牛血清蛋白+鱼精蛋白

牛血清蛋白+鱼精蛋白 牛血清蛋白(bovine serum albumin, BSA) 牛血清蛋白 牛血清白蛋白(BSA)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。 牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。 western blot: 蛋白免疫印迹法即蛋白质印迹杂交，采用标记第二抗体的间接免疫检测反应。 Blocking agent: 阻断剂，阻滞剂，阻滞药。 目录 基本信息 用途介绍 BSA结构 BSA作用 牛血清蛋白介绍 基本信息 【词条中文名称】牛血清白蛋白 【中文同义词】蛋白粉;牛白蛋白;卵蛋白粉;血清蛋白;血清白蛋白;牛血蛋白质;复合氨基酸;牛血清蛋白;牛血清白蛋白; 血清白蛋白(牛) 【词条拼音名称】Níuxuèqīng báidànbái 牛血清白蛋白 【词条英文名称】Bovine albumin 【词条英文别名】Bovine serum albumin 【词条英文同义词】nhsa;BSA-C;AC-BSA;ALBUMIN, PIG;albumenpowder;SERUM ALBUMIN;ACETYLATED BSA;BSA ACETYLATED;Bovine albumin;BSA, METHYLATED 【词条分类性质】名词词组，偏正词组 【词条适用范围】医学领域，药学领域 [1]【CAS数字登录号】9048-46-8 BSA结构 CBNumber: CB5107573 分子式: N/A 英文别名: Bovine serun albumin 化学性质 牛血清白蛋白 溶解度 : PBS: >40 mg/mL (PBS在医学词汇中表示磷酸盐缓冲液，用于分子克隆及细胞培养，pH=7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾。 form : lyophilized powder Merck : 13,8542 稳定性: 稳定 ，不兼容氧化剂:强酸;储存条件 : 2-8?C 用途介绍 1、生化研究、遗传和医药研究 2、医药保健食品、调味品 3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用 生产方法 以牛血为原料分离出血清，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得。 贮存方法 每10g加100ml水进行溶解，或用 PBS溶解也可，视用途而决定。然后分装成小支。若不使用防腐剂可贮存在零下20或30摄氏度的恒温柜中，若使用防腐剂(如0.1%叠氮化钠)则可贮存在零上4摄氏度的环境下。一般可存放数月不变质。防腐剂可能对牛血清白 [1]蛋白的效果造成影响，应慎用。 BSA结构 成分结构 牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot [1]中作为Blocking agent。 BSA作用 BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保护”或“载体”作用，不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可实现重复切割。在37?，酶切反应超过1h时，BSA可以使酶更加稳定，因为在不含BSA的反应缓冲液中，许多限制性内切酶在37?下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制 [1]限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。 1.BSA是酶的稳定剂，防止酶的分解和非特异性吸附; 2.BSA能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的至于作用机理我不是很清楚，可能是因为它结构中有17个二硫键，和一个巯基，巯基的化学反应很活泼，二硫键有抗氧化还原的作用，因此可与多种阳离子，阴离子和小分子结合; [1] 3.BSA能防止酶吸附到管壁而损失。 牛血清蛋白介绍 牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方测试数据为70 000，这一数据是在做PCR的时候使用的数据。 牛血清白蛋白分子式 牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。 牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。 [1]一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。 用途 1、特纯级牛血清蛋白 用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂，生化试验等。 电场対超感牛血清白蛋白截留率的影响 性状:淡黄色干燥粉末 2、无脂肪酸牛血清蛋白 用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。 性状:淡黄色干燥粉末 3、无蛋白酶牛血清蛋白 用途:用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。 性状:淡黄色干燥粉末 4、细胞培养级牛血清蛋白 用途:无血清培养基的蛋白添加剂，供细胞培养使用。 [1]性状:淡黄色干燥粉末白蛋白 测定标准曲线 [2]一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测 的一项基本技术。 测定方法 1. 凯氏定氮法 2. 双缩脲法 3. Folin-酚试剂法 4. 紫外吸收法 [1]5. 考马斯亮蓝法 标准曲线制作 试剂 1. 考马斯亮蓝试剂: 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01% (W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇，8.5%(W/V)H3PO4。 2. 标准蛋白质溶液: [1]纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 器材 1. 722S型分光光度计使用及原理。 [1]2. 移液管使用。 制作步骤 试管编号 0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml标准蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂 (ml) 5 5 5 5 5 5 5 摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色 3、以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug)，在坐标轴上绘制标 准曲线。 (1)、利用标准曲线查出回归方程。 (2)、用公式计算回归方程。 (3)、或用origin作图 ，测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6 一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。 [1](4)、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。 含量的测定 样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内)，依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm，然后利用标准曲线或回归 方程求出样品蛋白质含量。 [1]一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。 注意事项 1. 玻璃仪器要洗涤干净。 2. 取量要准确。 3. 玻璃仪器要干燥，避免温度变化。 [1]4. 对照:用被测物质以外的物质作空白对照。 牛血清白蛋白(BSA)的分类及应用 由于牛血清白蛋白(BSA)具有多种产品样式，可满足不同种的应用。 目前网上的信息大多模棱两可，有牛血清白蛋白，也有牛血清白蛋白v组分等，很多供货商对其区别也是不清楚的;另外，市场上还提供无蛋白酶、无DNase及无RNase、无脂肪酸、微生物级、试剂级、诊断分析级等不同等BSA粉末，因此如何选择合适的BSA产品是很重要的前提。 一般来说，普通的BSA粉末或者第五组分适合于细胞和组织培养，也可以用于一些蛋白补充物;而其它无蛋白酶、无DNase及无RNase、无脂肪酸等处理的BSA则适合于更多的免疫学、蛋白学等应用，作为封闭剂、蛋白Marker、半抗原载体以及蛋白稳定剂等。 下面做一下简单的介绍: 1、标准级BSA 经热处理的普通BSA产品，可作为组织细胞(微生物、动物及昆虫细胞等)培养养料和培养成分以及蛋白分子量标准组份，为性价比较高的BSA产品，如EquiTech-Bio的BAH62系列产品。 2、BSA第五组分 BSA第五组分较普通的BSA纯度更高。BSA第五组分使用Cohn方法纯化而来，是生物技术级的产品，一般可用于细胞培养，也可作为半抗原载体、保护剂以及蛋白补充物对照等。如EquiTech-Bio的BAC62或BAC63系列产品。 3、无IgG试剂级BSA 试剂纯级BSA比BSA第五组分具有更好的纯度，该粉末中不含有可能会干扰分析的球蛋白IgG成分。可作为组织细胞培养养料和培养成分以及蛋白分子量标准组份。如EquiTech-Bio的BAH64系列产品。 4、无蛋白酶BSA 无蛋白酶的牛血清白蛋白可用于细胞培养生产蛋白实验，尤其适用于表达对蛋白酶活性敏感的蛋白。另外无蛋白酶的牛血清白蛋白也非常适合。如EquiTech-Bio的BAH67系列BSA产品和BAC65系列第五组分产品。 5、无脂肪酸BSA 无脂肪酸BSA可用于脂肪代谢相关分析的载体蛋白，也可与某种特异性的脂肪酸结合以形成白蛋白，可应用于增强细胞培养体系的性能;若实验中脂肪或脂肪酸的存在影响激素或者胆固醇的读数时，这个产品是首选。如EquiTech-Bio的BAH66系列。 6、低内毒素BSA 低内毒素牛血清白蛋白是细胞和组织培养非常理想的选择。可作为无血清和合成培养基营养补充剂的载体，另外作为实验室的一般试剂用来稳定和稀释敏感蛋白溶液，也可以作为诊断、分析工具，如ELISA。如EquiTech-Bio的BAH系列，内毒素含量低于1.0 EU/mg。 7、无蛋白酶/IgG BSA 不含有蛋白酶以及RNase酶活性，同时不含IgG，纯度等级更高，作为稀释液或封闭液应用于EIA和ELISA等试验中。如Jackson的001-000-16X系列以及EquiTech-Bio的BAH67(无蛋白酶/IgG，也不含RNase)系列产品。 8、诊断级BSA 诊断级牛血清白蛋白粉末是专门用于减少可能会产生背景干扰以及细胞培养体系抑制等因素，不含蛋白酶、生物负载以及IgG，具有很低活性的内毒素 (低于3.0 EU/mg)。可用于蛋白标准品、稀释剂、偶联物或者酶稳定剂，也可以应用于高灵敏度的免疫分析实验、细胞培养以及杂交实验等。如EquiTech- Bio的BAH68系列产品。 鱼精蛋白 Protamine Sulfate (PS) 百科名片 鱼精蛋白 鱼精蛋白是一种碱性蛋白质，主要在鱼类(如蛙鱼、蹲鱼、鲱鱼等)成熟精子细胞核中作为和DNA结合的核精蛋白存在。鱼精蛋白发现于1870年，到1940,1960年间，正式用作抗菌剂的研究才盛行起来。鱼精蛋白在分子组成上，与胶原蛋白没有根本性不同，都是由不同种类的氨基酸组成。近两年来成为新兴的美容产品，也被制成医用注射液，用于因注射肝素过量所引起的出血，且无其他药品可替代。 目录 简介 药理作用 不良反应 用法用量 生产方法 短缺现象 注意事项 简介 “鱼精蛋白”是从鱼类新鲜成熟精子中提取的一种碱性蛋白质的硫酸盐，用于因注射肝素过量所引起的出血，且无其他药品可替代。目前，从技术方面来讲，只能从鱼的精子中提取，不能化学合成，所以限制了产量。 鱼精蛋白发现于1870年，到1940,1960年间，正式用作抗菌剂的研究才盛行起来 鱼精蛋白在中性和碱性介质中显示出很强的抑菌能力，并有较高的热稳定性，在210 ?条件下加热1( sh仍具有活性，同时抑菌范围和食品防腐范围均较广，它对枯草杆菌、芽孢杆菌、干酪乳杆菌、胚芽乳杆菌、乳酸菌、霉菌、芽抱耐热菌和革兰氏阳性菌等均有较强的抑制作用，但对革兰氏阴性菌抑制效果不明显。 【中文名称】 硫酸鱼精蛋白 【产品英文名称】 Protamine Sulfate [1]CAS:9012-00-4 EINECS:232-726-0 【生产企业】上海第一生化药业有限公司 【功效主治】 主要用于因肝素钠或肝素钙严重过量而致的出血症及自发性出血，如咯血等。 【化学成分】 本品为从适宜的鱼类新鲜成熟精子中提取的一种低分子量碱性蛋白质的硫酸盐。 【批准文号】 国药准字H23021620 【用途】 用于肝素注射过量而引起的出血，及自发性出血如咯血等。 用作防腐剂时，因其无味无臭，对人体无害，因而使用量不受任何限制，根据需要可添加到满意的抑菌效果，但其添加量大，成本 [2]较高，只能作为高附加值的食品或功能食品的防腐剂。 药理作用 硫酸鱼精蛋白是一种强碱，能与强酸性肝素钠或肝素钙形成稳定的盐而使肝素失去抗凝作用。本品作用迅速，静脉给药5分钟内即发生中和肝素的作用。但部分肝素可从复合物中再次解离。中和1单位不同来源的肝素所需鱼精蛋白量略有不同，1mg本品可中和90单位自牛肺制备的肝素钠或115单位自猪肠黏膜制备的肝素钠，或100单位自猪肠制备的肝素钙。鱼精蛋白—肝素复合物在体内代谢转 [2]化过程尚未被阐明。鱼精蛋白也是一种弱抗凝剂，过量可引起凝血时间指标短暂轻度延长。 不良反应 ?本品快速静脉注射可引起低血压、心动过缓、肺动脉高压、呼吸困难、短暂面部潮红及温热感。缓慢静脉注入，10分钟内不超过50mg，可避免上述反应。 ?对鱼过敏，过去曾接受过本品或含鱼精蛋白的胰岛素(如中性鱼精蛋白胰岛素)者，易发生抗鱼精蛋白IgE介导的高敏或过敏反应。 ?男性不育症或输精管切除者中某些人易发生对鱼精蛋白高敏反应。在输注本品前给这类患者应用皮质激素或抗组胺药，可防止过 [2]敏。5足量鱼精蛋白中和肝素后8,9小时，个别在18小时后，部分患者可发生肝素反跳和出血。 用法用量 抗肝素过量:静注，用量与最后一次肝素的用量及间隔时间有关。每1mg鱼精蛋白可拮抗100单位肝素。由于肝素在体内降解迅速，在注射肝素后30分钟，每100单位肝素，只需用鱼精蛋白0(5mg;每次用量不超过50mg，需要时可重复给予。抗自发性出血:静滴， [2]5,8mg/kg体重/日，分2次，间隔6小时，每次以300,500ml生理盐水稀释后使用，3日后改为半量。 生产方法 鱼精蛋白是把鱼的精子的头部分破碎离出来的一种碱性蛋白，具有一定生物活性。从技术方面来讲，只能从鱼的精子中提取，不能化学合成，就限制了产量。 根据国家食品药品监督管理局数据库显示，中国有三家公司拥有鱼精蛋白的批文，分别是多多药业有限公司、悦康药业集团北京凯悦制药有限公司和隶属于上药集团的上海第一生化药业有限公司。 截止2011年，中国仅有上海第一生化药业有限公司一家生产鱼精蛋白，但2011年7月已暂时停产。 短缺现象 自2011年7月底开始，南京、武汉、南通等地鱼精蛋白纷纷告急，很多心脏病手术被迫停止。广州、上海等大城市的主要医院，暂时还可供应现有的心外科手术用量。 鱼精蛋白紧缺是由于生产减少，利润低是主要原因，从技术方面来讲，鱼精蛋白只能从鱼的精子中提取，不能化学合成，所以限制 [3]了产量。 注意事项 本品仅供静注，应缓慢给药。给药后即需作凝血功能检查。 ?对鱼过敏者慎用本品。 ?静注速度过快可致心动过缓、低血压、胸闷、呼吸困难、颜面潮红等。 ?妊娠及哺乳妇女应用本药必须有明确指征。至于本品对生殖能力的影响，是否有致畸、致癌作用，是否经乳汁分泌等问题，均缺乏动物实验资料。 [2] 本品宜单独给药，与某些抗生素(如青霉素、头孢菌素等)理化性质不相容。 相关新闻 一种每支售价仅十几元的叫做“鱼精蛋白”的药品，近一个多月来却难坏了各大医院需要做心脏手术的专家。厂家停产，又没有替代品可用，这种药在全国多省市都出现缺货的情况。本市部分医院也受到牵连，非紧急手术只能临时叫停。以至安贞医院、阜外医院这样的“用药大户”，也被迫到用量相对较小的医院去“收购”。 多省市面临缺货 自今年7月底开始，南京、武汉、南通等地鱼精蛋白纷纷告急，很多心脏病手术被迫停摆。广州、上海等大城市的主要医院，暂时还可供应现有的心外科手术用量。记者了解到，我国仅有上海第一生化药业有限公司一家生产鱼精蛋白，但目前已暂时停产。 业内人士分析，药企停产，一个是原料的来源成为问题，一个就是生产线的问题。在采访中，一位不愿透露姓名的三甲医院药剂科负责人表示，鱼精蛋白非常廉价，利润低，一支注射液卖十几元，这一售价维持了几十年，这期间，物价不知翻了多少倍，原材料价格、人工成本、经销成本等无一不暴涨，低薄利润之下，药企自然缺少生产积极性。 非紧急手术叫停 鱼精蛋白竟然成为稀缺产品，北京的医院如何应对,北京军区总医院附属八一儿童医院心脏科主任周更须告诉记者，鱼精蛋白短缺在他们医院已经持续一个多月了。他一般每日做两台手术，最少需要一盒(5支)鱼精蛋白，但现在医院库存一般只能保证一台手术的用量。因此，手术只能就急就重症，一些非紧急的常规手术就得暂停或延后。 “为了保证病人的手术，我们只能到其他医院借或者想买，但是各家的库存储备都很紧张。”周主任说。 另外，记者获悉本市多家非心脏病专科医院的鱼精蛋白库存都很紧张，也已经有1个多月处于缺货的状态。