五味地龙汤抗气道变态反应作用研究

五味地龙汤抗气道变态反应作用研究 五味地龙汤抗气道变态反应作用研究 ? l28? 长江大学(自科版)2005年6月第2卷第6期/医学卷第18卷第2期 JournalofYangtzeUniversity(NatSciEdit)Jun.2005Vo1.2No-6/MedicineV,Vol?18No?2 五味地龙汤抗气道变态反应作用研究 李祥华,王文英,张渊,杜亚明(长江大学医学院,湖北荆州434000) [摘要]目的:探讨五味地龙汤抗豚鼠变态反应性哮喘的作用机制.方法:采用豚鼠离体气管平滑肌过敏 性收缩实验法与抗组胺药实验法.结果:五味地龙汤水煎液抑制致敏豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩(P <0.01).致给予组胺后的豚鼠离体气管片舒张(P<0.01).肺支气管灌流速度加快,灌流量增加(P< 0.01),并使组胺致喘的豚鼠哮喘潜伏期延长(P<0.01).结论:五味地龙汤水煎液有抗气道变态反应性 炎症和抗组胺性哮喘的作用,其机制可能与五味地龙汤水煎液对气管平滑肌的松弛作用和拮抗组胺对气 道的作用等功能有关. [关键词]五味地龙汤;变态反应性哮喘;气管平滑肌 [中图分类号]R562.25[文献标识码]A[文章编号]l673—1409(2005)O6一Ol28一O3 目前认为哮喘病是一种气道的迟发性过敏反应,寻找抗哮喘病的有效药物及新制剂成为研究的热 点.五味地龙汤为一验方,其水煎液口服治疗重度哮喘,有效率达100.本文对该方抗变态反应的 作用机制进行了初步探讨,现报道如下. 1材料与方法 1.1材料 1)药品五味子250g,地龙75g,鱼腥草400g均购自湖北省荆州市中药材公司,经鉴定系正 品.将以上3味药物用相当于原生药2倍量的蒸馏水浸泡2h后,煎煮30min,过滤,滤渣再次煎煮 20min,合并两次煎煮液,恒温水浴浓缩至相当于原生药l:l的量,过滤,低温(4.C)放置备用.氯 化乙酰胆碱,军事医学科学院科技部,批号20010708;磷酸组胺,上海丽珠东风生物技术有限公司, 批号99lll47;氨茶碱,扬州中宝制药有限公司,批号0403082;卵白蛋白,Sigma公司(USA),批号 041008;盐酸异丙基肾上腺素,上海禾丰制药有限公司,批号20000702. 2)动物豚鼠,普通级,雌雄兼用.由长江大学医学院实验动物中心提供. 3)仪器LMS一2B型二道生理记录仪,成都仪器厂.JSC—OK双头式多功能型超声波雾化器,辽宁 鞍山市电子医疗器械厂.RJE压力换能器,张家港市生物医学仪器厂. 1.2方法 1)抗致敏豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩实验取体重l50,200g豚鼠l8只,随机分为3组, 每组6只.按文献221以卵白蛋白致敏,每只豚鼠两后腿肌注5卵白蛋白生理盐水溶液0.4mL,同 时腹腔注射卵白蛋白生理盐水溶液lmL.于第4周后放血处死,取出气管段,按离体气管装置进行描 记.基线稳定后,抗原组将lmg/mL卵白蛋白台氏液注入浴槽中,试药组和氨茶碱组则在基线稳定后, 分别注入试药(0.4g/mI)和氨茶碱(2.5mg/mL),10rain后,再加入lmg/m[卵白蛋白,观察气 管平滑肌收缩的变化. 2)离体气管片法取体重200,400g豚鼠l8只,随机分为3组,每组6只.击头处死后即取出 气管,按文献221将其剪成离体气管片,Kreb,s—Henseleit营养液浴槽中组胺浓度为0.5mg/mL, 试药组和氨茶碱组分别注入试药(0.4g/mI)和氨茶碱(12.5mg/mL),对照组给予等量生理盐水, 用生理二道仪记录其曲线. [收稿日期]2005—03—03 [作者简介]李样华(1955一),男,副教授,主要从事中医学教学和研究工作. 医学卷第18卷第2期李祥华等:五味地龙汤抗气道变态反应作用研究?129? 3)肺支气管灌流法取体重400~500g豚鼠18只,随机分为3组,每组6只.按照文献E2]进 行实验.先给予0.01组胺液0.5mL,使其作用稳定后再次注入同样量组胺,试药组给予五味地龙汤 水煎液0.5g,阳性对照组给予0.01异丙肾上腺素0.5mL,组胺组给予等量生理盐水. 4)对豚鼠吸入组胺致喘影响的研究取体重180,200g豚鼠18只,随机分为3组,每组6只. 分别将其放人玻璃钟罩内,按文献[2]实验,其中试药组和茶碱组分别腹腔注射五味地龙汤水煎液2 g/kg和氨茶碱125mg/kg,对照组给予相同量的生理盐水,30min后,各组分别以400mmHg(53.2 kPa)的压力下喷人0.4磷酸组胺15S,测定其引喘潜伏期及6min内跌倒的只数. 1.3统计学处理 数据以均数?标准差表示,2组间比较用t检验,同组给药前后比较用配对t检验.P<0.05为差异 有显着性. 2结果 2.1五味地龙汤对致敏豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩的影响 五味地龙汤对致敏豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩的影响见表1. 表1五昧地龙汤水煎液对致敏豚鼠离体气管平滑肌过敏性收缩的影响(n=6) 注:与对照组比较,P<0,01. 2.2五味地龙汤的抗组胺作用结果 1)对离体气管片的影响结果见表2. 表2五昧地龙汤水煎液对豚鼠离体气管片的影响(n=6) 注:与给药前比较,.P<0.01. 2)对肺支气管灌流量的影响结果见表3. 表3五昧地龙汤水煎液对豚鼠肺支气管灌流量的影响(=6)mL/min 注:与组胺组比较,"P<n01. 3)五味地龙汤对豚鼠吸入组胺致喘的影响结果见表4. 表4五昧地龙汤水煎液对豚鼠吸入组胺致喘的影响(n=6) 注:与对照组比较,P<0.01. 长江大学(自科版)2005年6月 3讨论 五味地龙汤由五味子,地龙,鱼腥草组成.近年研究表明,五味子有免疫增强作用L1],地龙体内存 在多种生物活性物质,已证实地龙提取物具有抗凝血,溶栓,消炎,退热,止痛,促进肉芽增生,促进 创面愈合等药理作用j,可用于心血管系统,呼吸系统和消化系统疾病治疗j,地龙还可缓解免疫性 疾病和肿瘤患者病情,有研究表明地龙肽对体外巨噬细胞,NK细胞具有激活作用,并对淋巴细胞刺激 指数,巨噬细胞细胞毒性百分率,巨噬细胞分泌N0水平及脾细胞自发分泌NO水平均有明显提高. 从地龙中纯化出的一种纤溶酶原激活剂e—PA酶能激活溶酶原[7,具有抗组胺作用和抗凝血酶作用.组 胺和凝血酶是成纤维细胞和平滑肌细胞有效的促有丝分裂剂,地龙有可能通过抑制这些途径对平滑肌增 殖进行抑制.在哮喘迟发相起关键作用的是嗜酸性粒细胞,嗜酸性粒细胞分泌白三 烯等也通过促进气道 平滑肌增生,血管内皮细胞,成纤维细胞等增殖参与气道重建的发生和发展.有报道地龙等平喘药能降 低致敏豚鼠支气管洗液中细胞总数,自蛋白含量及自三烯水平,尤其是能抑制嗜酸性粒细胞增多,并阻 止该细胞激活. 气道炎症机制是哮喘病发生的主要机制.哮喘病人气道内炎症性细胞的粘附,聚集和趋化受到粘附 分子和趋化因子的调节.嗜酸性粒细胞,肥大细胞等炎性细胞的激活过程受到了II一3,II一5,II一6和集 落刺激因子的调节.用超声雾化吸人鱼腥草液有减轻呼吸道炎症,减少呼吸道革兰阴性菌作用j.同时 雾化吸入鱼腥草提取液可显着增强呼吸道局部的特异性和非特异性免疫功能,对全身免疫功能也有一定 促进作用. 气道暴露于各种刺激之下,气道上皮细胞暴露于收缩气道的高压缩力下,增加气道重建相关基因表 达,增加纤维母细胞合成胶原.减轻哮喘气道收缩有利于减少机械应力,从而抑制气道重建的发展. 本实验显示,五味地龙汤水煎液对组胺喷雾法导致豚鼠哮喘有明显的平喘作用,对致敏豚鼠离体气 管平滑肌过敏性收缩试验及抗组胺试验结果均提示五味地龙汤能松弛气管平滑肌,表明五味地龙汤水煎 液的平喘作用可能与其对气管平滑肌的松弛作用和拮抗组胺作用等功能有关.有关五味地龙汤对与哮喘 有关的细胞因子的影响等,尚有待于进一步的探讨. [参考文献] 1]高学敏.中药学rM].北京:人民乍出版社,2000:1882. [2]徐叔,如濂.陈修.药理学实验方法学rM].第3版.北京:人民卫生出版 社.2002:1369.1411. [3]OumiT.UkenaK,Matsushima0.eta1.TheGGNGpeptides:novelmyoactivepeptidesisol atedfromthegulandthewholebodyof theearthworm[J].BiochemBiophysResCommun,1995.216(3):1074,1086. [4]陈云锋,张风春,苏颜玲等.地龙促进大白兔创伤模型愈合的形态学观察[J].中国中药杂志,1998.23(5):3O5,307. r5]阎淑芳,张风琴.李晶等.赤子爱胜蚯蚓纤溶酶的研究'l纤溶酶活性组分的确证[J].黑龙江医药.1999,12(5);263,264. [63唐小云,梁fl}斌,杨丽群等.地龙肽对小鼠免疫功能的影响[J].中国医科大学,2003,32(1);21,23. [7]杨嘉树.李令媛.茹炳根.蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究I-j].中国生物化学与分子?防.1998,1?t (2):164,165. [83马燕羔,韩忠福,王建荣等.超声雾化吸人鱼腥草对呼吸道消炎抗菌作用临床研究[J].巾草药,2001,32(-1):334,335. [编辑]一凡