洛索洛芬钠缓释片体外释放特性研究
?
490?HeraldofMedicineVo1.26No.5May2007
6.885和11.501min,整个分析流程约12.5min.
2.5线性范围在空白血清中加入上述
贮备液,配制成
浓度分别为PB4.10,10.25,2O.5O,3O.75,41.00,51.25,
61.5Og?mL,,CBZ1.22,3.02,6.10,9.15,12.20,15.25,
18.3Og?mL”的对照品血清,经处理后进样.将对照品与内
标峰面积比(y)与其对应的对照品浓度()进行线性回归,得
直线回归方程.PB:Y=3.918072X+1.903395,r=0.9998;
CBZ:Y=9.562999X一1.62036,r=0.9998.结果表明,血清
中PB在4.10,61.5Og?mL,,CBZ在1.22—18.3Og?mL
浓度范围内线性良好.
2.6最低
浓度取低质控血样(含PB4.10g?mL”,
CBZ1.22g?mL)100,按”2.3”项下步骤操作,进样1O
,以信噪比5:1衡量,PB的最低检测浓度为0.23g?mL,,
CBZ为0.79g?mL,.
2.7系统适应性试验按上述色谱条件,测定低质控血样,其
理论塔板数以PB峰计算不低于3000.
2.8精密度与准确度为考察批内精密度和批间精密度,取
对照品适量,配制高,中,低浓度质控血清进行多批次(n=5)测
定,每一批次包含一条标准曲线和高,中,低浓度质控血样各5
个,结果见表1.
表1PB和CBZ的批内,批间精密度和回收率
2.9绝对回收率实验取上述高,中,低浓度质控血样各5份,
经”2.3”项预处理后,进样1O,计算高,中,低浓度质控血样
的对照品和内标峰面积比的均值(A.);配制浓度与高,中,低浓
度质控血样浓度相同的对照品乙腈溶液,经”2.3”项预处理后,
进样1O,每种浓度进样3次,计算各浓度的对照品和内标峰
面积比的均值(A);计算每个对照品A./A比值的百分数即为
各对照品的绝对回收率.结果PB,CBZ和氯唑沙宗的绝对回收
率分别是100.13%,99.63%,98.48%.
3讨论
3.1流动相的选择文献[2]报道流动相多采用甲醇一缓冲
液,但缓冲液对泵,进样器和分析柱的损害很大,且分析完毕后
须对色谱柱进行复杂的冲洗.以乙腈:甲醇:水为流动相,干
扰小,灵敏度大,且无缓冲液作流动相的缺点,适于常规应用.
另外本法在摸索条件时发现流动相的比例十分关键,乙腈:甲
醇:水(13:25:62)时即得到完全分离且分析周期短.
3.2内标的选择文献[4,6]报道同时测定该两种药物血药
浓度的方法,多采用同类药物作内标或互为内标,这局限了方
法的应用.在本色谱图上PB保留时间最短,为4.186min,CBZ
最后出峰,保留时间为11.501min,内标氯唑沙宗保留时间居
中,为6.885min,内标峰位于两个被监测药物峰之间,且各色谱
峰间有满意的分离度,有利于用内标法定量.既保证了血清内
源性物质不干扰药物的测定,又能在较短的时间内完成一个血
样的色谱分析.且该内标物性质稳定,价廉易得.
3.3血样量临床上可供分析的血样量非常有限,本实验考
察了不同取血量的实验结果,发现血清量为100时即完全满
足分析要求,且对各药的最低检测浓度也远低于其治疗浓度,
所以有足够的灵敏度用于临床TDM.
3.4血样预处理方法生物样品的预处理方法主要有提取法
和沉淀法,鉴于提取法操作繁琐,费时,本法采用蛋白沉淀法.
蛋白沉淀法中常用的有机溶剂为甲醇和乙腈,本实验考察了甲
醇和乙腈对蛋白的沉淀效果.结果表明,甲醇对蛋白的沉淀效
果较差且用量较大,沉淀细碎松散,不易分离;而以乙腈为蛋白
沉淀剂,效果较好,得絮状沉淀易于分离上清液,故选择乙腈作
为蛋白沉淀剂,且乙腈作为蛋白沉淀剂的最佳比例为4:1,符
合相关文献[3]报道.
【参考文献]
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妥,苯妥英,卡马西平的浓度[J].复旦学报,2003,30(1):71.
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抗癫疴药物血药浓度[J].中国现代应用药学杂志,2004,21(4):
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[3]焦正,钟明康,施孝金,等.HPLC法同时测定人血清中卡马西
平,环氧化卡马西平和苯妥英[J].药物分析杂志,2002,22(6):
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[5]王增寿,朱光辉,李光乾,等,高效液相法测定血清中苯巴比妥,苯
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[6]余勤,梁茂植,赵焱,等.RP.HPLC同时测定血浆中苯巴比
妥,苯妥英,卡马西平和氢化可的松的浓度[J].华西药学杂志,
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洛索洛芬钠缓释片体外释放特性研究
王秀萍,陈斌
(华中科技大学同济医学院附属梨园医院药剂科,武汉430077)
[摘要]目的对洛索洛芬钠缓释片体外释放特性进行研究.方法采用高效液相色谱法进
45-’~,1定,色谱柱为
医药导报2007年5月第26卷第5期?49l?
c,E柱,流动相为甲醇:水:冰醋酸:三乙胺(6oo:400:l:1),检测波长为222llm.结果在
5—100lag?mL.浓度范
围内,峰面积对浓度有良好的线性关系,日内RSD?1.37%,日问RSD?1.70%,回收率为99.93%.
洛索洛芬钠缓释片
体外释放符合Weibul1分布函数:LnLn[1(1-)]=0.3857Lnt-1.7214(r=0,9939).结论该方法准确,
重现性好,
洛索洛芬钠缓释片具有明显的体外12h缓释作用.
[关键词】洛索洛芬钠;缓释片;释放度;高效液相色谱法
【中图分类号】11931.6【文献标识码】A【文章编号】1004-0781(2007)05490433
洛索洛芬钠(1oxoprofensodium)为苯丙酸类非甾体抗炎药,
由日本三共株式会社合成,开发并于1986年获准上市,该药具
有优良的镇痛抗炎作用,且镇痛作用强,抗炎解热作用和其他
同类药相似,对慢性炎症活性较弱.洛索洛芬钠用于慢性关节
炎,变形性关节炎,腰痛,肩周炎,颈肩综合征及手术拔牙后的
镇痛和消炎,具有较好的临床疗效.洛索洛芬钠片的现有规格
是每片60nag,rid,每次1片,不良反应的发生率为8.76%It,2].
笔者自制了以HPNC作为骨架材料的缓释片,每片9omg,体外
释药时间达到12h,每天给药2次,以期减少给药次数,降低不
良反应.笔者在本实验中对所制备的洛索洛芬钠缓释片的体
外释放特性进行了测定.
1仪器与试药
Aglinetl100高效液相色谱仪(美国Aglinet公司);Sepu-
3000色谱工作站(杭州惠普科学仪器仪表有限公司);电子天平
(上海精密科学仪器有限公司);ZtlS-SG智能溶出实验仪(天津
大学无线电厂).
洛索洛芬钠对照品(中国药品生物制品检定所,批号:
20051024),洛索洛芬钠骨架型缓释片(自制,每片9omg,批号:
050817),甲醇(天津市标准科技有限公司,色谱纯),冰醋酸(天
津市北方化玻购销中心),三乙胺(天津市精宇精细化工厂),其
他试剂均为分析纯.
2方法与结果
2.1检测波长的选择取洛索洛芬钠对照品适量,配制适宜
浓度的洛索洛芬钠水溶液.以水为空白,按紫外分光光度法在
200—40011113波长范围内进行紫外扫描,记录紫外吸收光谱.
结果表明洛索洛芬钠在222lrlm波长处有最大吸收,空白辅料在
此处吸收很小,故选择222nm为测定波长.
2.2色谱条件色谱柱:Eul~pher-100Cl8柱(250mm×4.6
rl’llTl,5m);Cl8保护柱(25mm×4.6rl’llTl,10m);流动相:
甲醇:水:冰醋酸:三乙胺(6OO:400:1:1);检测波长:222
lrlm;柱温:25?;进样量:20L;流速:1.0mL?rain...
2.3系统适用性实验在上述色谱条件下,洛索洛芬钠的保
留时间为7.9min,辅料在此处无干扰;洛索洛芬钠的理论塔板
数不低于3000;测得检测限为30ng?mL(S/N~3).
2.4标准曲线的绘制取干燥至恒重的洛索洛芬钠对照品约
l0mg,精密称定,置于20mL容量瓶中,以纯化水溶解定容,配
成浓度约0.5mg?mL.的贮备液.分别精密量取贮备液0.1,
0.3,06,1.0,1.4,2.0mL置于10mL容量瓶中,以纯化水分别
[收藕日期]2006-08-21[修回日期]2006—10-20
[作者简介]王秀萍(1975一),女,湖北武汉人,主管药师,学士,
主要从事医院药学工作.电话27—62367389,E—mail:meiwaIl1666@
126.corno
稀释至浓度为5,l5,30,50,70,100?mL的溶液,各进样
20,记录峰面积,以峰面积对浓度进行线性回归,得回归方
程:A=15912C+6869(r=0.9999).结果表明:洛索洛芬钠
在浓度范围5—100g?mL内呈良好的线性相关性.
2.5精密度实验分别于日内0,3,6,12,24h连续测定浓度
为100,50,5?mL的高,中,低3个浓度的峰面积,计算日内
精密度;连续5d测定上述3个浓度的峰面积,计算Et间精密
度,具体数据见表l.结果表明该方法的日间,日内精密度良
好.
表1洛索洛芬钠精密度实验结果n=3
2.6回收率实验精密称取不同量的洛索洛芬钠标准品,加
入相应处方量辅料,按照含量测定项下方法测定,计算回收率.
结果见表2.平均回收率为99.93%,RSD=0.34%.
表2洛索洛芬钠回收事实验结果
2.7重现性实验取同一批样品,照含量测定项下方法,分别
测定6次,求得含量的RSD为1.39%.
3片剂释放度的测定J
3.1释放介质的选择参照《中华人民共和国药典》(2005年
版)二部附录XD第一法装置J,分别以pH值为6.8的磷酸盐
缓冲液,0.1mol?L盐酸,纯化水为释放介质,转速100
r?min一,温度37.c,依法操作,分别于0.5,1.0,2.0,4.0,6.0,
8.0,10.0,12.0h取样,每次5mL,以孔径0.45m的微孔滤膜
过滤,弃去初滤液,精密吸取2mL续滤液置于10mL容量瓶
中,加纯化水定容作为供试品溶液,同时补加溶出介质5mL.
照前述建立的HPLC方法,将供试品溶液各20注入高效液
相色谱仪,求得供试品溶液浓度,从而得到累积释放度,测定同
一
处方同一批缓释片中药物的释放度,以观察释放介质对药物
释放度有无影响,结果见图1.结果表明洛索洛芬钠缓释片在
以上3种释放介质中的释放行为差异无显着性(P>0.05),因
?
492?HeraldofMedicineVo1.26No.5May2007
此选择纯化水作为释放介质.
3.2释放度测定方法参照《中华人民共和国药典》(2005
年版)二部附录XD第一法装置,以900mL纯化水为溶剂,转
速为100r?min..,温度37.C,依法操作,分别于0.5,1.0,2.0,
4.0,6.0,8.0,10.0,12.0h取样,每次5mL,以孔径0.45m的
微孔滤膜过滤,弃去初滤液,精密吸取2mL续滤液置于10mL
容量瓶中,加纯化水定容作为供试品溶液,同时补加溶出介质
5mL.照前述建立的HPLC方法,将供试品溶液各20注入
高效液相色谱仪,求得供试品溶液浓度,从而得到累积释放度,
结果见表3.本实验对制备的洛索洛芬钠骨架缓释片体外释放
度要求规定为每片2,4,8h的释放量应分别为标识量的35%一
55%,55%一75%与75%以上,结果表明自制的洛索洛芬钠骨
架缓释片体外释放度均符合要求.另将累积释放度对时间进
行作图,并用方程拟合,结果见图2.释放结果符合Weibul1分
布函数:LnLn[1(1一F%)]=0.3857Lnt一1.7214(r=0.9939),
loo
墨8O
崔1560
:整
睡4o
再IS
嚓20
O
024681012
t,h
图1洛索洛芬钠骨架缓释片在3种介质中的释放曲线
一
?一纯化水,一?__o.1mol?L盐酸,一?一磷酸盐缓冲液
100
8o
60
4o
?2O
O
O24681012
tlh
图2洛索洛芬钠缓释片体外释放曲线(n=6)
表3释放度测定结果
实验号累积释放度/%
0.5hlh2h4h6h8hl0hl2h
l22.8031.6041.2062.6076.4086.30
221.7032.1041.8061.1075.5085.40
320.3031.3040.5060.0o77.3084.10
421.8030.7042.5061.3075.4087.30
520.2029.7042.9o61.6076.1085.30
622.5031.1041.6062.1077.0o86.10
均值21.5631.o941.7661.4676.2985.76
脚/%4.6l2.421.9o1.330.931.15
91.50
91.40
92.80
89.40
90.40
89.9o
96.30
97.80
98.40
97.80
95.40
97.50
9o.9o
1.25
97.20
1.05
显示该缓释片具有明显的体外12h缓释作用.
4讨论
4.1测定方法的选择洛索洛芬钠在222am波长处有最大吸
收,该波长为近紫外区,为减少辅料等因素的影响,提高测定的
准确性,笔者在本实验中采用高效液相色谱法测定洛索洛芬钠
的含量和释放度,报道了测定洛索洛芬钠的HPLC方法,该方法
准确性,重现性好.
4.2释放度测定中释放介质的选择本研究考察了洛索洛芬
钠在纯化水,0.1mol?L盐酸,pH值=6.8的磷酸盐缓冲溶液
中的溶解度.实验结果表明洛索洛芬钠在上述3种介质中均
易溶.通常释放度实验法应考虑人体内的生理条件,因胃肠道
分泌液起”水槽”作用,所以应尽量使所选择的释放介质符合
“漏槽”条件,洛索洛芬钠在以上介质中均符合”漏槽”条件,为
便于实验,本研究选用水作为释放介质.
笔者在本实验中确定了洛索洛芬钠缓释片释放度的体外
研究方法,该方法准确,重现性好.洛索洛芬钠缓释片具有明
显的体外12h缓释作用,达到设计要求.
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,l出版社,2005:附录XD.
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