【doc】高效液相色谱法测定香蕉中的多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵

【doc】高效液相色谱法测定香蕉中的多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵 高效液相色谱法测定香蕉中的多菌灵、噻菌 灵、甲基硫菌灵 34第21卷,第2期 2012年3月 化学计量 CHEMICALANALYSISANDMETERAGE VOI.21.No.2 Mar.2012 doi:lO.3969/j.issn.1008-6145.2012.02.010 高效液相色谱法测定香蕉中的多茵灵,噻茵灵,甲基硫茵灵 周雪晴1,2,谢艳丽1,2,张青.,冯玉红1,2 (1.海南省精细化工重点实验室,海口570228;2.海南大学分析测试中心,海VI570228;3.海南大学环植学院,海口570228) 摘要采用高效液相色谱法测定香蕉中的多菌灵,噻茵灵,甲基硫茵灵.样品经乙腈提取,硅胶柱净化后用 HPLC法测定,外标法定量.对样品前处理和色谱分析条件进行了研究和优化.3种杀菌剂在确定的浓度范围内线 性良好,相关系数r?0.999.添加3个浓度水平品的回收率分别为:多茵灵80.5%,91.2%,噻菌灵81.2%, 86.9%,68.9%,72.6%.该法对多茵灵,噻茵灵,甲基硫茵灵3种杀菌剂的检出限较低,分别为0.008.0.009,0.O15 mg/kg.该方法可满足香蕉中多菌灵,噻菌灵,甲基硫茵灵的残留限量检测要求. 关键词香蕉;多茵灵;噻菌灵;甲基硫茵灵;高效液相色谱法 中图分类号:0657.7文献标识码:A文章编号:1008-6145(2012)02—0034-03 DeterminationofCarbendazim,ThiabendazoleandMethylthiophanateinBanana byHighPerformanceLiquidChromatography ZhouXueqing,XieYan1ZhangQing,FengYuhong (1.HainanProvincialKeyLabofFineChem.,Haikou570228,China;2.ChemicalAnalyticalandTestingCenterofHainanUniversity, Haikou570228,China;3.CollegeofEnvironmentandPlantProtectionofHainanUniversity,Haikou570228,China) AbstractAmethodofhighperformanceliquidchromatographic(HPLC)wasdevelopedtodeterminetheresidues ofcarbendazim,thiabendazoleandmethylthiophanateinbanana.Samplesextractedwithacetonitrile,extractswerecleaned upbysilicagelcolumn.AnalyticalsamplesweredeterminedbyHPLCandquantifiedbyexternalstandardmethod.The averagerecoveriesspikedinbananaatthreeconcentrationlevelsofcarbendazim,thiabendazoleandmethylthiophanate were80.5%一91.2%,81.2%广86.9%,68.9%一 72.6%,respectively.Thedetectionlimitsofcarbendazim,thiabendazoleand methylthiophanateinbananasampleswere0.008,0.009,0.015mg/kg,respectively.Theresultshowedthemethodis suitableforthedeterminationofcarbendazim,thiabendazoleandmethylthiophanateinbanana. Keywordsbanana;carbendazim;thiabendazole;methylthiophanate;HPLC 香蕉为热带水果,是华南地区主要经济作物之 一 .多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵在防治香蕉病虫害 中发挥着重要作用,它们都属于苯并咪唑类农药,这 类物质在自然环境中降解较慢,对人,畜有一定的毒 副作用….近年来,随着人们对食品安全和绿色食 品的重视,水果中农药残留问题日益突出_2I3J.目前 有关多菌灵,噻菌灵单剂的残留检测较多,但同时分 析香蕉中多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵的相关方法少 见报道'4J.笔者采用高效液相色谱法对香蕉中的多 菌灵,噻菌灵和甲基硫菌灵进行提取分析,旨在建立 一 种高效,实用的香蕉中多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌 灵残留分析方法J,为香蕉中农残的测定提供参考. 1实验部分 1.1主要仪器与试剂 高效液相色谱仪:2695型,2487紫外检测器, 配XbridgeC】8柱(150rnnl×4.6mm,5m),美国 Waters公司; 电子分析天平:AB265.S型,梅特勒一托利多 仪器有限公司; 旋涡混匀器:IKAMS3basic型,德国IKA公司; 高速分散器:IKAT25digitaluLTRA—TuRRAx 型,德国IKA公司; 氮吹仪:ZymarkLV型,美国Caliper公司; 超声清洗机:KS一120EI型,宁波海曙科生超声 设备有限公司; 真空干燥箱:VD23型,德国BINDER公司; 乙腈,甲醇:色谱纯,美国Sigma公司; 丙酮,正己烷:分析纯; 海南大学2010年青年基金项目(qNjlO03);海南大学研究生 创新平台科研项目基金 联系人:周雪晴;E-mail:zhouxueqing001@sina.com 收稿日期:2011-12—15 周雪晴,等:高效液相色谱法测定香蕉中的多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵35 超纯水:英国ELGA超纯水仪制备; 固相萃取柱:硅胶填料,500mg,6mL容量; 针筒过滤器:0.22gm,上海兴亚净化材料厂; 多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵标准品:浓度均为 100lag/mL,农业部环境保护科研监测所. 1.2色谱条件 色谱柱:WatersxbridgeC18柱(4.6mm×150rnIIl, 5gm);流动相:乙腈一2mmol/L乙酸铵溶液(体 积比40:60);流速:0.8mL/min;检测波长:280 nlrl;进样量:100pL. 1.3样品制备 称取20g香蕉泥于150mL烧杯中,加入6O mL乙腈,用匀浆机以转速15000r/min匀浆提取 2min后用滤纸过滤,收集滤液于100mL具塞量筒 中,加入干燥后的氯化钠振摇,静置后分层.准确吸 取上层样品乙腈溶液40mL,用氮吹仪吹干,加入2 mL丙酮一正己烷(体积比1:9)溶液溶解,待净化. 固相萃取柱分别通过10mL丙酮,5mL正己烷 预处理,加入待净化的样品溶液,再加入5mL丙酮一 正己烷(体积比1:9),舍弃流出液.将20mL甲醇一 丙酮(体积比1:1)溶液分4次加人进行洗脱,收集 洗脱液,于4O?旋转蒸发仪中浓缩至干,加入2mL 乙腈定容,待测定. 2结果与讨论 2.1检测波长的选择 用紫外分光光度计对多菌灵,噻菌灵和甲基硫 菌灵标准溶液进行全波长扫描(180,900nli1),结 果明在280nli1有最大吸收,因此选择280nnl作 为检测波长. 2.2流动相及洗脱条件的选择 分别试验不同比例的甲醇一水,甲醇一缓冲盐 体系,乙腈一水,乙腈一乙酸铵溶液等混合溶剂体系 对3种农药的分离效果,结果表明,甲醇与水的体积 比为60:40,流速为O.8mE/min时,3种农药的谱 图相互重叠;甲醇与磷酸盐缓冲液(pH6.8)体积比 为60:40时,3种农药能分开,但是保留时间较长, 而且磷酸盐对色谱柱及仪器的维护影响较大;乙腈 与水的体积比为40:60时,3种农药能分开,但分离 度不理想;流动相为乙腈一2mmol/L乙酸铵溶液 (体积比40:60)时,3种农药能完全分开,而且峰型 较好. 在优化的色谱条件下,多菌灵,噻菌灵,甲基硫 菌灵混合标准品的色谱峰见图1. 3456'789l0 t/min l一多菌灵;2一噻菌灵;3一甲基硫菌灵 图1多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵混合标准品的色谱图 2.3提取溶剂的选择 比较了乙酸乙酯,乙腈两种溶剂的提取效果, 结果见表1.从表l可以看出,样品用乙腈提取的 效果较好,回收率较高,重现性较好;乙酸乙酯提取 效果差,并且乙酸乙酯与水分层不明显,导致样品损 失较大,重现性差,所以选择乙腈作提取溶剂. 表1不同提取溶剂的回收率结果 回收率/%农药添加量/ ??kg-乙腈乙酸乙酯 多菌灵O.291-367_3 嚷菌灵0.286.17l-2 甲基硫菌灵0.282.668.7 2.4标准曲线与线性关系 准确移取多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵农药标 准品(浓度均为100Ixg/mL)各lmE于5mL容量 瓶中,定容得20g/mL混合标准溶液,逐级稀释至 浓度分别为4,2,1,0.5,0.2,0.1~tg/mL.在实验确 定的最佳色谱分离条件下进行色谱测定,以各组分 的峰面积(Y)对样品浓度()做标准曲线,结果见 表2. 表2多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵的标准曲线和检出限 农药标准曲线方程,检出限/mg?kg一 多菌灵Y=52247x-315.880.99980.008 噻菌灵Y=45877x-832.950.99980.009 甲基硫菌灵Y=33216x-214.440.99990.0l5 实验表明,多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵3种农 药在0.1,10gg/mL范围内线性相关性良好,均 大于O.999,按照信噪比/3得到该方法对多 菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵的检出限分别为0.008, 0.009,0.015mg/kg,可以满足香蕉样品的最高残留 限量(MRL)的检测要求J. 2.5回收试验 在空白香蕉样品中分别添加3种浓度的混合标 准溶液,每种浓度做3次平行试验,按照上述样品前 处理方法和仪器工作条件进行试验,用外标法定量, 计算回收率,结果见表3. 由表3可知,多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵的 加标回收率分别为80.5%,91.2%,81.2%,86.9%, 68.9%,72.6%,满足农残分析准确度要求. 36化学分析计量2012年,第21卷,第2期 表3回收试验结果("-3) 添加浓度/(平均回收率?RSD/% mg?kg-多菌灵噻菌灵甲基硫菌灵 O-291.2?6.681.2?7.870.3土5.6 0.584.34-5.286.4?6.472.6?4.9 1080.5?6.086.9?7.368.9?6.0 2.6样品测定结果 取海南市场上不同品种的香蕉样品,按l_3样 品处理方法进行提取浓缩,用2mL乙腈定容后进 行液相色谱检测,图2是香蕉样品的色谱图(其中甲 基硫菌灵未检出).表4是不同样品的检测结果. 345678910 t/mha 1一多菌灵;2一噻菌灵 图2香蕉样品的色谱图 表4不同香蕉样品农残检测结果 含量/mg?kg-样品编号 多菌灵噻菌灵甲基硫菌灵 HN0010.0650 HN0020.1224 HN0030.17390.0459 HN0040.0346 HN0050.230700640 HN0060.0907 HN0070.03200.0I6O HN008 HNoo90.05620.0295 HNO100.0l66 通过与多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵的标准色 谱峰保留时间对比,得到不同样品中的农残检测结 果.由表4可以看出,只有HN008样品中3种农残 没有检出,其它样品中都检出一种或几种农残,均小 于国家标准规定食品中农药最大残留限量的要求: 多菌灵0.5mg/kg(香蕉),噻菌灵5mg/kg(香蕉), 甲基硫菌灵1mg/(香蕉). 3结语 采用液相色谱法对香蕉样品的农残进行检测, 香蕉样品中的多菌灵,噻菌灵,甲基硫菌灵得到了较 好的分离,该方法准确可靠,灵敏度高. 参考文献 [1]刘杰,杨春亮,查玉兵,等.高效液相色谱法一荧光检测器同时 检测龙眼中多菌灵和噻菌灵残留[J].广东农业科学,2010(3): 15O一152. [2]NY/T1453-2007蔬菜及水果中多菌灵等l6种农药残留测定 液相色谱一质谱一质谱联用法[S]. [3]盛灵慧,赵正宜,王晶,等.液相色谱法测定多元维生素片中4中 水溶性维生素[J].化学分析计量,2010,19(1):30--32. [4]廖涛,杨玉平,程薇,等.苹果中多菌灵,噻菌灵和甲基托布津 的高效液相色谱法分析[J].分析测试技术与仪器,2010,l6(4): 257-261. [5]FiligenziMS,PuscherB,AstonLS,eta1.Dterminationof melamineandrelatedcompoundsinkidneytissuebyliquid chromatography/tandemmassspectrometey[J].JAgriFood Chem,2008,56(17):7593—7599. [6]GB2763—2005食品中农药最大残留限量『S]. 微量水分测定仪的种类 市售的微量水分测定仪,按测试方法分为以下几种: (1)红外法类仪器.体积小,测定范围比较宽,精确度 差,适合水分含量为5%90%的木材,纸张等材料的测定, 结构简单,价格低廉. (2)卡尔费休库仑法类仪器.主要原理:利用化学反应 后电导率变化进行计算,结构复杂,体积较大,测定精确度最 高,适合水分含量在100mg以下(总含量)的测定.它一般 用于阴离子聚合等对水分有非常严格要求的化工,医药等行 业产品的测定,价格较高. (3)卡尔费休容量法,结构比较简单,体积和精确度适 中,适合水分含量O.01%,lOO%(体积分数)的测定,一般用 于对水分有严格要求的化工,医药和包装等行业产品测定, 价格从数千元到数万元不等. 对于一般行业,在测定乙酸乙酯等溶剂的水分含量时, ,10 使用卡尔费休容量法水分测定仪完全可以满足每日2次测定的要求,且经济性比较好.(中国化工仪器网) 全球生命科学与化学仪器市场已达302亿美元 美国市场调查与咨询公司MarketsandMarkets官网最 新发布了一份市场报告,该报告主要分析研究了美国,欧洲, 亚洲及其它地区的主要市场驱动力,影响因素及发展机遇. 报告中指出,2011年全球生命科学和化学仪器市场规 模估计已达到302亿美元,2011,2016年的复合年均增长率 为8.4%,预计2016年该市场规模将增长到452亿美元.其 中,2011年光谱细分市场所占份额最大,约为33.8%,色谱细 分市场位列其次,约占22%.此外,由于受到质谱色谱技术 联用的推动,光谱市场在2011—2016年的复合年均增长率将 为7.4%. 生命科学和化学仪器常被用于开发新的诊断方法,疫苗 和疗法,以改善人类健康;可用于提高农业生产能力,如通 过控制污染和防治害虫用于治理环境,采用有机材料生成能 源:还可以协助产业创新.(中国化工仪器网)