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黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶研究

2017-09-20 40页 doc 71KB 19阅读

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黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶研究黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶研究 分类号 密级 华中农业大学硕士学位论文 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究生: 研 究 隋晨 号: 学 易建明教授 指导教师: 指导小组: 杨利国教授 齐德生教授 张淑君教授 霍立军教授 李凤娥教授 专业:动物营养与饲料科学 研究方向:反刍动物营养学 获得学位时间:年月 获得学位名称:农学硕士 华中农业大学动物科技学院 二。一三年六月华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否 如需保密,解密时间 年 月 日 是否保密 独创性声明 ...
黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶研究
黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶研究 分类号 密级 华中农业大学硕士学位论文 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究生: 研 究 隋晨 号: 学 易建明教授 指导教师: 指导小组: 杨利国教授 齐德生教授 张淑君教授 霍立军教授 李凤娥教授 专业:动物营养与饲料科学 研究方向:反刍动物营养学 获得学位时间:年月 获得学位名称:农学硕士 华中农业大学动物科技学院 二。一三年六月华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否 如需保密,解密时间 年 月 日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成 果.尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他入已经发 表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农韭大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意. 帆加年月舯 研胜张礴叉 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学 校要求提交学位论文的印尉本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版, 并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位’ 论文.本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容,为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务,同时 本人保留在其他媒体发表论文的权力. 注:保密学位论文印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文在解密后运用于本授权书. 导师签名: 易建嵋 学位论文作者签名:礴覆 签名日期:知;年‘月,扩日 签名日期:加;年月略日 注:请将本表直接装订在学位论文的摩页和目录之问黄冈市围产期奶牛添加 锌锰硒和二氢吡啶的研究 目录 ?..?. 摘要 第一章文献综述. 奶牛围产期??.. . .围产期机体变化概况 .围产期微量元素营养与生产性能和繁殖性能的关系.二氢吡啶对动物血液 生化指标的影响研究 .奶牛微量元素营养??.. .奶牛微量元素及生理功能? .奶牛微量元素的吸收与代谢机制? .奶牛微量元素添加剂的应用现状及研究进展.研究目的和意义 第二章试验研究. 试验一湖北黄冈地区围产期奶牛微量元素盈缺. 材料与方法.试验材料?.. 。.试验牛场??.. ..试验主要仪器及试剂.. .试验方法?.. ..样品采样与处理??一 ..奶牛日粮中微量元素的测定.. ..奶牛血浆中微量元素的测定.. 结果与分析.围产期奶牛日粮中微量元素的含量??.. ..围产前期奶牛日粮中微量元素的含量 ..围产后期奶牛日粮中微量元素含量?华中农业大学届硕士研究生学位毕业 论文 .围产期奶牛血浆中微量元素状况.. 讨论.围产期奶牛日粮中微量元素的含量??.. 围产期奶牛血浆中微量元素的含量??.. . 试验二围产期奶牛添加锌、锰、硒对其生产性能及血液指标的影响??.. ??. 材料与方法 .试验材料?.. ..试验动物管理和试验日粮..试验动物和试验? .试验方法?一 ..样品的采集..奶牛生产性能的测定? ..奶牛血浆中锌锰硒的测定..牛奶中锌锰的测定..牛奶中硒的测定一氢化 物原子荧光光谱法? ..奶牛抗氧化指标的测定 .数据分析?.. 结果与分析??. .添加锌硒锰对围产期奶牛生产性能的影响??.. ..日粮添加锌锰硒对产奶量的影响‖??.. ..日粮添加锌锰硒对乳成分的影响..日粮添加锌锰硒对牛奶中体细胞数的 影响? .添加锌硒锰对牛奶锌硒锰含量的影响?。. .添加锌硒锰对奶牛血浆锌硒锰含量的影响??.. .添加锌硒锰对奶牛机体抗氧化的影响?.. ..添加锌硒锰对血浆活力的影响.. ..添加锌硒锰对血浆.活力的影响.讨论? 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 .日粮添加不同来源锌锰硒对围产期奶牛生产性能的影响??.. ..日粮添加锌锰硒对产奶量的影响.。日粮添加锌锰硒对乳成分的影响..日 粮添加锌锰硒对围产期奶牛乳中体细胞数的影响 .日粮添加不同来源锌锰硒对牛奶中锌锰硒含量的影响.. .日粮添加不同来源锌锰硒对血浆中锌锰硒含量的影响.. 日粮添加不同来源锌锰硒对奶牛抗氧化性能的影响?.. . 试验三围产期奶牛添加二氢吡啶对血液生化指标的影响?. 材料与方法.试验材料?.. ..试验动物管理和试验日粮..试验动物和试验设计.. .试验方法?.. ..样品的采集?一 ..奶牛血液生化指标的测定?.. 结果与分析.二氢吡啶对围产期奶牛血浆中代谢物质含量的影响?.. .二氢吡啶对围产期奶牛血浆中酶活力的影响?.. .二氢吡啶对围产期奶牛血浆中胆红素含量的影响??.. .二氢吡啶对围产期奶牛血浆中蛋白含量的影响.. 讨仑.. .二氢吡啶对围产期奶牛血浆中代谢物质含量的影响?.. .二氢吡啶对围产期奶牛血浆中酶活力的影响?.. 二氢吡啶对围产期奶牛血浆中胆红素含量的影响??.. .二氢吡啶对围产期奶牛血浆中蛋白含量的影响.. 结论?.. 参考文献? 致谢?.. 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 摘要 围产期是奶牛饲养管理中的重要时期之一,与奶牛健康和经济效益密切相关。 从本试验旨在对黄冈地区围产期奶牛进行添加微量元素和抗氧化剂的研究,而 改善奶牛围产期的微量元素失衡和氧化应激状况。试验分为三部分,第一部分通过 采样湖北黄网地区围产期奶牛日粮和血浆中微量元素含量,分析微量元素盈缺 状况;第二部分对围产期奶牛补充有机和无机来源的锌、锰、硒微量元素添加剂, 研究其对奶牛生产性能和血液指标的影响;第三部分通过对围产期奶牛日粮添加二 氢吡啶,研究其对奶牛部分血液生化指标的影响。 试验一选择黄冈市家牛场采集饲料原料,并根据各牛场配方配制奶牛围产期 全混合日粮种干奶牛日粮和产后奶牛日粮各种;采集围产期奶牛血液共 头份其中干奶牛和产后奶牛各份。分别测定奶牛日粮和血浆中铜、铁、锌、 锰、硒、碘、钴的含量,结果表明:与饲养相比较,干奶牛日粮 中铜、铁、锌、锰、硒、碘、钴分别有、、、、、、家高于推荐值,产后 奶牛日粮分别有、、、、、、家高于推荐值,日粮中铁和碘的含量超出程 度最高,硒含量存在一半牛场偏低的状况,表明湖北黄冈地区奶牛日粮中微量元素 不均衡;在奶牛血浆中,微量元素的状况并不理想,血浆锌、锰、硒的含量均不同 程度低于正常值,是一个普遍的问。 试验二根据试验一中奶牛日粮和血浆微量元素检测结果,每天补饲锌、 锰、硒,分为三组:有机组头、无机组头和对照组头。有机组为 有机微量元素蛋氨酸锌、蛋氨酸锰和酵母硒;无机组为硫酸锌、硫酸锰和亚硒酸钠; 对照组不添加。结果表明,有机组、无机组、对照组日均产奶量、牛奶中乳脂、乳 蛋白、乳糖、体细胞数没有显著性差异;乳中总固形物含量在产后时,有机组 显著高于无机组和对照组。 有机组牛奶锌含量均显著高于无机组和对照组.,无机组略高于对照组, 但差异不显著,表明有机微量元素添加剂能够提高牛奶中的锌含量。有机组和无机 组牛奶中的锰含量高于对照组,但各组之间差异都不显著。牛奶中硒含量在产后一 天,天、天有机组比对照组分别高出.%、.%、.%,常乳中硒含量 的增加程度要高于初乳,且有机组牛奶中硒含量显著高于对照组和无机组尺。, 这与牛奶中的锌含量的变化趋势相似。无机组牛乳中硒含量在产后三个时间段高于 华中农业大学届硕士研究生学位毕论文 对照组,但差异不显著。 补饲微量元素能提高围产期奶牛血浆中锌的含量,在产后天,两个试验组奶 牛血浆中锌含量在正常值内,而对照组低于正常值,说明补锌改善了奶牛机 体缺锌 的状况。奶牛产前血浆中锰低于正常值,产后有机组和无机组都在正常值内, 对照 组比正常值低。在产后天时,有机组奶牛血浆中硒含量显著高于对照组尸.。 日粮中添加微量元素锌硒锰,能够提高血浆活力,产后天时,有机组 和无机组比对照组高,有机组比无机组高出.%,但各组之间差异都不显著;对 有较大幅度波动,在分娩时降至最低,而有机组和无 照组奶牛围产期血浆中? 机组呈现不断上升的趋势。 奶牛血浆中?活力在分娩当天最高,有机组和无机组活力 在分娩当天和产后天均高于对照组,且差异显著.,说明添加微量元素 锌硒锰能提高~活力。血浆中活力在分娩当天最低,其变化趋 势与活力相反。有机微量元素能够提高血浆中活力。 活力在分娩时,对照组低于有机组,略高于无机组,到产后天时, 有机组血浆中?活力显著高于无机组和对照组,说明添加微量元素能够提高 奶牛血浆中含量,有机组效果比无机组好。 试验三、选取头围产期荷斯坦奶牛试验组、对照组各头,试验组每天 添加二氢吡啶,对照组不添加。结果表明:分娩时和产后天,试验组血糖浓 度比对照组高.%.和.倍.;血浆中胆固醇在分娩当天 和产后天时,试验组比对照组分别低.%、.%。血浆中尿素氮含量在分 娩当天试验组比对照组低.%.。说明添加二氢吡啶能够对产后血糖的降 低起到缓解作用,降低血浆中胆固醇,降低血浆中尿素氮,提高蛋白利用率。 围产期奶牛血浆中碱性磷酸酶活力在对照组中不断升高,在试验组不断下 降; 分娩时和产后天,试验组都低于对照组,差异不显著。血浆中谷丙转氨酶活力在 分娩时最低;血浆中谷草转氨酶活力在对照组和试验组中都是不断上升,试验组上 升更快,上升幅度较对照组大;各组之间都无显著差异。 血浆中总胆红素、直接和间接胆红素均不断上升,血浆中总胆红素在分娩时和 产后天时,试验组都低于对照组,分别低.%、.%,血浆中直接胆红素的 含量在分娩时,试验组高于对照组,高.%,产后天时,试验组比对照组低黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 血浆中间接胆红素含量在在分娩时和产后天时,试验组都低于对照组, .%; 分别低.%、.%。说明添加二氢毗啶能降低围产期奶牛血浆中胆红素含量。 对照组和试验组血浆中蛋白含量在变化趋势上并不一致,对照组血浆中总蛋白、 白蛋白和球蛋白含量在分娩时最低,而试验组的总蛋白和球蛋白含量都是不断上升, 试验组白蛋白在分娩时最高,产后下降。对照组与试验组之间相比,总蛋白含量在 分娩时和产后天分别比对照组高.%、.%,且差异显著.;白 蛋白含量在分娩时略低于对照组,产后天,试验组略高于对照组且差异显著 火.;血浆中球蛋白含量与总蛋白含量情况相似,在分娩时比对照组高.% 且差异极显著尸.,产后天比对照组高.%且差异显著氏.; 奶牛血浆中的白球比值除对照组分娩时,其它均小于.。 关键词:黄冈市;奶牛围产期;二氢吡啶:微量元素;产奶性能;血液指标华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文.,, . .,. . . ,. ,,, ,. . , ,, , .,. , . ..,..,.士. , , . , .. . % .%,.%, , . .%,.%,.% , . .,.,. . ? .%.? ........%. .%; .%,; .% ,.% . , .%、.%, ;.; , ; ., . 华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文,, .% , , . ., ,, . ./ .%,.%, ., %. ; .%.,.%. . ; ; ;; 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 : ; ; 第一章文献综述 .奶牛围产期 .围产期机体变化概况 围产期 是奶牛分娩前后的过渡时期,这一时期通常定义为奶 牛分娩前三周至分娩后三周的时间刘国文,;孙国强,。围产期奶牛生 理变化剧烈,以应对分娩和泌乳。 奶牛胎儿鲜重、干重在妊娠末期成指数增长图 .,:妊娠 期间,约有%的蛋白质和能量是在妊娠最后四分之一时期沉积的,、的沉积率 亦以末期最高表卜岳文斌等,。 要 塑 山 誓 一 ? 罡 图奶牛妊娠末期胎儿体重增长图 ’ . 华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 表奶牛妊娠期组织能量、蛋白质、钙、磷沉积 ,,, 奶牛机体内分泌状态改变。血浆中与妊娠有关的激素在围产期均有不同程度 的波 动,血浆中糖皮质激素、生长激素和催乳素在分娩当天上升,第二天又下降到 分娩前 的水平;孕酮雌激素和甲状腺素浓度浓度分娩时下降图?。奶牛 从怀孕末期进入泌乳早期,血浆胰岛素水平下降,。 ; 轴硼 %嘲蚍骱 、./磊卜 ;一。.一..、. 钠 、 确啊臻 、.,一 嗨硎旃翻; 产 、 蛐 广 ;删瓣删 】???“、? ‘一 融?湘嘲 呻,嘲蝴 薹?一、 ?....??‘ 捌双? 辨,州籼 。 。 :.? 啷潲雠船瓣 图卜围产期奶牛血清中公认类似激素浓度的变化 . 遮 体脂动员,奶牛接近分娩时及产后采食量降低且增加速率缓慢,但营养需求 急 剧上升,因而出现能量负平衡图,导致脂肪动员和肝糖原分解,血浆中非酯 化脂肪酸增加苏华维,;常维毅,。奶牛产后能量负平衡的 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究., ., ; 状况与干物质采食量升高速率有直接关系 。微量元素与奶牛的采食量密切相关,研究发现,与中等体况的奶牛相比,肥 .,,结果导致 胖奶牛在分娩后出现食欲下降更明显且恢复慢 肥胖母牛体脂动员加剧并伴发脂肪肝 .,,且造成首次排卵 间隔时间延长和奶牛繁殖能力低下 .,。 , 【射 。卜聊婊泌乳 泌巍走数蹦 图奶牛泌乳周期的产奶量干物质采食量和体重变化情况 . 免疫应激,妊娠末期、分娩及泌乳早期的围产期动物,体内产生过量活性氧,使 动物机体处于氧化应激状态。 奶牛分娩时免疫抑制类激素浓度上升,如雌激素和糖皮质激素,干物质采食量 下降,使一些与免疫功能相关的营养物质不足,如维生素、维生素、锌、硒等。 随着围产期的开始,饲粮由高纤维过渡到高精料,瘤奶牛瘤胃的适应性变化, 胃 微生物区系由纤维分解菌向淀粉分解菌转变,丙酸和乳酸的产量提高;瘤胃上皮乳头 状突起开始伸长。另外,妊娠后期胎儿生长压迫瘤胃,瘤胃容积变小并影响瘤胃蠕动, 分娩后,瘤胃机械性压迫的自发解除等。 .围产期微量元素营养与生产性能和繁殖性能的关系 围产期是尤为关键的时期,奶牛分娩、泌乳及日粮的变化使产后奶牛易发生代谢 性疾病,乳房炎等传染性疾病和繁殖障碍疾病,对奶牛健康受损冯仰廉,;桑 松柏,。微量元素在体内含量低,但作用广泛,在免疫,代谢、繁殖中扮演重 要角色 .,;,;,;,。随着奶牛生产华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 性能的逐渐提升,增加奶牛微量元素饲喂量成为趋势 .,; . .,。近年来,越来越多的研究开始集中在奶牛围产期微量元 素营养调控方面,试图寻找更好的模式来改善围产期健康状况,提高奶牛的生产性能 和繁殖性能,奶牛围产期微量元素的调控将会成为继能量、蛋白调控之后的热点 .,。 .二氢吡啶对动物血液生化指标的影响研究 二氢吡啶的化学全称为,一二甲基一,一二乙酰基一,一二 氢吡啶,是六元杂环化合物,非酚类抗氧化剂见图卜。在世纪年代,二 氢吡啶用来作抗氧化剂来防止动植物油的油脂酸败;年代后期,二氢吡啶类衍生 物被用作钙通道阻滞剂而开发成新药,如硝苯地平、非洛地平、尼莫地平、西尼地 平等,用于治疗高血压、心绞痛等心血管疾病曾怀超,。年代研究发现, 二氢吡啶可以作为绿色饲料添加剂应用于畜牧生产中,且能够改善肉质、促进动物 生长、提高饲料利用率、提高动物生产性能和繁殖性能。 郑晓中对干奶牛和泌乳牛每天分别添加、.二氢吡啶,研究发现 试验组产后母牛血清中碱性磷酸酶活性、谷丙转氨酶活性和血糖浓度有所升高,而 谷草转氨酶活性显著降低,血清总蛋白浓度有所下降。房祥军研究发现二氢 吡啶对蛋鸡血清葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇、总蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白、 二氢吡啶能提高血清中血糖、 胆固醇浓度无影响。曹杰在试验中添加.% 总蛋白、白蛋白的含量,降低血清中谷草和谷草转氨酶、尿素氮、肌酸磷酸激酶的 含量。 厂 图卜二氢吡啶的化学结构 . 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 .奶牛微量元素营养 .奶牛微量元素及生理功能 奶牛矿物元素分为常量元素、微量元素、有毒矿物元素三大类。其中,常量元素 包括钠、钾、镁、钙、硫、磷、氯共种,微量元素包括铜、铁、锌、锰、钴、铬、 钼、硒、碘以及铝、砷、镍、硅、硒、矾共种,有毒矿物元素包括镉、氟、铅、 汞种。 需要量以克为计算单位是常量元素,以毫克、微克为计算单位是微量元素。在实 际生产中,铜、铁、锌、锰、硒、碘、钴种微量元素被认为具有应用意义张春善, 。 铜的主要功能是机体内许多酶的辅助因子:铜组成血浆铜蓝蛋白中的三核铜簇, 能催化氧化为用于合成血红蛋白;铜构成细胞色素氧化酶的金属活性 部位,完成电子传递功能:铜是铜锌超氧化物歧化酶?的催化活性中心, 能够清除体内的氧自由基,在抗氧化、预防衰老和炎症方面具有重要作用;此外,铜 也是赖氨酰氧化酶、酪氨酸酶的重要组成成分。 铁是机体内多种酶类和血红素的构成成分,含铁血红素主要构成血红蛋白和肌红 蛋白,含铁酶主要有:细胞色素氧化酶、细胞色素酶、骨髓过氧化物酶、过氧 化氢酶等。 锌与生物大分子形成络合物,如金属蛋白、金属核酸等,这些络合物结构稳定, 参与机体大部分的新陈代谢过程。锌与细胞膜上的二硫键结合,起到稳定膜结构的作 用,锌还能抑制膜的脂质过氧化反应,维持生物膜完整性。锌是机体内多种酶的组成 成分,这些含锌酶对糖类、脂类、蛋白质等的代谢均有影响。锌是和聚 合酶的辅因子,参与细胞内核酸及蛋白质的合成。 锰的主要功能是酶的组成成分和激活剂。含锰酶主要有精氨酸酶、锰超氧化物岐 化酶、丙酮酸羧化酶;锰作为激活剂主要是锰离子与含磷酸的底物结合, 激活酶促反应锰也可以直接与酶作用,如激酶、水解酶、脱羧酶等。因而,锰生理功 能广泛:锰参与骨骼有机质中的黏多糖合成,缺锰会影响幼龄动物骨骼的生长发育, 导致骨骼变短变厚;丙酮酸羧化酶是含锰酶,磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶是锰激酶,所 以锰与糖代谢密切相关;缺锰会导致机体生殖器官发育不全,降低繁殖性能,另外,华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 锰与脂类、蛋白质代谢也通过与锰相关酶而发挥作用。 硒的主要功能是抗氧化,谷胱甘肽过氧化物酶和磷脂氢过氧化物 谷胱甘肽过氧化物酶?是两种主要的含硒酶,通过抵抗磷脂过氧化来 保护生物膜的完整性,发挥抗氧化功日‘匕;型甲腺原氨酸 一脱碘酶是第 三种含硒酶,其催化四碘甲腺原氨酸转化为有生物活性的三碘甲腺原氨酸;硒能与多 种重金属如银、汞络合,减轻重金属的毒性;硒是视网膜内参与感光反应的必须 组成成分。 甲状腺素的主要 碘是合成三碘甲腺原氨酸、甲状腺素的必需成分, 作用是影响物质代谢和能量代谢,刺激蛋白质和核酸的合成,参与糖类、脂肪、维生 素、水和盐类的代谢,甲状腺素能够影响机体生长发育、组织分化和成熟,调节脑下 垂体和性腺的分泌功能,甲状腺素对中枢神经系统、骨骼、心血管及消化系统也能产 生影响。机体缺碘会产生甲状腺肿大的病理症状,甲状腺素分泌不足,影响机体的物 质代谢和能量代谢,妊娠母畜已发生死胎和弱胎,还会导致动物发情周期紊乱或不发 情,降低繁殖力。 钴主要以维生素辅酶的形式发挥作用,维生素是机体代谢中重要酶系统 的组成成分,主要以腺苷钴胺素和甲基钴胺素两种辅酶的形式存在,腺苷钴胺素是甲 基转移酶的辅酶,甲基钴胺素是变位酶的辅酶:此外,维生素还能促进红细胞的 合成,参与嘌呤和嘧啶的合成等。机体缺钴会降低维生素的形成,影响红细胞生 长,易患巨细胞性贫血等疾病,缺钴会使动物采食量下降,消瘦,与饥饿症状类似, 大大降低养殖效益。 .奶牛微量元素的吸收与代谢机制 铜主要在小肠吸收。各种无机形式的铜化合物吸收顺序是氯化铜硫酸铜碳酸 铜氧化铜铜丝。吸收的铜占进入消化道的%一%,大部分随粪便排出 取决于饲料中铜含量。 。铜吸收的机制有主动运输和简单扩散两种, 铜的吸收是首先铜离子从肠腔通过自由扩散进入黏膜细胞,然后在肠 道黏膜上与金属硫蛋白结合并转运。铜被肠道黏膜吸收后一部分结合金属硫蛋白留在 肠上皮细胞内,另一部分由磷酸化酶介导通过肠黏膜细胞基底外侧膜进入血液 循环钱剑等,,首先与血清中的白蛋白或氨基酸等小分子结合形成易被利用 的松散化合物,然后经过门静脉进入肝组织,进而合成血浆铜蓝蛋白陈冠杰,, 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 进入血液被其他组织摄取利用。铜主要在肝脏代谢,内源铜经胆汁消化道其他部位和 肾排泄,有极少部分铜是由汗腺排泄的,一些通过胆汁排出的铜,经肠肝循环可以再 回收利用。 铁的主要吸收部位在小肠,进入小肠内的铁,铁的难溶物及不能被吸收而随 粪排出体外;血红素铁、血红蛋白铁、可溶的才能被小肠吸收,血红素铁与肠 壁 绒毛边缘的血红素铁受体结合,直接进入肠粘膜,在肠粘膜上皮细胞中,血红素铁在 血红素氧化酶的作用下,释放出,血红蛋白铁先与转铁蛋白结合,然后通过肠粘 膜细胞的转铁蛋白受体而被吸收,从转铁蛋白上释放,储存在胞质中;机体缺铁 时,游离也能经黏膜吸收。吸收进入肠粘膜细胞中的被氧化成,与蛋白 ,进入血液中随血液循环运往全身各处,参与机体代谢。当机体结合成铁蛋白 铁的摄 入量大于需要量时,去铁铁蛋白的合成增加,去铁铁蛋白与结合形成铁蛋白贮存 在肠粘膜细胞胞质中。 锌在动物中的主要吸收部位是小肠。小肠吸收锌主要是胰腺向肠腔内分泌富含半 胱氨酸的锌结合蛋白,该蛋白在肠道中与锌结合形成复合物后经小肠内壁刷状缘,从 肠腔中至刷状缘上皮细胞:其后被转运到基底外侧原浆膜结合位点:在铁传递蛋白和 白蛋白的共同作用下进入门脉循环系统,随血液循环进入全身各组织。多余的锌被吸 收进入门脉后,与血浆清蛋白结合成复合物,经肝门脉系统进入肝细胞,在肝细胞中 解离为清蛋白载体和锌离子,细胞中的锌主要分布在器官组织、金属硫蛋白、大分子 和膜上。骨骼和肌肉是机体内的锌库,当骨钙被动员时,骨中的锌会随之进入血浆, 当肌肉分解代谢时,锌会随尿排出。 锰的主要吸收部位是十二指肠,动物对饲料中锰的吸收率很低,大部分随粪便排 出,动物吸收锰分两步来完成:肠腔摄人锰和锰穿过肠粘膜细胞转人体内。由小肠吸 收的锰,经小肠上皮细胞进入血浆。在血浆中,与~球蛋白结合,形成一球蛋 ,即转锰素。一些与睨一巨球蛋白结合,被酶氧化为,与转 白转移蛋白 铁蛋白结合,随血液循环至全身,供机体利用。锰在血液中停留时间短暂,血液中的 锰,大部分转移到线粒体中,以不溶性磷酸锰的形式贮存于组织中。机体内的锰含量 主要依靠锰的吸收和排泄机制来维持稳衡状态,当机体吸收锰过量时,主要通过锰的 肝肠循环代谢掉超量的锰,锰形成的化合物与胆汁和胆酸形成络合物排出体外。 硒的主要吸收部位是十二指肠,瘤胃和皱胃对硒几乎无吸收。硒分为有机硒和无华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 机硒,有机硒主要是硒代氨基酸,无机硒主要是硒酸盐和亚硒酸盐。小肠对亚硒酸盐 的吸收通过简易扩散,硒酸盐的吸收是与协同运输,硒代氨基酸主要以主动运输 吸收。动物通过小肠吸收的硒经血液循环转运并与蛋白质主要是【一球蛋白和一球 蛋白结合,以硒蛋白的形式分布并贮存于不同组织中,主要是肾脏、肝脏、骨骼、 肌肉等。硒主要通过粪、尿、乳汁排出体外。 碘的吸收部位是胃和小肠,以小肠为主。吸收的碘与血浆蛋白结合,随血液运输, 并迅速转移至甲状腺。甲状腺对碘的吸收是通过泵的主动运输过程,进入甲状 腺中的碘在上皮细胞中被氧化成活性碘,活性碘在碘化酶的作用下,与甲状腺球蛋白 分子中的酪氨酸残基结合,生成一碘酪氨酸和二碘酪氨酸,是合成甲状腺素和三碘甲 腺原氨酸的前体物质。过量的碘主要经尿排泄,少部分随唾液、胃液和胆汁排出。 钴在反当动物体内的代谢主要在瘤胃中进行。瘤胃微生物合成维生素供反刍 动物利用。维生素的吸收部位在小肠下部,在胃中,维生素先与胃壁细胞分 泌的黏蛋白结合,以防止其被瘤胃微生物破坏,维生素。运送至回肠部位被吸收, 通过血液循环送达全身发挥作用。反当动物钴的吸收部位在小肠,钴易被小肠吸收, 钴在血液中与运钻蛋白结合后,经肝门静脉进入肝脏并运送到全身。 .奶牛微量元素添加剂的应用现状及研究进展 微量元素是动物机体维持和生产所必需的营养物质,奶牛的微量元素主要从饲料 中获得,基础日粮如玉米、豆粕、麸皮、青贮、苜蓿等中所含的微量元素并不能 满足动物需要,因而在饲料中添加微量元素添加剂成为必然。 微量元素添加剂的发展历程有三个:一是无机盐类微量元素,主要是碳酸盐、硫 酸盐、氧化物、氯化物等形式,如硫酸铜、氯化铁、亚硒酸钠。无机微量元素在机体 内的吸收差,利用率低,会伴随大量的无机盐随粪和尿排泄,给环境带来负担,另外, 各种微量元素在肠道中吸收时会存在拮抗作用,对吸收产生干扰,大量无机盐会破坏 维生素导致维生素用量增加,成本增大。第二是简单有机盐类微量元素主要是乙酸盐、 琥珀酸盐、富马酸盐、乳酸盐等,例如葡萄糖酸锌、富马酸亚铁、柠檬酸铁,其吸收 利用率比无机盐类微量元素有所提高,用量减少,但是,这些有机盐仅是一些简单的 络合物,分子无环状结构,络合强度低,结构不稳定。同时,这些产品成本高,价格 较高,并不能与其发挥的功能相匹配,因此难以得到市场认可,也未能得到广泛的应 用。第三是有机微量元素添加剂,它是由金属元素与配位体通过共价键或离子键结合 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 例如蛋氨酸锌、赖氨酸铜、酵母硒等。形成的不同强度的络合物或螯合物, 有机微量 元素添加剂的研发是世纪年代始于美国,经过近四十年的发展,有机微量元 素 添加剂的生产研发技术已逐渐走向成熟化。有机微量元素很好的弥无机盐类和有 机酸类微量元素的缺点,是一种绿色安全,稳定性高,吸收率高的新型饲料添加剂。 有机微量元素的吸收机制有两种假设,一种是整体被吸收,即有机微量元素以整 体的形式穿过肠黏膜上皮细胞进入血液。另一种假设是有机微量元素络合程度高,大 部分可以过瘤胃,到达小肠黏膜,在吸收位点处水解,以金属离子的形式进入肠上皮 细胞并进入血液。 畜牧业发展与生态保护和应提高微量元素的利用率,在饲料工业中选用合适的有 机微量元素,可提高微量元素利用效率和降低环境污染,更符合绿色农业的要求。从 目前的研究进展来看,无机微量元素具有价格低的优势但利用效率低,污染排放量大 的劣势,氨基酸螯合有机微量元素因成本和质量好坏难鉴定而应用范围不广,动物种 类和生理阶段对理想微量元素模型的需求内容不一样,若能根据动物的生长阶段配合 理想的微量元素比例及剂量,将会提高动物的生产性能和繁殖性能,提高经济效益, 有助于畜牧业可持续发展。 .研究目的和意义 湖北省黄冈市奶牛养殖业的发展迅速,在全省奶牛养殖业中占据重要的地位。围 产期奶牛经历分娩,对营养需求特殊,奶牛的健康也面临着多种考验,因而,在奶 牛围产期添加微量元素和抗氧化剂的研究对提高奶牛围产期健康状况具有重要意 义。 本试验旨在对黄冈地区围产期奶牛进行添加锌、锰、硒和二氢吡啶的研究,从 而改善奶牛围产期的微量元素失衡和氧化应激状况。试验通过采样检测湖北黄冈地 区围产期奶牛日粮和血浆中微量元素含量,分析微量元素盈缺状况,对围产期奶牛 补充有机和无机来源的锌、锰、硒微量元素添加剂,研究其对奶牛生产性能和血液 指标的影响,对围产期奶牛日粮中添加二氢吡啶,研究其对奶牛血液部分生化指标 的影响。华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 第二章试验研究 试验一湖北黄冈地区围产期奶牛微量元素盈缺分析 材料与方法 .试验材料 ..试验牛场 选取黄冈市的所有代表性的规模化奶牛场见表?进行饲料和血液样品 采集,并收集各牛场的饲料配方。 表?试验调查采样牛场 ..试验主要仪器及试剂 主要仪器: 原子荧光分光亮度计.,吉天仪器 一双光束紫外可见分光亮度计,北京普析通用仪器有限责任公司; 原子吸收分光亮度计.,日本岛津公司; 精密电子分析天平, ; 一自动石英双重水蒸馏器,上海沪西分析仪器厂; 电热恒温水浴锅,北京长安科学仪器厂; . 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 离心机,北京医用离心机厂; 一微型旋蜗混合仪,上海沪西分析仪器厂; 主要试剂: 铜、铁、锌、锰、硒、碘、钴标准液:国家液体标准物质中心 硝酸:优级纯,天津市振兴化工试剂酸厂; 高氯酸:优级纯,天津市东方化工厂; 盐酸:优级纯,天津市耀华化学试剂有限责任公司; 硫酸:优级纯,天津市耀华化学试剂有限责任公司; 。 曲拉通一: .试验方法 ..样品采样与处理 配方收集:收集家牛场干奶牛和产后奶牛的饲料配方。 饲料采集与日粮配制:根据各牛场日粮配方表,采集日粮中的各种成分,,按 照 配方配制奶牛全混合日粮。 血液采集:选取家牛场华窑除外围产期奶牛,采集血液,其中妊娠末期 和产后奶牛各头,总计头。奶牛尾静脉采血,注入装有肝素钠的 离心管中,, ,分离血浆,一.保存备用。 离心 ..奶牛日粮中微量元素的测定 奶牛日粮中铜、铁、锌、锰的测定参照/ / :; 奶牛日粮中硒的测定参照/ ?; 奶牛日粮中碘的测定参照/ ?; ?。 奶牛日粮中钴的测定参照/ ..奶牛血浆中铜、铁、锌、锰的测定 样品处理:移取血浆置于的三角瓶中,加混酸硝酸与高氯酸体 积比:,盖上玻璃漏斗,将三角瓶置电热板上消化,小火保持微沸直至 冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,冷却后将消化液移入容量瓶中,用 超纯水少量多次洗涤三角瓶,洗液合并于容量瓶中,定容至刻度,混匀备用, 同时 作试剂空白。 华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 标准液制备:取/的标准储备液,用超纯水倍比稀释成所需浓度的 标准应用液见表?。 表测定血浆中铜、铁、锌、锰系列标准液浓度 , ,, 上机测定:设置好上机分析条件见表?后,将标准应用液、空白液、样 品液分别导入原子吸收分光亮度计,分别在对应的铜、铁、锌、锰空心阴极灯下测 定各个元素的浓度。 表测定铜、铁、锌、锰的仪器条件 ,,, 结果计算: / 厂 为样品中所测元素的含量/;为样品浓度值;空白浓度 ;为样品体积;.为稀释倍数。 值 ..奶牛血浆中硒的测定一氢化物原子荧光光谱法 测定原理:试样经酸加热消化后,在盐酸介质中,将试样中的六价硒还原成四 价硒,用硼氢化钠作还原剂,将四价硒还原成硒化氢,由载气带入原子化器中进行 原子化,在硒空心阴极灯照射下,基态硒原子被激发至高能态,在去活化回到基态 时,发射出特征波长的荧光,其荧光强度与硒含量成正比,与标准系列比较定量。 样品处理:移取血浆置于的三角瓶中,加混酸硝酸与高氯酸体 积比:,盖上玻璃漏斗,过夜冷消化,次日将三角瓶置电热板上消化,黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 小火保持微沸直至冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,稍冷却后加入. 盐酸,继续加热至冒白烟,冷却后将消化液移入容量瓶中,用超纯水少量多 次洗涤三角瓶,洗液合并于容量瓶中,定容至刻度,混匀备用。同时作试剂空 白。 标准液制备:取. /的硒标准储备液于容量瓶中,用超 纯水定容,此标准工作液的浓度为. /。分别取.,.,.,.,., .硒标准工作液于 容量瓶中,加入 水, 盐酸, 铁氰化 钾溶液,用超纯水定容,摇匀待测。此系列标准液的浓度为.,.,., .,.,./。 :将试样测定液导入原子吸收分光亮度计,在波长.处测定 样品的测定 其吸亮度,同时测定试样空白溶液吸亮度,并由工作曲线试样测定液的浓度。 奶牛血浆中碘的测定?砷一铈接触法 .. 测定原理:采用过硫酸铵在?条件下消化血浆,利用碘催化砷铈氧化还原 反应的原理,控制反应温度和时间,于波长下检测体系中剩余的吸亮 度值,计算血清碘含量。 溶液配制: 过硫酸铵溶液./:称取.过硫酸铵,溶于 超纯水中。避光保存,至少稳定个月。 硫酸溶液./:取浓硫酸缓慢加入到去离子水 中,冷却后用水稀释至。亚砷酸溶液./:称取.三 氧化二砷.氯化钠和.氢氧化钠置于的烧杯中,加水约,加热 至完全溶解后冷至室温,再缓慢加入 ./硫酸溶液,冷至室温后用水 稀释至,储于棕色瓶中室温放置,可保存数月。 硫酸铈铵溶液./:称取.硫酸铈铵溶于./ 硫酸溶液中,用水稀释至,储于棕色瓶中避光室温放置,可保存数月。 碘标准溶液:吸取. /的碘标准储备溶液置于容量瓶中, 用水稀释至刻度,此溶液浓度为/,。保存。碘标准使用系列溶液:准确 吸取碘标准中间溶液,.,.,.,.,.,.分别置于 容量瓶中,用水稀释至刻度,此溶液即为碘浓度分别为.,.,.,.,., .,./的标准系列溶液。此液现用现配。 华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 操作程序: 分别取碘标准使用系列溶液及血清各.置于消化管中,注意将标准系列管 过硫酸铵溶液,混匀后置于消化 按碘浓度由高至低排列。各管加入./ 控温加热装置中,于?消化分钟,取下冷却至室温。 .亚砷酸溶液,充分混匀使用混旋器后置?.?恒温水 各管加入 浴箱中温浴分钟。 按下秒表计时,依顺序每管间隔秒向各管准确加入.硫酸铈铵溶液, 立即混匀使用混旋器放回水浴中。 待第一管加入硫酸铈铵溶液后准确反应分钟时,依顺序每管间隔秒于 波长下,用比色杯,以水作参比,测定各管的吸亮度。 标准曲线的绘制:以碘标准使用系列溶液的碘浓度为横坐标,吸亮度为纵坐 标绘 制标准曲线。 样品管碘含量的计算:回归方程法,本方法的碘浓度与测定吸亮度二者 的定量关系式为 ,使用计算器或计算机计算出标准曲线的回归方程, 将样品管的吸亮度代入此方程,计算出样品的碘浓度。 ..奶牛血浆中钴的测定 溶液配制:曲拉通与硝酸混合液:取曲拉通,加硝酸用二次蒸馏 水定容至,用时稀释倍备用。 样品的处理:取 血浆于塑料管中,加入稀释后的曲拉通与硝 酸的混合液,,摇匀。 标准液制备:取. /的钴标准储备液于容量瓶中,用超 纯水定容,此标准工作液的浓度为. /。分别取.,.,.,.,., 容量瓶中,用超纯水定容,摇匀待测。此系列标准 .钴标准工作液于 液的浓度为.,.,.,.,.,./。 :移取 消化液,加. 盐酸和. 铁氰化钾,用水稀 样品的测定 ,开始测定。 ,摇匀,待测。设定好仪器条件后,稳定 释至刻度 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 结果与分析 .围产期奶牛日粮中微量元素的含量 ..围产前期奶牛日粮中微量元素的含量 表干奶牛日粮中微量元素的含量 注:牛场编号与表相同美国、加拿大国家科学研究委员会 : 由表可以看出,各牛场干奶牛日粮中铜的含量差异较大,、、三种低于推 荐量,、、在推荐量范围内,、分别超出最高推荐量的.%、.%; 铁的含量全部高于推荐量,且超标严重,是最高推荐量的..倍不等;锌的 含量有三种、、在推荐范围内,另五种高于推荐量,其中、、、分 别超出.、.、.、.倍,超标最严重,超出.倍;锰的含量只有 在推荐量范围内,其它七种?,、、分别超出推荐量.、.、.、 .、.、.、.倍;硒的含量有四种、、、高于推荐量,四种、 、、偏低,分别低于推荐量.%、.%、.%、.%、:碘的含量严重 高于推荐值,其中、、、超标严重,是最高推荐量的.、.、.、 .倍,、、、分别是推荐量的.、.、.、.倍;钴的含量都高于 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 .围产期奶牛血浆中微量元素状况 表干奶牛血浆微量元素含量 牛场编号 锌/ 宅孟// 碘/ 钴/ 铜/ 铁/ 士. .士. .士. . 士. .:. .. . .士. 士. .士. .士. .士. .士. .士. .士. . .:. .士. . 士. .士. .士. .士. . 士. .士. .. .士. .:. .士. .士. .士. .士. .士. .土. .土. .士. .士. .土. 圭. .士. . 士. .士. .. .?. .士. . .土. .?. .士. .士. .士. .士. .士. .~. .~. .~. .?. . . .. 正常值 通过表?得出:干奶牛血浆中铜含量有种略高,其它在. /以上; 血浆中铁含量有种偏低,种正常,种高于正常值;血浆中锌、锰、硒含量均低 于正常值:血浆中碘含量均在正常值范围内;血浆中钴含量有种偏低。 表产后奶牛血浆微量元素含量通过表.得出:产后奶牛血浆中铜含量均在正 常值范围内;铁含量有种高于 正常值;锌、锰、硒含量都低于正常值;碘含量都在正常值范围内;钴含量有种低 于正常值。 华中农业大学 届硕士研究生学位毕业论文 讨论 .围产期奶牛日粮中微量元素的含量 通过对黄冈地区奶牛全混合日粮中微量元素的测定,发现微量元素铜、铁、 尤其以铁为甚;奶牛血浆中锌和锰的含量也锌、锰、碘均存在不同程度偏高, 偏低。 饲料中只要有一种微量元素过量,微量元素的总体利用率就会下降孙安权等, 。铜、铁、锌、锰的主要吸收部位都在小肠,与特异性载体结合而转运进体内 姜成刚,。牛对铁的最大耐受量为 /,,饲粮中高含 量的铁能妨碍其它微量元素尤其是铜和锌的吸收,每千克饲粮中含铁 , 即可导致牛体内铜的耗竭,。本实验中日粮中的铁在.?. /范围内,对铜和锌的吸收会产生干扰。 .围产期奶牛血浆中微量元素的含量 产奶牛和干奶牛血浆中微量元素含量状况基本一致产后奶牛血浆中锰含量要高 于干奶牛,可见产后奶牛血浆中锰含量上升,这与试验二中的测定结果一致,干奶 牛和产后奶牛血浆中铁含量普遍偏高,这与奶牛日粮中高铁的状况有关;血浆中铜 和铁的含量近似成反比,干奶牛血浆铜的含量由低到高依次为:、、、、、 、,铁的含量由高到低依次为:、、、、、、,产后奶牛血浆中铜的 含量由低到高依次为:、、、、、、,铁的含量由高到低依次为:、、 、、、、,说明过高的铁会干扰小肠对铜的吸收,降低饲料中铜的利用率, 干奶牛和产后奶牛血浆中锌、锰、硒含量都偏低,说明围产期奶牛存在这种机体特 性,日粮中过高的铁含量干扰了锌和锰的吸收,导致奶牛机体出现缺锌和缺锰。进 一步说明,饲料中微量元素含量失衡影响机体对其吸收。黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 试验二围产期奶牛添加锌、锰、硒对其生产性能及血液指 标的影响 材料与方法 .试验材料 ..试验动物管理和试验日粮 本试验在湖北扬子江生态牧业科技有限公司奶牛养殖场进行。奶牛饲养方式采 用双列对头固定颈夹式饲养,舍内配备卧床,奶牛自由采食、自由运动。各处理组 饲养管理一致。喂料方式为全混合日粮。每日饲喂次,分别于:、:饲 喂,每次喂料结束后散放到运动场自由运动,饮水槽保证足够清洁的饮水。 试验用微量元素添加剂:蛋氨酸锌、蛋氨酸锰购自广东雅琪生物科技有限公司, 酵母硒购自成都施普诺生物技术有限公司,硫酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠购自湖北信 银河化工有限公司。 使用时将微量元素添加剂先与少量饲料混匀,再逐级扩大直至与所有饲料混 匀。 试验基础日粮组成及营养水平见表.。华中农业大学届硕士研究生学位毕业 论文 表 产后奶牛饲料配方及日粮营养成分分析 一 表 干奶牛饲料配方及日粮营养成分分析含量% 微量元素 配比% 常规营养成分 含量/ 日粮组成 . . . 绝干物质 铜 玉米 . . . 酸性洗涤纤维 铁 棕榈仁粕 . 锌 . . 中性洗涤纤维 麸皮 . 锰 . . 粗蛋白 豆粕 . 硒 . . 粗脂肪 棉粕 . 碘 . . 钙 芝麻粕 . . 磷 . 钴 . 磷钙 . 石粉 . 食盐 . ? 、? . 麦尔 . 青贮 . 羊草 合计 . 黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 ..试验动物和试验设计 试验动物根据胎次.士.、体重相近.士.、预产期相近的原则, 选取头健康怀孕的中国荷斯坦奶牛。试验为单因素随机区组实验设计。试验 设 计见表?。 表试验设计 ? .试验方法 ..样品的采集 试验预试期和正试期,预试期天,正试期为奶牛产前天至产后天。血 液采集:在奶牛产前天、分娩当天、产后天尾静脉采集全血左右,注 入到肝素钠抗凝管中,, ,分离血浆,将血浆分装到. 离心 离心管中,于一.?冰箱中保存备用。 :在奶牛分娩之后泌乳周期的前天、第天、第天分别采集早中晚 奶样采集 三次的奶样,并按照::的比例混合均匀,其中装入检测专用采样 ,并加入防腐剂,送武汉市奶牛检测中心,另奶样于.?冰箱中 管中 保存备用。 ..奶牛生产性能的测定 牛奶中乳脂率、乳蛋白、乳中体细胞数、总固形物含量均由武汉市奶牛生产 性 能测定中心测定,奶牛的产奶量由挤奶设备自动记录,奶牛产后约一周后由 产房调 到挤奶厅挤奶,因此试验中记录产后天至天的产奶量。华中农业大学届硕士 研究生学位毕业论文 。.奶牛血浆中锌锰硒的测定 方法同试验一。.和.。 ..牛奶中锌锰的测定 样品处理:移取牛奶置于的三角瓶中,加混酸硝酸与高氯酸体 积比:,盖上玻璃漏斗,将三角瓶置电热板上消化,小火保持微沸直至 冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,冷却后将消化液移入容量瓶中,用 超纯水少量多次洗涤三角瓶,洗液合并于容量瓶中,定容至刻度,混匀备用, 同时 作试剂空白。 标准液制备,上机测定,结果计算:同试验一.. ..牛奶中硒的测定一氢化物原子荧光光谱法 样品处理:移取牛奶置于的三角瓶中,加混酸硝酸与高氯酸体 积比:,盖上玻璃漏斗,过夜冷消化,次日将三角瓶置电热板上消化, 小火保持微沸直至冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,稍冷却后加入. ,继续加热至冒白烟,冷却后将消化液移入容量瓶中,用超纯水少量多 盐酸 次洗涤三角瓶,洗液合并于容量瓶中,定容至刻度,混匀备用。同时作试剂空 白。 标准液制备:取. /的硒标准储备液于容量瓶中,用超 纯水定容,此标准工作液的浓度为. /。分别取.,.,.,.,., .硒标准工作液于 容量瓶中,加入 水, 盐酸, 铁氰 化钾溶液,用超纯水定容,摇匀待测。此系列标准液的浓度为.,.,., .,.,./。 测定原理,原子荧光分光亮度计的仪器条件及样品的测定: 同试验一.. ..奶牛抗氧化指标的测定 采用南京建成生物工程研究所抗氧化指标测定试剂盒,检测血清中的超氧化 物 含量。具体测定步骤参照试剂盒 歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶? 操作说明书。 .数据分析 试验数据经整理后,所有试验数据均用平均值?标准差表示。应用.黄冈市围 产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究 软件检验进行组间差异显著性比较,显著性比较时,.表不差异显著,. 表示差异极显著。 结果与分析 .添加锌硒锰对围产期奶牛生产性能的影响 ..日粮添加不同来源锌锰硒对产奶量的影向/ %标准乳日均产量 %给奶牛添加有机蛋氨酸锌、蛋氨酸锰、酵母硒和无机硫酸锌、硫酸表产后 锰、 亚硒酸钠来源的微量元素添加剂,发现有机组、无机组、对照组之间日均产 奶量 ..、..、..,均在?每天之间,各组之间 没有显著性差异。 ..日粮添加不同来源锌锰硒对乳成分的影响 表乳成分比较表组别 脂肪% 蛋白% 乳糖% 总固形物% 非脂乳固% .士. .. .士. .士. .士. 产后 有机组 .士. .士. .:. .士. 无机组 .士. .士. .士. .. .士. .士. 对照组 .士. .. .士. .:. .士. 产后 有机组 .. 无机组 .士. .. .. .士. .士. .士. .:. .士. .士. 对照组 产后 有机组 .士. .. .士. .士. .:. 无机组 .. .. ... 士.曲 .士.曲 .士. .士. .士. .?. .士. 对照组华中农业大学届硕士研究生学位毕业论文 由表看出:产后一天,初乳中有机组脂肪含量比无机组、对照组分别高 、.%,乳糖含量比无机组和对照组高.%、.%;无机组蛋白、总固 .% 形物、非脂乳固形物含量分别比有机组高.%、.%、.%,分别比对照组高 、.%、.%,各组间差异均不显著。 .% 产后天,有机组脂肪、总固形物、非脂乳固形物含量分别比无机组高.%、 .%、.%,分别比对照组高.%、.%、.%;无机组蛋白和乳糖含量分 别比有机组高.%、.%,分别比对照组高.%、.%。 产后天,有机组脂肪、蛋白、总固形物、非脂乳固形物含量高于对照组,其 中总固形物、非脂乳固形物含量差
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