破坏狗肾淋巴循环对移植肾影响的实验研究

破坏狗肾淋巴循环对移植肾影响的实验研究 破坏狗肾淋巴循环对移植肾影响的实验研 究 73-7~中国临床解剖学杂志1999年第17卷第1期 ,).73/ 于连发文小军扬文亮 循环对移植肾影响的实验研究 袁九银王栋任同明 张爱荣王树兴 6,2 【摘要】目的:探讨自体肾移植后淋巴固索对移植肾的影响,为'移植术是否需要吻合淋巴管提供 参考方法:实验动物为8只成年家犬,开腹,游离并切断左侧肾蒂,置于左储窝,将肾动脉与左髂内动脉吻 台,肾静脉与左储总静脉吻合,但不吻合淋巴管.右肾作为对照,分别在术后第8,12,2L天处死动物,用肉 眼,光镜和透射电镜观察移植肾的变化.结果肉眼观,左右肾的大小,颜色-质地无差别-但移植肾与周围 组织广泛粘连;光镜:健侧'皮质肾小管上皮细胞有水样变性,髓质内偶见少量的蛋白和细胞管型.患侧肾 院见到与健侧类似的变化外,皮质内偶见脂肪变性,少数肾小球萎缩,部分肾小球代偿性肥大和集合管间 质轻度纤维化}电镜两侧肾小球无明显异常,实验侧近曲小管上皮细胞肿胀,微城毛排列紊乱.胞浆内空 Experimentalstudyontransplantedkidneywithdestroyedlymphaticcirculation YangShushan,ZhangHongqi,Dou0ifeng,a1 DepartmentofAnatomy,XimciangMedicalCollege,Xin:ciang453003 Objective:Toexplorelymphaticfactoraffectedforkidneytransplantationandtoproviderefe rencefor kidneytransplanrmtion.Methods:Eightleltkidneyso{dogswelq~dislocatedandanastomosedwithleftin— ternaliliacarteriesandleftcommoniliacvei~srespectively,butthelymphaticanastomosiswasnotper— formed.Theanimalswerekilledondays8,12and21respectively.Thebilateralklndneyswereremoved outandobservedbynakedeyeorunderlightandtransmissionelectronmicroscopesResultsjTherewas noobviouschangeinsize?colorandhardnessbetweenIehandrightkindneysbutedhesionwithadjacent tissueintransplantedkidney,~.Underlightmicroscope,therewerehydropicdegenerationinepithelialcells ofproximaltubuleinrightrenalcortexandalittleproteinandcellularcastsinmedulla.Thechangesin transplantedkidneywerethesameasthoseinhealthykidney,withtheexceptions.{~attydegeneration.a— trophyandcompensatoryhyperterophyo{glomeru[us.andmildinterstitial~ibrosiso{collectingtube.Un— derTEM,epithelialturgescence.{proximaltubuletirregulararrangemento{microvilli,increa~o{vacuole and[ysosmeincytoplasmandepithelialnecroseso{distalconvolutedtubuleandcollectingtubecouldbe seel~ConelusiousjThislymphaticanastomosiscouldbedisregardedtemporarily. KeywordsKidneytransu】antatl.nLymphaticvesselPathologicchange 肾移植已广泛开展.在免疫排斥反应控制,血液循 环建立和感染控制等方面都取得了可喜成绩,但移植 后肾脏的存活时间仍不太满意,其原因是极其复杂的. 其中肾移植后在淋巴循环与神经支配等细节问题上仍 届空白,国内尚未见这方面的文献报遭.George (1986)发现肾淋巴管的密度与尿液的浓缩有关.结扎 肾蒂淋巴管后,肾组织出现问质水肿,早期肾实质营养 障碍,晚期基质硬化等病理变化.作者在对狗肾淋巴流 向与狗肾淋巴回路重建实验研究的基础上.做狗的单 侧自体肾移植.但不吻合肾的淋巴管,观察肾组织结构 有无改变,试图探讨破坏肾淋巴循环后对移植肾的影 响.为临床上肾移植是否需要吻合肾淋巴管提供直接 依据. l材料和方法 宴验动物为健康成年家狩8只,雌雄不拘,体重12,19kg一 静脉复台麻醉.气管插首控制呼吸2.5硫喷妥钠l(),15ml 腹腔注射.氯胺酮2o,50mg/只.安定5mg只静脉闻断滴人皮 怍者单位.453003新乡市河南省新乡医学院解剖学教研室 肤常规剪毛消毒-经左蜘腹直肌切口长约l5,20cm,逐层切开 进入腹膜腔-暴露双侧肾脏.右肾保持原位,作为自身对照.分 别游离左肾及肾蒂中的肾动脉,静脉,肾盂,输尿管,左储内动 脉与左储总静脉.取下左肾,立即用4?的林格氏液冲洗肾脏 (300m1)至肾呈灰白色并用冰帽包裹,保护左肾.断流左髂内 动脉与左髂总静脉,用5%聚丙烯缝线3定点间断缝合法,作髂 内动脉与肾动脉,左髂总静脉与肾静脉吻台.开放肾循环可见 肾立即恢复血供,吻台血管张力不大.输尿管内有尿液通过.吻 台口无渗血,常规关闭腹腔.术中静脉点浦青霉索240万,预 防术后感染.术中移植肾热缺血5rain左右,砖缺血40rain左 右.术后动物精心喂养,刀口无感染,左下肢血供与静脉回流无 明显异常.分别于术后第8,12,21d处死动物,从健侧(右侧)和 试验侧(左侧)皮质和髓质分别切取标本,光镜标本置于l0%播 尔马林中固定.常规石腊包埋切片,HE染色}电镜标本置于戊 二醛和锇酸双固定.Epon812包埋,超薄切片,铅铀双重染色, H一500透射电镜观察拍照. 2结果 2.1大体观察 试验侧(左侧)肾的大小,颜色,质地与右肾无明显 差别.但移植肾周围组织广泛粘连,固定良好,吻合血 管通畅.其中有l例肾上段和上前段颜色较淡,质硬, 肾体积较健倒小,其原因是,肾动脉变异,术中误将动 巴峰淋 肾 狗墼 坏 破 '74?CHINESEJOURNALOFCLINICALANATOMYVOL17NO.11899 昧结扎.引起血供障碍所致. 2.2光镜观察 偶见肾小管上皮细胞 健侧肾皮质未见明显异常. 水样变性.实验侧皮质除可见近曲小管不同程度的水 样变性外,还偶见脂肪变性,少量蛋白和细胞管型,少 数肾小球萎缩,部分肾小球代偿性增大.健侧髓质未见 异常,偶见少量细胞与蛋白管型.实验侧髓质也可见少 量蛋白和细胞管型,集合管间质轻度纤维化. 2.3电镜观察 健侧和实验侧肾小球结构无明显异常.而实验侧 近曲小管上皮细胞肿胀,表面微绒毛排列紊乱,胞浆内 空泡增多,线粒体嵴模糊,溶酶体明显增多,远曲小管 与集合管可见部分细胞坏死(图1,3). l_足细胞2足实3.毛细血管p{皮十基底膜{毛细血管腔5.红细胞 圈1患侧肾小球与健侧相似,无明显改变TEM×5000 1.冒j状缘2线粒体空袍.撸酶体4.上皮细胞核 圈2移植后肾近曲小管上皮细胞内线粒体空泡(近腔面更明显)溶酶体增多TEM ×6000 I集合首腔2线粒体空袍3.细胞棱 圈3移植后肾髓质臬合管上皮细胞内的线粒体空泡也增多TEM×8500 3讨论 3.1关于血管吻合部位的选择 肾移植手术是成功的.在吻合血管的选择上,以口 径大致相当较为合适作者的以髂内动脉与肾动 脉吻台,髓总静脉与肾静脉吻合为较理想的选择.其 中2例因选择髂外静脉与旋髂探静脉吻合而导致失败 (未计在8只内).在游离肾,切断肾蒂时应注意动脉的 变异,其中1例因结扎变异的肾上段,前上段动脉而导 致两肾段的坏死. 3.2引起肾脏结构改变的可能原因 移植后肾组织形态结构变化不 从实验结果来看, 显着,光镜下仅出现部分近曲小管上皮细胞水样变性, 少量的细胞与蛋白管型等;电镜下出现近曲小管上皮 细胞肿胀,微绒毛排列紊乱,胞浆内空泡增多,线粒体 嵴模糊,溶酶体明显增多等.作者认为,这些变化可能 与暂时性的淋巴循环障碍,内环境紊乱,基质水肿,肾 小管上皮细胞的液体运输失调有关溶酶体增多可能 是细胞加强自嗜作用所产生的适应性反应.因溶酶体 是细胞内的"清洁工",其内含有丰富的酶类,当淋巴回 流障碍时.细胞内可出现大量水肿变性的细胞器等需 要清除所致.有实验研究证实:肾淋巴回流障碍时可出 现淋巴淤滞,结缔组织间质蛋白质再吸收障碍,蛋白质 滞留,基自质水肿,胶原纤维数量增加,基膜增厚,蛋质 堆积,肾组织轻度硬化等变化.这与我们的结果不甚 一 致.作者认为,出现实验结果不一致的原因是否与结 扎而切断淋巴管形成淋巴淤滞的动物模型有关.作者 在肾移植时只是切断肾淋巴管而未结扎,新生的淋巴 液仍可外溢,再被周围组织所吸收,不易形成淋巴淤滞 模型据Moblry.报道,淋巴管再生能力强,移植的组 织或器官淋巴管也可再生,在狗肾移植实验中,见到肾 淋巴管从术后第3d开始再生,第3周接近正常.作者 进行的实验动物术后最长时间也正是3厨. 本文实验结果提示:肾移植可暂不考虑淋巴回路 的重建(吻合淋巴管),至于这样长期下去会不会影响 移植肾的存活与功能,还有待于进一步研究淋巴管的 再生和肾移植后较长时间的实验研究所证实. 4参考文献 1GeorgeKN?HarrietMJ,0moh?PI.毗.ITheremalcortical lyrephmiestemth—l1.hams~eTnd~abbh.theAmericanj0uT- halofAnatomyt1986.17712l 2M忡『邶A^.EpeMnurA.I】oBAa1.wMT『……x ?…J[OqHHpen月H…川HMarH…cyjn&^x『1R ^i1.1980t29(10):80 3杨善丈小军.杨丈亮,等肾移植淋巴回路重建的实验研究.中国 临来解剖学杂志.1992.10【4】290 4MobleyJE.OdetlRM.TheroleofLymphaticsLnren~ltransp]anta- LionRenallymphaticregeneration.JSurgRes,1967.7:23