HPLC法测定广西八角莲中鬼臼毒素的含量

HPLC法测定广西八角莲中鬼臼毒素的含量 () 注射液 本院制剂。本法 药典法 2 方法和结果 951021 951227 960302 951021 951227 960302 211 离子浓度测定 乳酸钠林格注射液中钾、钠、氯化钠 99197 186 11 11 198 192 991001009999 钙、氯离子浓度的 氯化钾 99195 99190 99189 99191 99186 99185 测定: 将钾、钠、钙、氯4支离子选择性电极装入电解 氯化钙 99172 99168 181 99181 99174 99190 99质分析仪相应电极孔中。测定时利用仪器自动取样功 乳酸钠 99193 99195 99199 10012 10010 99194 能, 根据电极电位信号, 经仪器内微处理机的分析处 理, 几秒钟内可得到钾、 钠、 钙、 氯4种离子的浓度312 本法测定温度为10, 35?, 应使试液处于同一 ()ƒ。乳酸钠林格注射液中4 种电解质在水中m m o lL 温度, 以减少测定误差。—983电解质分析仪有3个 M I 测量模式, 即血清、血浆、尿液测量模式, 宜选择血 清+ + 2+ - - 完全电离成 、、、、3 。 KN aC aC lC 3H 5O 测量模式。 钾、钠、钙、氯离子浓度的测定: 取钾钠钙氯质 + 控液, 校正电解质分析仪, 使读数为 : 4、ƒK m m o lL + 2+ - : 130ƒ、: 1135ƒ、: 110N am m o lL C am m o lL C lm 参考文献 ƒ。校正后, 取乳酸钠林格注射液, 测定其中钾、 m o lL 1 中国药典. 1995. 二部: 403 ()钠、 钙、 氯离子浓度 ƒ。每种离子浓度取C m m o lL ( )本文于1996年3月25日收到 3次测定的平均值。 212 乳酸钠林格注射液中4种电解质的含量 4种电 解质在水中的电离比: 氯化钾、氯化钠、乳酸钠均为 (1 ? 1, 氯化钙为1? 2, 根据211测得的离子浓度 Cm ) 计算4种电解质的含量:ƒ, m o lL 法测定广西八角莲中HPL C - 3 - 1 + () 氯化钾含量= ×10×74155×10% C K 鬼臼毒素的含量- 3 - + 2+ ) (氯化钠含量= [ - - 2×10×58145 C C lC KC Ca- 1 ×10% 上海第二医科大学瑞金医院药剂科 200025 - 3 - 1 2+ () 氯化钙含量= ×10×147×10% C CaΞ 余自成 王丽平 郁人海 卢 恕 李伟元 - 3 + + ) (乳酸 钠 含 量= [ - 氯 化 钠 中 × 10× CN aCN a- 1 112106×10% + - + 2+氯化钠中 = - - 2CN aC C lC KC Ca 八角莲为小檗科八角莲属植物六角莲及八角莲 , 具有清热解毒、 活血散瘀、 化痰散结的功 的 根茎213 回收率试验 乳酸钠林格注射液每1000中 mL 1 含乳酸钠311、氯化钠6100、氯化钾0130、氯化钙ggg () 效 。鬼臼毒素 为八角莲的主要成 Po dop h y llo to x in2 分 之 一, 药 理 实 验 明 具 有 抗 肿 瘤 及 抗 病 毒 作 ( ) 准确称取各电解质 含2H O 0120g。模拟以上组方, 23 4, 5 用 , 此外还具有免疫调节作用 。 () 适量, 溶于适量蒸馏水中, 制成1000溶液 = 8, mL n , 在安徽、浙江、福建、 八角莲在我国分布范围广() 测 定其中钾、钠、钙、氯离子浓度 按ƒ, C m m o lL 台湾、 湖北及广西等地均有出产。本文建立了 R P — 212 计 算 4 种 电 解 质 的 测 得 量。计 算 平 均 回 收 率 和分离和测定八角莲中鬼臼毒素含量的方法, 并 H PL C () = 8得: 氯化钾为99192% 、011166% , 氯化 R S D n () 对广西八角莲 . . D y sosm a g u ang x ions is YSW ang钠 为 99195% 、 011696% , 氯 化 钙 为 99168% 、 中鬼臼毒素含量进行了测定。 010911% , 乳酸钠为99197% 、 012943% 。 1 仪器与药品214 对比试验 取乳酸钠林格注射液3批, 按本法测 定, 同时与药典法作比较, 结果如表1。 型恒流泵, 486型 510W a te r s 高效液相色谱仪, 3 讨论U V 检测器, M illenn ium 2010色谱管理系统, D EC 微 机。 311 M I—983电解质分析仪具有自动取样、清洗、校 正、标定功能, 每次测定只需40 s。本法操作简便, 回 Ξ 上海第二医科大学化学教研室 (200025) 收率好, 结果准确, 易于普及推广, 为一快速测定法。 ? 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. )()(= 3。 鬼臼毒素对照品 。甲醇 色谱纯, 上海 S IGM A 21316 样品测定 用本法对广西八角莲4个样品进 ) 吴泾化工总厂, 其它试剂均为 级。广西八角莲样 A R 行了测定, 结果平均含量为0150% 。 品购自产地, 并经江苏省植物研究所邓懋彬教授鉴 3 讨论 定。311 本试验中研究了提取溶剂及提取时间对实验结 2 方法与结果果的影响, 用乙醚、氯仿、丙酮及无水乙醇等溶剂进 精密称取鬼臼毒素对照品 211 对照品溶液的制备 111, 加乙醇于50容量瓶中定容即得, 其浓度为 m gmL 提取效率最高且干 , 结果表明, 行提取氯仿回流8h , 22。ƒm gL 扰成分少, 适于作为提取溶剂。 6g, 精密称取广西八角莲粗粉212 样品溶液制备 及 312 扫 描 图 谱, 根 据 U V 鬼 臼 毒 素 在 207nm 过滤, 减压浓缩至干, 加 用氯仿80mL 回流提取8h , 290nm 处有吸收峰, 本试验选择207nm 为U V 检测波 长, 提高了检测灵敏度。 乙醇溶解, 置25mL 容量瓶中定容。精密吸取5mL , 离 即为样 心, 精取上清液1mL 置25mL 容量瓶中定容, 313 本文建立了 R P —H PL C 测定鬼臼毒素含量的 品溶液。方法, 并对广西八角莲中鬼臼毒素进行了含量测定。 213 测定方法 该方法简便可靠, 易于操作。 ( 21311 色 谱 条 件 色 谱 柱 10Λm , ΛBo ndap ak C 18 () ) 319×300; 流动相: 甲醇—水 65? 35; 流速: ( )mm mm 本文于1996年4月29日收到 检测波长: 柱温: 45?; 检测灵 1mL ƒm in; 207nm ; () 敏度: 01005。按信噪比 ƒ测得鬼臼 > 3, A U F SSN 毒素检出限为1。分离情况见图1。ng 改进索氏提取器 总后卫生部药品仪器检验所 北京 100071 聂凌云 刘 云 窦承日 () 索氏提取器 So xh le tθs ex t rac to r是实验室常用 的一种有效的溶剂回流提取装置。它具有许多优点: 1. 连续回流提取, 节省溶剂; 2. 提取连贯, 无中间 反复 滤过带来的损失; 3. 既能提取, 又能浓缩提取液, 回收 溶剂; 4. 提取较完全, 实验重复性好。适合于提 取中药图1 广西八角莲根茎中鬼臼毒素分离色谱图 品 样品. . ab 亲脂性强、 加热不易变化的成分。 1. 鬼臼毒素 2, 3. 未知物 在日常检验工作中, 索氏提取器也有其不足之 21312 线性关系 精密吸取对照品溶液1、2、5、8、 处: 1. 回收溶剂操作不方便。常用的方法是在溶剂蒸 上 管还未达到虹吸回流管顶端以前拔下冷凝管 , 10、 12、 15分别进样测定。测得鬼臼毒素在22,B A ΛL 用吸管从管中往外吸; 或是拔下 瓶使、脱离, B C BC () () 330范围内进样量 与峰面积 的回归方程 ng Y X 然后用回收溶剂瓶接在管下口, 倾斜索氏提取器使 B 为: 管中溶剂流入回收溶剂瓶中。不管哪一种操作都比 B - 4较麻烦, 尤其在同时操作3批6份样品时, 容易出现差 = - 110+ 11156×10 = 019996 Y Xr错。2. 溶剂损失多, 特别是乙醚、丙酮等易挥发性溶 21313 稳定性试验 鬼臼毒素对照品溶液在4?放 剂, 而且污染空气。 置2个月, 测得峰面积无变化。 我们将原来的索氏提取器 管下部自行一B 21314 精密度试验 将广西八角莲同一样品按 “样 品溶液制备”项下方法操作, 4次测定 = 5123% 。R S D 21315 回收率试验 取不等量的鬼臼毒素对照品分 别加入八角莲的粗粉中, 按“样品溶液制备”方法处 () 见图1, 可在提取过程中将其关闭, 在预 个阀门 D 理后测定, 平均回收率为10317% , = 3152% (试提取是否完全和回收溶剂时打开 D 将溶剂直接放 R S D n ? 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.