15min。   6.加入终止液、混匀。   7.酶标仪读数。   结果判断   1.所有阴性对照、阳性对照和标本的读数值减去空白对照读数即为计算值。2.阳性对照读数必须比阴性对照读数大0.300。实验结果成立。   3.结果判断:临界值(CUTOFF)=2.1*阴性对照平均OD值。   测试标本的计算值大于或等于临界值为阳性。   测试标本的计算值小于临界值为阴性。   注意事项   1.使用前试剂盒应预先在室温下平衡30min。   2.试剂盒启用后应尽快用完。   3.不同批次的试剂组份不能混用。   4.使用本试剂盒应视为有传染性物质。   5.温育反应板温度和时间必须严格控制。   6.阳性对照仅用于判读试剂盒内的包被微孔板和酶是否有效,不是临界值的 标志。   7.反应终止后,请在10min内判读结果。   8.封片纸不能重复使用。
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