猪轮状病毒感染的检测

猪轮状病毒感染的检测 52中国兽医杂志2009年(第45卷)第1O期 猪轮状病毒感染的检测 王玲,蒲万霞,孟小琴,邓海平.,崔东安,焦硕,杨志强 (1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程重点开放实验室,甘肃兰州 730046; 2.甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070;3.西北师范大学生命科学学院,甘肃 兰州730070) 中图分类号:$852.659.4文献标识码:B文章编号:0529—6005(2009)10—0052—01 猪轮状病毒(PRV)是人畜共患腹泻的重要病 原之一,也是仔猪腹泻的重要病因.仔猪轮状病 毒性腹泻在不同地区,不同时间及不同的外界条 件下,其发病频率与分布可能会有明显的差异. 目前我国轮状病毒流行和危害的特点是混合感 染,该病发病期主要在8周龄以内,症状轻重决定 于发病日龄或环境条件,与大肠杆菌所引发的白 痢和断奶前后引发的腹泻是同一时期.我国由于 饲养环境较差,人们往往认为这一时期仔猪腹泻 是大肠杆菌引发,其实猪场中的大肠杆菌绝大多 数是条件性致病菌,而轮状病毒是其发病的一个 重要诱因,所以大量使用抗生素治疗后,虽有一定 效果但仍不能完全控制病情,其原因就是忽略了 轮状病毒致病力. ELISA检测法因其特异性强,敏感性高,具有 快速,简便,所需设备简单等优点,因此适合检查大 批标本和微量标本,故世界卫生组织腹泻控制中心 将Rota—ELISA列为诊断轮状病毒性腹泻的常规检 查方法.本研究对不同地区和养殖模式的猪只进行 了猪轮状病毒抗原检测,有望为今后进一步采取针 对性的防治及相关研究提供参考依据. 1检测样品采集,统计 共计采集粪便标本218份,并对采集的样品进 行了编号,观察记录了猪只临床症状,年龄,饲养方 式,免疫情况等.太京原种猪场(美国原种)46份, 均为仔猪;中滩村27份;石佛乡3l份;东泉乡24 份,均为仔猪;跑马泉49份;玉泉乡24份;太京镇 17份.具体情况见表1.总计:218头份,仔猪t70 份,中猪48份;农户笼养109头,农户圈养63头,原 种猪场46头. 表1猪轮状病毒采样统计及检测 2样品处理,制备 将冻存的粪便标本用PBS(pH7.4)制成2O 悬液,用微型旋涡混合器混旋2min,经3000r/min 冷冻离心10min,取上清液做待检样品. 3ELISA双抗夹心法检测粪便中RV抗原 检测A群轮状病毒的双抗体夹心法ELISA试 剂由卫生部兰州生物制品研究所生产,有效期内使 用,本次试验严格按照试剂盒操作.结果判 定采用比色计数法,DNM一9602G酶标分析仪单波 长于450nm测定0D值. 收稿日期:2008—0905 基金项目:甘肃省自然科学基金项目(o71oRJZAo8o);农业部畜 禽病毒学重点开放实验室资助课题(200601—200712) 4检测结果 本次试验所采粪样来自天水市7个不同乡镇, 共计218头份,其中仔猪170份,中猪48份.共检 测出阳性50头份,阳性率为22.94%,其中仔猪检 测出阳性38头份,占仔猪的22.359,6,中猪检测出 阳性12头份,阳性率占中猪的25.00.太京美国 原种猪场(46头)检测出阳性11头份,阳性率为 23.91;从农户规模笼养(109头)检测出19头份, 阳性率为17.43,其中仔猪(86头)检测出阳性15 头份,占笼养仔猪阳性率17.44;中猪(23头)检测 出4头份,占笼养中猪阳性率的17.39;从农户圈 养(63头)检测出20头份,阳性率为31.75,其中 仔猪(38头)检测出阳性14头份,占圈养仔猪阳性 ChineseJournalofVeterinaryMedicine中国兽医杂志2009年(第45卷)第1O期53 仔猪早期断乳综合征的综合预防措施 唐伟,覃开权,何德成. (1.湖南省永州职业技术学院,湖南冷水滩425000;2.湖南省道县畜牧水产局,湖南 道县425300) 中图分类号:$858.28文献标识码:B文章编号:0529—6005(2009)10—0053一O1 仔猪断乳综合征是困扰着生猪生产的一个严重 问题.应用大肠杆菌基因工程双价失活苗和猪水肿 病多价油乳佐剂失活苗免疫接种是目前预防此病较 好的方法,为了达到更佳的效果,我们进行了k… k..苗,猪水肿病苗,恩诺沙星,口服补液盐和控制饲 料喂量(以下简称"控料")综合预防仔猪早期断乳综 合征的试验,取得了较好的预防效果. 1材料与方法 1.1试验材料仔猪腹泻基因工程双价k..,k..灭 活苗(以下简称k..,k.苗),由上海联盈基因工程有 限公司,上海松江兽医生物药品厂联合生产提供. 猪水肿病多价油乳佐剂失活苗(以下简称猪水肿病 苗),由农业部畜禽传染病学重点实验室研制. 恩诺沙星原粉,新昌国邦兽医厂(浙江)生产. 口服补液盐,自制,配方为食盐350g,氯化钾150g, 红糖和白糖2kg,常用水100mL. 基础日粮按仔猪不同时期的生长特点进行配合 全价饲料. 试验猪及试验时间试验猪选取用有仔猪断乳 收稿日期:2008—07—10 综合征(腹泻,水肿病,内毒素休克)发病史,按常规 进行其他疫苗免疫接种,预产期接近,胎次和膘情差 异不大,同一饲养员饲养,供水,供料,光照,保温,补 铁(含硒),环境等措施相同,试验猪选自湖南道县某 年出栏5000头规模的养猪场二元杂怀孕后期母猪 9O头.试验时间:2008年1月18日至2008年2月 8日. 1.2试验方法及测定指标 1.2.1试验方法将已按常规进行其他疫苗免疫 接种,预产期接近,胎次和膘情差异不大的怀孕后期 母猪9O头随机分为3个组,每组3O头(含其产下的 仔猪),即k.,k..苗,猪水肿病苗,恩诺沙星,口服补 液盐,"控料"综合预防组,k.,k.苗,猪水肿病苗预 防组,空白对照组.综合组按预产期推算,在母猪临 产前的21--24d内注射k,k.苗(注射方法为每支 疫苗加2mL的兽用氢氧化铝生理盐水,混匀,注射 部位耳后皮下,每头注射1次即可),待其生下仔猪 14,18日龄时,给仔猪每头肌肉注射猪水肿病苗,1 mL;30日龄断乳后14d内,让仔猪整天自由饮用口 服补液盐(断乳后14d后自由饮用常水);断乳时开 始,每50基础日粮中添加恩诺沙星原粉5g,充 率36.84;中猪(25头)检测出6头份,占圈养中猪 阳性率的24.O0. 5分析与讨论 本次流行病学调查和实验室检测结果表明,猪 轮状病毒性腹泻多为隐性感染,且感染率较高,为 22.94,采样时未发现腹泻,呕吐,厌食等症状.个 别圈养10日龄至断奶仔猪腹泻,消瘦症状明显,用 抗生素类药物治疗后效果不显着,但不能肯定是由 猪轮状病毒引起,建议应在仔猪疫病防治过程 虑轮状病毒(RV)的防治和治疗. 因家庭小规模分散饲养普遍存在养殖基础设 施薄弱,良种化程度低,饲养技术落后等问题,导 致散户圈养模式的阳性感染率高达36.84,明显 高于采用笼养模式及生产方式相对先进的规模养 殖户和大型养猪场.所以RV的感染率与仔猪饲 养模式有关,养殖户通过采用笼养方式可减少猪 接触粪便,地面的机会,使猪轮状病毒感染的机会 大大减少而降低感染率.从农户圈养方式的检测 结果来看,仔猪感染率明显高于中猪,可能是仔猪 抵抗力差,免疫力低等造成其容易感染猪轮状病 毒,随着仔猪生长发育及其自身免疫力的增强,感 染率有所下降. 本次RV流行病学调查通过采集,检测天水市 7个不同乡镇猪场病样,对发病相关因素进行了初 步分析,RV在不同地区都有不同程度的感染,多呈 现隐性感染症状,即带毒感染.农户圈养方式的感 染率明显高于笼养模式,证实仔猪RV的感染率高 低与饲养管理有很大的关系.因此对猪轮状病毒的 防治首先是要加强饲养管理,其次是增强仔猪抵抗 力.此外,考虑到各地区仔猪腹泻的病原复杂,且不 同病原的混合感染率较高,在临床防治实践中,应对 腹泻进行具体分析,弄清主要致病因子,区分混合感 染和单纯感染,从而采取针对性的防治措施,把疫病 造成的损失降至最低.