灵芝提取物对红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响

灵芝提取物对红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响 灵芝提取物对红细胞膜磷脂成分及电泳率 的影响 第28卷第2期 2002年4月 曲阜师范 】c)umaIofQufu 大学 Nom~lUniversity V0128No2 Apr.2002 灵芝提取物对红细胞膜磷脂成分及电泳率的影响 徐承水?,王春梅?,张祥沛? (第一作者,男.45岁,教授;?曲阜师范大学生物系,273165.山东曲阜市;?临沂卫生学校,276000,山东临沂市) 摘要:采用家兔红细胞和血小板,薄层色谱扫描法和显擞(细胞)电泳法,探讨灵芝对家兔红细胞膜磷 脂成分及电泳率的影响,结果显示:实验组红细胞膜磷脂成分中磷脂酰胆碱显着增多(P<0.01),而鞘磷脂 类,磷脂酰乙醇胺都程度不同的减少(p<O.05),特别是磷脂酰丝氨酸含量,鞘磷脂类/磷脂酰胆碱及磷脂酰 丝氨酸/磷脂酰胆碱比值显着减小(<001).血小板及红细胞的电泳率显着高于对照组.明灵芝对维持 细胞膜的稳态有重要作用. 关键词:灵芝;红细胞;血小板;膜磷脂;电泳率 中图分类号:Q一29文献标识码:A文章编号:i001—5337(2002)02—0093—02 灵芝(Ganodervnalucidiu~,n)是祖国医学宝库 中具有传奇色彩的滋补珍品,其能养心安神,补益气 血,健脑定惊,止咳平喘.近代医学研究发现,灵芝 具有强心,改善冠状动脉血液循环,除血脂,降低心 肌耗氧量和耗糖量,增强心肌对机体缺氧的耐受力 等作用,对治疗神经衰弱和冠6-病,肝炎等方面作用 明显_10j.但有关灵芝对细胞膜磷脂和所带电荷的 影响尚未见报道.我们利用灵芝水提取液(GdLe), 通过对家兔的动物实验.研究了灵芝对红细胞膜磷 脂成分及电泳率(EPM)的影响,旨在揭示灵芝在维 持质膜稳定性方面的作用,这不仅为膜生理学研究 提供了资料,同时也为开发研制灵芝营养保健食品 和药物提供了实验依据 1材料与方法 1.1材料 11.1灵芝水提取液的制备取市售灵芝洗净 粉碎,按每100g灵芝加温水800mL浸泡,36h后 浓缩浸泡液至500rnL备用. 1.1.2实验动物选用120,150d,体重2.3-2 8kg的健康白色雄性家兔(日本大耳白),由济南北 园实验动物养殖场提供 1.2方法 121动物试验设立对照和实验2组,每组6 只对照组采用标准基础饲料(符合AOAC动物营 养标准)饲喂,实验组采用标准基础饲料添加GdLe ?收藕日期:2001—01一I2 饲喂,GdLe终含量为100mL?k一.对照及实验饲 养环境条件一致,温度27?1?,相对湿度6O%,自 然光照,饲养28d 1.22红细胞膜磷脂成分测定受试动物于第 29d清晨空腹耳缘静脉取血,采用薄层色谱扫描 法【j测定以下磷脂成分:磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline,PC);磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserines, PS),磷脂酰乙醇胺(phosphatidvIethanolamines, PE)和鞘磷脂类(sphingomyelin,SM). 12.3血小板与红细胞EPM的测定血小板 EPM的测定按李建生等E9]方法进行;红细胞EPM 的测定:用取血量管从兔的耳缘静脉取全血1O m1,注入3mL肝素抗凝的pH7.4M/l5的磷酸缓 冲液中,在血球记数板上计数并调节至红细胞数为 1.5万/rnm3. 1.24电泳装置采用北京六一厂生产的WD一 9408A型显微(细胞)电泳系统测量条件:电压4o v,电流1mA,温度25?0.5?.每个样品分别测定 20个血小板和红细胞往返电泳时间,测量及计算方 法按文献lmJ进行 均数差 12.5统计学方法结果以lz?表示, 异显着性用t检验判定 2结果 2.1~az1.e对红细胞膜磷脂成分的影响 实验组家兔红细胞膜磷脂成分与对照组比较 94曲阜师范大学(自然科学版)2002阜 变化较复杂.其中SM,PE含量有不同程度的降低 (P<0.05),PC含量显着增高(p<0.叭),平均增高 率为22.39%特别是PS含量,SM/PC比值和PS/ Pc比值均显着降低(P<OO1),见表1. 表1GdLEI对膜磷脂成分的影响(mol~5x1012RBC)(i?s) 与对目相比:p<O05,p<001 2.2~3lLe对血小板,红细胞电泳率的影响 实验组家兔血小板及红细胞的电泳率与对照组 比较均有显着提高(P<OO1),血小板EPM平均提 高26.12%,红细胞EPM平均提高2035%表2. 其EPM均有明显提高,这提示我们,灵芝有降低血 小板或红细胞之间凝聚的作用.同时也减弱了二者 与血管内皮的吸附,从而增强血小板和红细胞的功 能,促进血液流动,有效避免微血栓的形成. 表2GdLEI对_血小板细胞电塑的s)参考文献: 与对照比较:*P<O.01 3讨论 灵芝之所以能影响红细胞膜磷脂成分及其血小 板和红细胞电泳率,在于其本身含有的复杂药用成 分,磷脂(PL)作为红细胞膜结构和功能的基本成 分,与红细胞形态,血液凝固及血液粘滞性密切相 关-1l_其中PS,PE和PS/PC有明显的促凝作用 标志着红细胞粘滞性增强,导致血栓性 它们的增高, 疾病的发生.被认为代表衰老标志的老年指数SM/ PC的增高,则表明红细胞膜脆性增加,变形能力下 降,从而降低红细胞的功能.由于GdLe的作用,实 验组红细胞膜的SM,PE和PS水平的降低和PC水 平显着升高,使SM/PC比值减小,其结果增强了红 细胞的韧性和变形能力;PS/Pc比值的减小, 红细胞的粘滞性下降,抗凝作用增强由此看来,灵 芝对维持红细胞的正常功能,避免或减少血栓性疾 病的发生均有重要作用电泳率是细胞膜生理指标 的重要体现,它反映r红细胞膜的带电状态,膜表面 的适宜电荷是膜功能所必需的J.通常情况下,血 小板,红细胞及血管内皮细胞膜表面均带有负电荷, 适宜的荷电量对于防止血小板之间,红细胞之间的 凝聚以及二者与血管内皮的粘附起重要作用.实验 组由于GdLe的作用,无论是血小板,还是红细胞, [1]郭春沅灵芝的药理研究综述[J].中国食用菌,1998, 17(3):34-35 [2】武变英,椽月清.灵芝浸液对小鼠免疫功能的调节作用 [J]河北大学(自然版),1999,19(1):84-87 [3]黄兆胜,邓响潮段术灵芝对果蝇寿命及小鼠LPO和 SOD的影响[J]广州中医药大学,1997,14(2):105 —— 107. [4]盂国良.李风玲.灵芝漫提液的遗传毒性研究[盯.食用 菌,1997,19(4):7. [5镣承水.灵芝抗衰老作用的实验研究[J]淄博师院学 报,2000,2:69--71. [6]徐承水.灵芝降血糖作用的实验研究[J]医学研究通 讯,2000,29(6):48,49 [7:赫承承.灵芝影响果蝇寿命的实验研究[J]福建师范太 学,2000,4: [8]李立.磷脂与疾病及其研究方法[M].银川:宁夏人民出 版社,199296--97 [9]李建生,许峰,姚培发,等.老年人血小扳聚集功能,颗粒 膜蛋白及电泳率测定的研究[J]老年学杂志,1993;13 (1):30. [10]周本正.实用电泳及免疫电泳技术[M].武汉:湖北科 学技术出版社,1988. [11]KuypersFA,RoblofsenB,BerendsenW.Shapec}~,lges inhun.anerythrccytes~nducedbyreplac~nentofthern- tirepl~phatldylcholinewithsoe目eonta[ningvarious fattya,'ids[J]CellBiology,1984,99(6):2260. [12j李建生,许峰,姚培发,等老年腔隙性脑梗塞患者血小 板功能和电泳率及颗粒蛋白变化及意义[J].中国老年 学杂志,1996.16(1):43--44 (下转第98页) 98曲阜师范大学(自然科学版)2002牟 形成自己独特的风格和绝招 参考文献: [1]谢亚龙中国优势竞技项目制胜规律[M].-tl:g..:人民体育出版社,1992. [2]郑吾真.竞拄体操训练学[Mj北京:北京体育学院出版社,1990. [3]李思民.对90年代世界女子竞拄体操运动的发展特征的研究[J]体育科 学,2001(1):35--38 [4李思民.第27届奥运会男子体操比赛技术分析[J]中国体育科技,200t(5):44--46. [5]国际体操联台会女子竞技体操评分规则(1997,2000)[S]国家体委训练竞赛四 司.1997年8月 STUDYONDE?LOPINGSITUA11oN0FWORLDWOMENS COMPETITIONGYMNASTICSINTHE27th0LYMPICGAMES LJS—rain 【【】rofPhysicalFAuea6on,QufuN)nTUniversityt273165(sl-bg,PRC) Abstract:BymP~nsofdocumentaryinvestigationandrediostatistics,theauthoranalysestheresults,move— mentdifficultyandperformanceofthepowerfulteamsandplayersinteamcompetition,allaroundindividualand individualcompetitionintheOlympicGamesandcomparesthosewith33thand34thW0rldGymnasticsCham— pionship.TheresultshowsthatthepatternofthemovementappearsstabilityandthestrengthofChinesewom— ei1'steamincreases.TheallroundcompetitionappearsbalancechamcteHsticandthecompetitionofthisitem mainlydependsonstableperfomaaneeinfouritemsandhasnoweakitem.Theindividualcom petitionappears strongpointcharacteristic,thedevelopmentofthetechniquerequiresthebreakthroughindifficultyandorgani— zationandpayattentiontotheardsticsofmovementandthestabilityoflandin~g. Keywords:OlympicGames;competitiongymnastic~;developingsituation (上接第94页) THEINFLUENCEOFGLOSSYGANODERMA(Ganodermalucidium) T0M咂MRANEPHOSPH0LIPIDCOMP0SITIONAND ELEC豫OPHORESIsMOBILITyRATE0FREDBLooDCELL XUCheng—shui~, WANGChunmei~, ZHANGXiang-pei? (? Del~'tmentofBiology.Q[uNo.~aalUniversity273165Qufu;~)LinylSchoolofHealth,276000tLinyi,s}l8nd?g.PRC) Abstract:Bthethln-layerchromatographyandmicro(cel1)electrophoresis,redbloodcellsandplateletsof rabbitswereusedtOobserveinfluenceofglce,syganoderma(Ganodermalucidium,GdL)onphospholipidcompo— sitionofreeleellmembrane,plateletandredeel1electrophoresismobility(EPM).Theresultsshowedthatin comparisonofthecontrolgroup,PC(phosphatidyIcholine)inphosphdipldcompositionofredblc~:lmembrane increasedremarkablyintheexperimentalgroup,butSM(sphingomyelin)andPE(phosphatidylethanolamines) decreasedindifferentdegrees.Inparticular.PS(phasphatidylserine)contentandSMCandPS/PCratiode— craesedremarkably.PlateletandredcellEPMWasremarkablyhigherthanthatintheeontrolgroup,Thefind— ingsindicatethatGalLhasanimportantfunctioninmaintainingthestablestatusofthecellme mbrane Keywords:glossyganoderma(Ganode~tucidium,GdL);redblc~:lcell;platelet;membranephcspho一 1ipid;electrophoresismobility